一種腫瘤藥物植入緩釋載體材料及其制備方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)提出了一種腫瘤藥物植入緩釋載體材料的制備方法，包括以下步驟：S1.葉酸活性脂的制備；S2.PEG?OMs的制備；S3.PEG?

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
一種腫瘤藥物植入緩釋載體材料及其制備方法
本專利技術(shù)涉及生物醫(yī)藥
，具體涉及一種腫瘤藥物植入緩釋載體材料及其制備方法。
技術(shù)介紹
傳統(tǒng)的化學(xué)治療腫瘤疾病中大多數(shù)藥物是以普通劑型給藥，通常會(huì)被細(xì)胞組織和器官攝取，隨機(jī)地分布于體內(nèi)，而不是定向分布于病灶區(qū)，這主要是由于體內(nèi)環(huán)境與藥物作用的結(jié)果，如口服給藥會(huì)受到胃腸道上皮細(xì)胞及肝中酶類降解與代謝，注射給藥又要受到血漿蛋白的結(jié)合、分解等作用，最終也僅有少部分藥物到達(dá)腫瘤病變區(qū)，這兩種給藥方式可能使藥物濃度達(dá)不到治療效果，要達(dá)到藥物療效就要增大給藥劑量，這樣也增大了對(duì)正常組織和細(xì)胞的毒副作用，因此將化療藥物制成特異性靶向給藥體系，即能提高治療效果，又可降低毒副作用。在臨床治療中，藥物的低毒和高效一直是人們研究的重點(diǎn)，化療是臨床上治療腫瘤的主要手段，但是目前傳統(tǒng)的化療藥物普通劑型缺乏靶向性，在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時(shí)也會(huì)對(duì)正常細(xì)胞產(chǎn)生毒性，引起的毒副作用使患者不能耐受。因此，構(gòu)建靶向腫瘤組織的藥物傳遞系統(tǒng)是解決腫瘤化療問題的有效途徑。近年來，葉酸受體作為抗腫瘤藥物的靶點(diǎn)受到了極大的關(guān)注，成為新型抗腫瘤藥物研究的熱點(diǎn)之一。葉酸是小分子量維生素，相對(duì)于單分子抗體等蛋白質(zhì)，具有結(jié)構(gòu)穩(wěn)定、價(jià)格低廉、無免疫原性等特點(diǎn)。研究發(fā)現(xiàn)，葉酸受體(folatereceptor，F(xiàn)R)是一種跨膜單鏈糖蛋白，在大多數(shù)上皮組織的惡性腫瘤細(xì)胞中過表達(dá)，而在正常細(xì)胞中低表達(dá)。利用葉酸受體在腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞上表達(dá)的差異性及葉酸受體與葉酸和葉酸類似物結(jié)合的高特異性、高親和性，通過葉酸受體的介導(dǎo)作用可望實(shí)現(xiàn)腫瘤的靶向性。葉酸受體介導(dǎo)的靶向給藥系統(tǒng)主要采用兩種手段，一種是對(duì)藥物分子的直接葉酸化修飾，另一種是對(duì)藥物載體的葉酸化修飾。葉酸直接修飾得到的葉酸-藥物復(fù)合物雖能夠提高藥物對(duì)腫瘤的靶向性，但由于葉酸在生理?xiàng)l件下極低的溶解性能，當(dāng)與藥物形成復(fù)合物后會(huì)降低藥物的溶解性，從而影響其生物利用率。加之一些療效良好的抗腫瘤藥物在生理?xiàng)l件下的溶解度都十分有限，因此藥物載體在這些藥物的臨床應(yīng)用方面極具潛力。而通過對(duì)藥物載體的葉酸修飾化既可實(shí)現(xiàn)難溶藥物或不穩(wěn)定藥物的靶向性輸送，又可避免體內(nèi)酶對(duì)藥物的水解，提高藥物的生物利用率。葉酸修飾的藥物載體主要有脂質(zhì)體、納米粒子、樹狀大分子等。分子影像學(xué)技術(shù)在疾病早期診斷和靶向治療領(lǐng)域極具發(fā)展?jié)摿蛻?yīng)用前景。目前，具有造影功能的靶向抗腫瘤藥物載體尚無，開辟具有造影功能的靶向抗腫瘤藥物載體，為提高疾病治愈率，高敏感、高精準(zhǔn)診療技術(shù)的應(yīng)用必不可少。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的在于提出一種腫瘤藥物植入緩釋載體材料及其制備方法，具有良好的穩(wěn)定性，載藥量較高，載藥面廣；體內(nèi)毒副作用小，抑瘤作用強(qiáng)，藥物釋放穩(wěn)定，釋藥時(shí)間長等特點(diǎn)，本專利技術(shù)且制備方法簡單、使用方便，具有廣闊的應(yīng)用前景。