一種強力定眩片HPLC指紋圖譜的建立方法技術

本發明專利技術公開了一種強力定眩片HPLC指紋圖譜的建立方法。所述的方法包括以下步驟：(1)強力定眩片供試品溶液的制備；(2)HPLC檢測；以及(3)HPLC指紋圖譜的建立。本發明專利技術對該方法的精密度、重復性以及穩定性進行了考察，結果說明，該方法精密度、重復性以及穩定性均良好，共檢出34個共有峰，10批強力定眩片的指紋圖譜的相似度值在0.9以上，符合《中國藥典》要求。本發明專利技術的提出為評估強力定眩片生產工藝的重現性、穩定性和質量檢控提供了方法學保障。

【技術實現步驟摘要】
一種強力定眩片HPLC指紋圖譜的建立方法
本專利技術涉及一種中藥的HPLC指紋圖譜的建立方法，特別涉及一種強力定眩片HPLC指紋圖譜的建立方法，本專利技術屬于醫藥

技術介紹
強力定眩片是陜西漢王藥業有限公司獨家生產的藥品(批準文號：國藥準字Z61020139)，是由天麻、杜仲、杜仲葉、野菊花、川芎5味中藥組成的復方制劑，其配伍精良，諸藥合用共奏息風止痙、平肝潛陽、益氣活血之效。主治高血壓、高脂血證和眩暈等證。該藥能解除血管痙攣，擴張血管，降低血黏稠度，提升患者腦組織中的去甲腎上腺素、多巴胺以及5-羥色胺水平，臨床療效顯著。中藥材質量直接關系到中藥復方制劑質量及其臨床療效，僅憑單一成分的定量測定來反映中藥材、中藥復方質量具有一定的片面性和局限性。多指標化學成分的含量測定雖然能全面、客觀地評價復方制劑的質量，但對上市產品的制造企業的檢測條件要求高、檢測成本大、周期相對較長。指紋圖譜具有信息唯一性、特征性、整體性、時效性、依從性和使用性強等特點。指紋圖譜能夠全面、準確地反映上市中成藥遵循固化、法定、科學的制備工藝生產之穩定與重現特性，是中成藥質量控制的有效手段，從而建立該方法為鑒別中成藥的真偽，評價其質量的一致性及穩定性具有重要意義。目前，國內外未有強力定眩片指紋圖譜的研究報道。本專利技術建立了強力定眩片HPLC指紋圖譜方法，旨在為評估強力定眩片法定生產工藝的重現性、穩定性和質量檢控提供方法學保障。
技術實現思路
本專利技術的目的在于提供一種強力定眩片HPLC指紋圖譜的建立方法。為了達到上述目的，本專利技術采用了以下技術手段：本專利技術的一種強力定眩片HPLC指紋圖譜的建立方法，其包括以下步驟：(1)強力定眩片供試品溶液的制備分別取十批次以上強力定眩片作為供試品，分別精密稱取每個批次供試品不低于0.4g，置5mL容量瓶中，加甲醇適量，超聲處理15-45min，放冷，用甲醇補足減失的重量，濾過，取續濾液，過0.45μm微孔濾膜濾過，即得；(2)HPLC檢測色譜柱：LamdoStamsilC18柱(250×4.6mm，5μm)；流動相乙腈(A)-0.05％磷酸水溶液(B)，梯度洗脫：0～5min，5％～7％A；5～15min，7％A；15～30min，7％～12％A；30～90min，12％～20％A；90～100min，20％～50％A；檢測波長：280nm；進樣量：5μL；體積流量：0.8mL/min；柱溫：30℃；(3)HPLC指紋圖譜的建立采用步驟(2)相同的色譜條件分別測定十批次以上的供試品溶液，獲得十批次以上的供試品溶液的HPLC色譜圖，將十批次以上的色譜圖數據以AIA格式導入“中藥指紋圖譜相似度系統(2004A版)”軟件，經多點校正后進行全譜峰匹配，從而得到十批次以上擬合的強力定眩片HPLC指紋圖譜。其中，優選的，步驟(1)中超聲處理的時間為15-30min，功率為250W，頻率為40kHz。其中，優選的，采用本專利技術所述的方法得到的強力定眩片HPLC指紋圖譜，所述的強力定眩片HPLC指紋圖譜中包括34個共有指紋峰。相較于現有技術，本專利技術的有益效果是：本專利技術建立了強力定眩片的HPLC指紋圖譜，并且對該方法的精密度、重復性以及穩定性進行了考察，結果表明，該方法精密度、重復性以及穩定性均良好，共檢出34個共有峰，10批強力定眩片的指紋圖譜的相似度值在0.9以上，符合《中國藥典》要求。本專利技術的技術為評估強力定眩片法定生產工藝的重現性、穩定性和質量檢控提供了方法學保障。附圖說明圖1為10批強力定眩片的HPLC指紋圖譜；其中，R：特征圖譜(10批擬合)；S1～S10：強力定眩片制劑生產批號；圖2為強力定眩片HPLC對照指紋圖譜；其中，1～34：特征指紋屬于HPLC儀在“LamdoStamsilC18柱(250×4.6mm，5μm)；流動相乙腈(A)-0.05％磷酸水溶液(B)，梯度洗脫(0～5min，5％～7％A；5～15min，7％A；15～30min，7％～12％A；30～90min，12％～20％A；90～100min，20％～50％A)；檢測波長：280nm；進樣量：5μL；體積流量：0.8mL/min；柱溫：30℃”的特定條件下具有良好重現和穩定的特征峰。具體實施方式下面結合具體實施例對本專利技術作進一步說明，但本專利技術不限于以下實施例。本領域技術人員應該理解的是，在不偏離本專利技術的精神及范圍下可對本專利技術技術方案的細節和形式進行修改或替換，但這些修改和替換均落入本專利技術的保護范圍內。實施例1強力定眩片HPLC指紋圖譜的建立及方法學考察1材料1.1儀器LC-2010CHT高效液相色譜儀(日本島津公司)，LCLabsolution色譜工作站(日本島津公司)，BSA2202S型電子天平(德國sartorius公司)，移液槍(德國Eppendorf)，Milli-QIntegral5超純水一體化系統(密理博公司)；KQ-500E超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司，250W，40kHz)。1.2試劑與藥物10批強力定眩片樣品批號為DX078907(S1)、DX079907(S2)、DX080907(S3)、DX081907(S4)、DX082908(S5)、DX083908(S6)、DX084908(S7)、DX085908(S8)、DX086908(S9)、DX087908(S10)由陜西漢王藥業股份有限公司提供。乙腈、甲醇均為色譜純，美國Fisher公司；其余試劑均為分析純；水為超純水。2.方法與結果2.1色譜條件色譜柱：LamdoStamsilC18柱(250×4.6mm，5μm)；流動相乙腈(A)-0.05％磷酸水溶液(B)，梯度洗脫(0～5min，5％～7％A；5～15min，7％A；15～30min，7％～12％A；30～90min，12％～20％A；90～100min，20％～50％A)；檢測波長：280nm；進樣量：5μL；體積流量：0.8mL/min；柱溫：30℃。2.2參比物與供試品溶液的制備2.2.1參比物溶液的制備精密稱取沒食子酸對照品適量，制成每1ml甲醇含30μg沒食子酸對照品溶液。2.2.2供試品溶液制備精密稱取供試品0.4g，置5mL容量瓶中，加甲醇適量，超聲處理30min(功率：250W，頻率：40KHz)，放冷，用甲醇補足減失的重量，濾過，取續濾液，過0.45μm微孔濾膜濾過，即得。2.3指紋圖譜方法學考察2.3.1精密度試驗取批號為DX082908的樣品，按“2.2.2”項下方法制備供試液，按“2.1”項下色譜條件，連續進樣6次，以2號峰(沒食子酸)為參照峰，計算各共有峰的相對保留時間和相對峰面積的RSD。結果，相對保留時間的RSD＜1.0％，相對峰面積的RSD＜5.0％，表明儀器精密度良好，見表1～2。表1精密度共有峰相對保留時間...

