一種檢測食用菌及其栽培基質中多種多溴聯苯醚的方法技術

本發明專利技術公開了一種測定食用菌及其栽培基質中多種多溴聯苯醚的方法，屬于食品檢測技術領域。本發明專利技術的方法采用乙腈提取，鹽析分層，乙二胺?N?丙基硅烷復合去活化硅膠SPE柱凈化，氣相色譜?電子捕獲器分析，外標法定量，整個提取和凈化過程快速高效，為研究食用菌及其栽培基質中PBDEs的科研和檢測提供了技術支撐，為后繼研究栽培基質中PBDEs到食用菌的遷移或降解過程提供了可行性，同時為保證食用菌食品安全奠定了基礎。

【技術實現步驟摘要】
一種檢測食用菌及其栽培基質中多種多溴聯苯醚的方法
本專利技術屬于食品檢測
，具體地，涉及一種檢測食用菌及其栽培基質中多種多溴聯苯醚的方法。
技術介紹
多溴聯苯醚(Polybrominateddiphenylethers，PBDEs)是作為一種溴系阻燃劑，廣泛應用于電子、化工、交通、建材、紡織、石油等領域。大量電子垃圾拆解、工業廢棄物堆放、燃燒導致產品中的多溴聯苯醚會釋放到環境中，且濃度呈上升趨勢。由于其具有持久性、生物富集性、長距離遷移等化學特性以及潛在的器官毒性、神經毒性和內分泌毒性等原因，PBDEs的應用已受到密切的關注和控制。2009年商用五溴聯苯醚和商用八溴聯苯醚被被《斯德哥爾摩公約》第4次締約方大會添加進入新型持久性有機污染物列表中，2017年十溴聯苯醚也被列入其中。目前，PBDEs類污染物的研究主要集中飲用水、海洋魚類及其產品、牛奶、雞蛋、肉類和蔬菜等。食用菌作為一類可供人類食用的大型真菌，質量安全的關注點一直集中在重金屬和農藥，有關食用菌及其栽培基質中PBDEs的研究較少。食用菌栽培過程中需要使用大量的木屑、秸稈。據報道，大氣中的PBDEs會在樹木中富集，土壤中的多溴聯苯醚會遷移到玉米秸稈中，栽培過程中的覆土和灌溉水等環境介質中可能會存在PBDEs，因此亟需建立一套方便快速的食用菌及其栽培基質中PBDEs的檢測方法，有利于更加快速、精準的檢測食用菌及其栽培原料中PBDEs的含量，以更科學合理的評估多溴聯苯醚在食用菌中的急慢性膳食攝入風險，保障食品安全。目前PBDEs的提取方法主要有加速溶劑萃取，索氏萃取，液液萃取等，凈化過程一般采用酸堿復合柱凈化、凝膠滲透色譜(gelpermeationchromatography，GPC)等，，這些方法主要針對水產品、畜產品等脂肪含量高的樣品，食用菌及其栽培基質中脂肪含量低，可以使用更為方便快速的乙腈提取SPE小柱凈化，以縮短前處理過程，減少對高價設備的依賴。PBDEs的檢測儀器主要有：GC-ECD、GC-EI/MS、GC-NCI/MS、HRGC-HRMS、GC-EI-MS/MS。由于GC-NCI/MS對許多非電負性干擾物質沒有響應，而且需要使用甲烷氣，因此存在一定的危險性。HRGC/HRMS和GC-EI-MS/MS儀器價格極為昂貴，且十溴聯苯醚BDE209在高溫下離子化不穩定，使用這兩種儀器必須通過內標校正，步驟和成本增多，因此現有技術已經放棄高溴代化合物的檢測。
技術實現思路
本研究旨在探索一種快速，簡單，成本低的檢測方法，為了達到該目的，本專利技術采取的技術方案如下：本專利技術提供一種檢測食用菌或其栽培基質中的多溴聯苯醚的方法，包括以下步驟：S1，取待測樣本，添加水浸沒樣本，3-5倍質量乙腈進行提取，提取完成后加入與待測樣本等量的NaCl，震蕩后離心，取上層乙腈層，氮氣吹干后利用正乙烷復溶，得到上樣溶液；本步驟采取乙腈提取，相比于傳統的索氏提取、加速溶萃取，節省了大量的正己烷、二氯甲烷等溶劑，且不需要昂貴的提取設備，顯著節約成本，S2，將步驟S1制備得到的所述上樣溶液都加入提前用正己烷活化的SPE柱中，開始接收上樣液體，再加正己烷洗脫，將洗脫液吹干后用正己烷復溶，轉移至進樣小瓶中待測；S3，利用氣相色譜-電子捕獲檢測器(GC-ECD)進行檢測，條件如下：程序升溫：初始柱溫100℃，保持1min；再以20℃/min升至140℃，后以2.5℃/min升至170℃；最后以12.5℃/min升至310℃，保持2min；載氣為高純氮氣，流速為3.5mL/min；檢測器溫度300℃；進樣量為2μL，進樣口溫度：265℃；進樣模式：不分流進樣。在本專利技術的一些實施方案中，步驟S2中，在將所述上樣溶液加入至SPE柱之前，進一步包括利用正己烷活化SPE柱的步驟。在本專利技術的一些實施方案中，步驟S3中所述固相萃取凈化-氣相色譜法采用的色譜柱為DB-5，規格為15m×250μm×0.1μm。在本專利技術的一些實施方案中，所述SPE柱的填料為乙二胺-N-丙基硅烷和去活化硅膠復合物。進一步地，所述乙二胺-N-丙基硅烷和去活化硅膠復合物中乙二胺-N-丙基硅烷和去活化硅膠的比例為1:1。更進一步地，所述去乙二胺-N-丙基硅烷和去活化硅膠復合物的制備方法如下：硅膠預先在550℃烘烤進行活化，冷卻至室溫時加入去離子水，振蕩過夜去活化，自下而上分別是墊片、去活化硅膠、墊片、乙二胺-N-丙基硅烷、墊片。在本專利技術的一些實施方案中，用于洗脫的正己烷體積不小于5mL。在本專利技術中，所述多溴聯苯醚選自包括BDE7、BDE15、BDE17、BDE28、BDE49、BDE71、BDE47、BDE66、BDE77、BDE100、BDE119、BDE99、BDE85、BDE126、BDE154、BDE153、BDE138、BDE156、BDE184、BDE183、BDE191、BDE197、BDE196、BDE207、BDE206和BDE209的組中的至少一種。在本專利技術的一些實施方案中，所述多溴聯苯醚包括BDE7、BDE15、BDE17、BDE28、BDE49、BDE71、BDE47、BDE66、BDE77、BDE100、BDE119、BDE99、BDE85、BDE126、BDE154、BDE153、BDE138、BDE156、BDE184、BDE183、BDE191、BDE197、BDE196、BDE207、BDE206和BDE209。在本專利技術的一些實施方案中，所述栽培基質選自包括農作物秸稈、鋸末、豆粕、棉籽殼、稻殼、禽畜糞和土壤的組中的至少一種。本專利技術的有益效果相對于現有技術，本專利技術具有以下有益效果：本專利技術采用固相萃取凈化-氣相色譜法測定食用菌及其栽培基質中26種多溴聯苯醚。氣相色譜法由于不需要離子化，條件相對溫和，高溴代聯苯醚的檢出限與質譜相近。色譜分析相比于氣相色譜串聯質譜儀分析或者高分辨磁質譜分析，儀器設備成本低，一般分析實驗室均可滿足，適用于常規檢測和科研本專利技術采用一種新型的SPE凈化柱，建立了26種多溴聯苯醚(PBDEs)在食用菌及其栽培基質中的檢測方法，相比于傳統的酸性硅膠柱更適合食用菌及其栽培基質中PBDEs的檢測，凈化效果更好，且成本低，操作簡便。利用本專利技術的方法進行檢測，回收率在72.5％～119.2％之間，相對標準偏差在2.2％～13.7％之間，檢出限為0.1～0.3μg/kg，定量限為0.3～1μg/kg。本專利技術的方法為研究食用菌及其栽培基質中PBDEs的科研和檢測提供了技術支撐，為后繼研究栽培基質中PBDEs到食用菌的遷移或降解過程提供了可行性，同時為保證食用菌食品安全奠定了基礎。附圖說明圖1示出了不同提取溶劑對PBDEs的提取回收率影響。圖2示出了不同凈化材料的凈化效果對比。(a)未凈化，(b)去活化硅膠凈化，(c)酸性硅膠凈化，(d)PSA凈化，(e)去活化硅膠復合PSA凈化本文檔來自技高網...