本專利技術(shù)的技術(shù)方案是這樣實(shí)現(xiàn)的：本專利技術(shù)提供一種腫瘤藥物植入緩釋載體材料的制備方法，包括以下步驟：S1.葉酸活性脂的制備：稱取葉酸溶于第一溶劑中，10-30℃攪拌下加入乙基-3-[3-二甲基氨基丙基]碳化二亞胺鹽酸化物和N-羥基琥珀酰亞胺，避光反應(yīng)5-10h，抽濾去除沉淀，余液加入1-3倍體積的第二溶劑并攪拌產(chǎn)生沉淀，抽濾，并用第二溶劑洗滌所得沉淀，干燥即為葉酸活性脂；S2.PEG-OMs的制備：將聚乙二醇2000溶于第三溶劑中，加入三乙胺，置于冰浴中邊攪拌邊加入甲基磺酰氯，冰浴反應(yīng)1-3h，加入飽和碳酸鈉溶液淬滅反應(yīng)，反復(fù)震蕩后，分液，水層用第三溶劑萃取3次，合并所有的有機(jī)相，干燥，減壓除去溶劑，柱層析色譜純化，得到PEG-OMs；S3.PEG-18F的制備：將PEG-OMs加入第四溶劑中，加入Na18F，攪拌反應(yīng)1-3h后，過濾，沉淀用水反復(fù)洗滌1-3次，得到PEG-18F；S4.脂質(zhì)體-PEG-18F的制備：稱取氫化卵磷酯、膽固醇和PEG-18F溶于第五溶劑中，35-40℃減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑直至在容器內(nèi)壁上形成一層脂質(zhì)薄膜，室溫下，置于真空干燥箱中過夜除去殘余的溶劑，用Tris-HCl緩沖液于50-55℃水化脂質(zhì)膜，再將水化后的脂質(zhì)體于45-55℃水浴中，在通氮?dú)獾臈l件下，用高壓擠出器過0.22μm濾膜整粒3-7次，得到脂質(zhì)體-PEG-18F；S5.葉酸-脂質(zhì)體-PEG-18F的制備：稱取葉酸活性脂溶于第六溶劑中，得到溶液A，將脂質(zhì)體-PEG-18F溶于第七溶劑中，得到溶液B，將溶液B逐滴加入到溶液A中，室溫避光攪拌反應(yīng)8-12h，反應(yīng)結(jié)束用第六溶劑清洗1-3次，再用去離子水清洗1-3次，最后用去離子水分散均勻，得到葉酸-脂質(zhì)體-PEG-18F，即為腫瘤藥物植入緩釋載體材料。作為本專利技術(shù)的進(jìn)一步改進(jìn)，步驟S1中所述第一溶劑選自DMSO、乙腈、DMF、四氫呋喃中的一種或幾種混合；所述第二溶劑選自乙醚、甲乙醚、乙醇、甲醇、苯甲醚中的一種或幾種混合；所述葉酸、乙基-3-[3-二甲基氨基丙基]碳化二亞胺鹽酸化物和N-羥基琥珀酰亞胺的質(zhì)量比為1：(0.5-0.8)：(0.1-0.5)。作為本專利技術(shù)的進(jìn)一步改進(jìn)，步驟S2中所述聚乙二醇2000、三乙胺和甲基磺酰氯的物質(zhì)的量之比為(1.8-2.2)：(3-5)：1，所述第三溶劑選自二氯甲烷、三氯甲烷、丙酮、甲苯中的一種或幾種混合。作為本專利技術(shù)的進(jìn)一步改進(jìn)，步驟S3中所述PEG-OMs、Na18F的物質(zhì)的量之比為1：(1-1.2)；所述第四溶劑為飽和碳酸氫鈉溶液或飽和碳酸鈉溶液。作為本專利技術(shù)的進(jìn)一步改進(jìn)，步驟S4中所述氫化卵磷酯、膽固醇和PEG-18F的質(zhì)量比為(1-3)：(2-4)：2；所述第五溶劑選自二氯甲烷、三氯甲烷、四氯化碳中的一種或幾種混合；所述Tris-HCl緩沖液的pH值為7.0-7.5。作為本專利技術(shù)的進(jìn)一步改進(jìn)，步驟S5中所述葉酸活性脂和脂質(zhì)體-PEG-18F的質(zhì)量比為1：(0.9-1.4)；所述第六溶劑選自pH＝9-10的碳酸鹽緩沖液、pH＝6.5-7的PBS緩沖液、pH＝7-7.5的Tris-HCl緩沖液中的一種；所述第七溶劑為pH＝7-7.5的Tris-HCl緩沖液。作為本專利技術(shù)的進(jìn)一步改進(jìn)，所述腫瘤藥物植入緩釋載體材料載藥的方法為：將葉酸-脂質(zhì)體-PEG-18F、腫瘤藥物、三乙胺溶于四氫呋喃、甲乙醚和二甲亞砜的混合液中，滴入去離子水，超聲振蕩，透析去離子后，去除溶劑和未包裹入載體的腫瘤藥物，用0.22μm微孔濾膜過濾大的凝聚物，冷凍干燥，既得。作為本專利技術(shù)的進(jìn)一步改進(jìn)，所述腫瘤藥物包括但不限于DOX氯化物、順鉑、長春新堿、紫杉醇、喜樹堿。本專利技術(shù)進(jìn)一步保護(hù)一種上述方法制得的腫瘤藥物植入緩釋載體材料。本專利技術(shù)進(jìn)一步保護(hù)一種上述的腫瘤藥物植入緩釋載體材料在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。本專利技術(shù)具有如下有益效果：本專利技術(shù)目的以葉酸為藥物載體的靶向材料，并在PEG另一端連接放射元素18F，使其制得的藥物緩釋載體不僅能靶向給藥，還能通過光學(xué)影響跟蹤放射元素18F的分布，從而定位腫瘤的位置和形狀，為精準(zhǔn)醫(yī)療提供了有效途徑；本專利技術(shù)葉酸-脂質(zhì)體-PEG-18F作為藥物緩釋載體，形成膠本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