【技術保護點】
1.一種強力定眩片HPLC指紋圖譜的建立方法，其特征在于，包括以下步驟：/n(1)強力定眩片供試品溶液的制備/n分別取十批次以上強力定眩片作為供試品，分別精密稱取每個批次供試品不低于0.4g，置5mL容量瓶中，加甲醇適量，超聲處理15-45min，放冷，用甲醇補足減失的重量，濾過，取續濾液，過0.45μm微孔濾膜濾過，即得；/n(2)HPLC檢測/n色譜柱：Lamdo Stamsil C

【技術特征摘要】
1.一種強力定眩片HPLC指紋圖譜的建立方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)強力定眩片供試品溶液的制備
分別取十批次以上強力定眩片作為供試品，分別精密稱取每個批次供試品不低于0.4g，置5mL容量瓶中，加甲醇適量，超聲處理15-45min，放冷，用甲醇補足減失的重量，濾過，取續濾液，過0.45μm微孔濾膜濾過，即得；
(2)HPLC檢測
色譜柱：LamdoStamsilC18柱(250×4.6mm，5μm)；流動相乙腈(A)-0.05％磷酸水溶液(B)，梯度洗脫：0～5min，5％～7％A；5～15min，7％A；15～30min，7％～12％A；30～90min，12％～20％A；90～100min，20％～50％A；檢測波長：280nm；進樣量：5μL；體積流量：0.8mL/min...

【專利技術屬性】
技術研發人員：馮澤宇，羅歡歡，田惠玲，李捷，謝艷華，肖會敏，王四旺，李志平，
申請(專利權)人：陜西漢王藥業股份有限公司，
類型：發明
國別省市：陜西;61