【技術保護點】
1.一種檢測食用菌或其栽培基質中的多溴聯苯醚的方法，其特征在于，包括以下步驟：/nS1，取待測樣本，添加水浸沒樣本，3-5倍質量乙腈進行提取，提取完成后加入與待測樣本等量的NaCl，震蕩后離心，取上層乙腈層，氮氣吹干后利用正乙烷復溶，得到上樣溶液；/nS2，將步驟S1制備得到的所述上樣溶液加入提前用正己烷活化的SPE柱中，開始接收上樣液體，再加正己烷洗脫，將洗脫液吹干后用正己烷復溶，轉移至進樣小瓶中待測；/nS3，利用氣相色譜-電子捕獲檢測器進行測定，條件如下：/n程序升溫：初始柱溫100℃，保持1min；再以20℃/min升至140℃，后以2.5℃/min升至170℃；最后以12.5℃/min升至310℃，保持2min；/n載氣為高純氮氣，流速為3.5mL/min；/n檢測器溫度300℃；/n進樣量為2μL，進樣口溫度：265℃；/n進樣模式：不分流進樣。/n積和過程。/n

【技術特征摘要】
1.一種檢測食用菌或其栽培基質中的多溴聯苯醚的方法，其特征在于，包括以下步驟：
S1，取待測樣本，添加水浸沒樣本，3-5倍質量乙腈進行提取，提取完成后加入與待測樣本等量的NaCl，震蕩后離心，取上層乙腈層，氮氣吹干后利用正乙烷復溶，得到上樣溶液；
S2，將步驟S1制備得到的所述上樣溶液加入提前用正己烷活化的SPE柱中，開始接收上樣液體，再加正己烷洗脫，將洗脫液吹干后用正己烷復溶，轉移至進樣小瓶中待測；
S3，利用氣相色譜-電子捕獲檢測器進行測定，條件如下：
程序升溫：初始柱溫100℃，保持1min；再以20℃/min升至140℃，后以2.5℃/min升至170℃；最后以12.5℃/min升至310℃，保持2min；
載氣為高純氮氣，流速為3.5mL/min；
檢測器溫度300℃；
進樣量為2μL，進樣口溫度：265℃；
進樣模式：不分流進樣。
積和過程。


2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述SPE柱的填料為乙二胺-N-丙基硅烷和去活化硅膠復合物。


3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，所述乙二胺-N-丙基硅烷和去活化硅膠復合物中乙二胺-N-丙基硅烷和去活化硅膠的比例為1:1。


4.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，所述乙二胺-N-丙基硅烷和去活化硅膠復合柱的制備方法如下：
硅膠預先在550℃烘...

【專利技術屬性】
技術研發人員：張其才，宋衛國，饒欽雄，王獻禮，
申請(專利權)人：上海市農業科學院，
類型：發明
國別省市：上海;31