1.一種腫瘤藥物植入緩釋載體材料的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：/nS1.葉酸活性脂的制備：稱取葉酸溶于第一溶劑中，10-30℃攪拌下加入乙基-3-[3-二甲基氨基丙基]碳化二亞胺鹽酸化物和N-羥基琥珀酰亞胺，避光反應(yīng)5-10h，抽濾去除沉淀，余液加入1-3倍體積的第二溶劑并攪拌產(chǎn)生沉淀，抽濾，并用第二溶劑洗滌所得沉淀，干燥即為葉酸活性脂；/nS2.PEG-OMs的制備：將聚乙二醇2000溶于第三溶劑中，加入三乙胺，置于冰浴中邊攪拌邊加入甲基磺酰氯，冰浴反應(yīng)1-3h，加入飽和碳酸鈉溶液淬滅反應(yīng)，反復(fù)震蕩后，分液，水層用第三溶劑萃取3次，合并所有的有機(jī)相，干燥，減壓除去溶劑，柱層析色譜純化，得到PEG-OMs；/nS3.PEG-

【技術(shù)特征摘要】
1.一種腫瘤藥物植入緩釋載體材料的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
S1.葉酸活性脂的制備：稱取葉酸溶于第一溶劑中，10-30℃攪拌下加入乙基-3-[3-二甲基氨基丙基]碳化二亞胺鹽酸化物和N-羥基琥珀酰亞胺，避光反應(yīng)5-10h，抽濾去除沉淀，余液加入1-3倍體積的第二溶劑并攪拌產(chǎn)生沉淀，抽濾，并用第二溶劑洗滌所得沉淀，干燥即為葉酸活性脂；
S2.PEG-OMs的制備：將聚乙二醇2000溶于第三溶劑中，加入三乙胺，置于冰浴中邊攪拌邊加入甲基磺酰氯，冰浴反應(yīng)1-3h，加入飽和碳酸鈉溶液淬滅反應(yīng)，反復(fù)震蕩后，分液，水層用第三溶劑萃取3次，合并所有的有機(jī)相，干燥，減壓除去溶劑，柱層析色譜純化，得到PEG-OMs；
S3.PEG-18F的制備：將PEG-OMs加入第四溶劑中，加入Na18F，攪拌反應(yīng)1-3h后，過濾，沉淀用水反復(fù)洗滌1-3次，得到PEG-18F；
S4.脂質(zhì)體-PEG-18F的制備：稱取氫化卵磷酯、膽固醇和PEG-18F溶于第五溶劑中，35-40℃減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑直至在容器內(nèi)壁上形成一層脂質(zhì)薄膜，室溫下，置于真空干燥箱中過夜除去殘余的溶劑，用Tris-HCl緩沖液于50-55℃水化脂質(zhì)膜，再將水化后的脂質(zhì)體于45-55℃水浴中，在通氮?dú)獾臈l件下，用高壓擠出器過0.22μm濾膜整粒3-7次，得到脂質(zhì)體-PEG-18F；
S5.葉酸-脂質(zhì)體-PEG-18F的制備：稱取葉酸活性脂溶于第六溶劑中，得到溶液A，將脂質(zhì)體-PEG-18F溶于第七溶劑中，得到溶液B，將溶液B逐滴加入到溶液A中，室溫避光攪拌反應(yīng)8-12h，反應(yīng)結(jié)束用第六溶劑清洗1-3次，再用去離子水清洗1-3次，最后用去離子水分散均勻，得到葉酸-脂質(zhì)體-PEG-18F，即為腫瘤藥物植入緩釋載體材料。


2.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種腫瘤藥物植入緩釋載體材料的制備方法，其特征在于，步驟S1中所述第一溶劑選自DMSO、乙腈、DMF、四氫呋喃中的一種或幾種混合；所述第二溶劑選自乙醚、甲乙醚、乙醇、甲醇、苯甲醚中的一種或幾種混合；所述葉酸、乙基-3-[3-二甲基氨基丙基]碳化二亞胺鹽酸化物和N-羥基琥珀酰亞胺的質(zhì)量比為1：(0.5-0.8)：(0.1-...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：王華，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：杭州亞朗科技有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：浙江;33