本發(fā)明專利技術(shù)公開了一種采用HPLC法同時(shí)測(cè)定強(qiáng)力定眩片中12種化學(xué)成分含量的方法。該方法能夠同時(shí)測(cè)定強(qiáng)力定眩片中天麻素、沒食子酸、5?羥甲基糠醛、對(duì)羥基苯甲醇、新綠原酸、綠原酸、香草酸、對(duì)羥基苯甲醛、松脂醇二葡萄糖苷、槐角苷、藁本內(nèi)脂、蒙花苷12種化學(xué)成分的含量。研究結(jié)果表明，使用本發(fā)明專利技術(shù)的方法檢測(cè)12種化學(xué)成分，在試驗(yàn)范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r＞0.9990)，平均加樣回收率為96.0％～117.0％，RSD為1.00％～2.80％。本發(fā)明專利技術(shù)首次建立了采用HPLC法同時(shí)測(cè)定強(qiáng)力定眩片中12種化學(xué)成分含量的方法，該方法準(zhǔn)確、靈敏、測(cè)定結(jié)果不受藥材、制劑中其他物質(zhì)的干擾，專屬性強(qiáng)，能夠較為全面地對(duì)強(qiáng)力定眩片進(jìn)行定性及化學(xué)成分的定量分析，為強(qiáng)力定眩片的質(zhì)量控制提供了參考和依據(jù)。
【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
一種采用HPLC法同時(shí)測(cè)定強(qiáng)力定眩片中12種化學(xué)成分含量的方法
本專利技術(shù)涉及一種采用HPLC法測(cè)定藥物中化學(xué)成分含量的方法，特別涉及一種采用HPLC法同時(shí)測(cè)定強(qiáng)力定眩片中12種化學(xué)成分含量的方法。本專利技術(shù)屬于醫(yī)藥
技術(shù)介紹
強(qiáng)力定眩片(國(guó)藥準(zhǔn)字Z61020139)是陜西漢王藥業(yè)有限公司獨(dú)家生產(chǎn)的藥品，是由天麻、杜仲、杜仲葉、野菊花、川芎5味中藥組成的復(fù)方制劑，其配伍精良，諸藥合用共奏息風(fēng)止痙、平肝潛陽(yáng)、益氣活血之效。主治高血壓、高脂血證和眩暈等證。該藥能解除血管痙攣，擴(kuò)張血管，降低血黏稠度，提升患者腦組織中的去甲腎上腺素、多巴胺以及5-羥色胺水平，臨床療效顯著。中藥尤其是中藥復(fù)方化學(xué)成分復(fù)雜，具有多靶點(diǎn)協(xié)同發(fā)揮藥效的特點(diǎn)，單一化學(xué)成分定量難以全面反映中藥材、中藥復(fù)方質(zhì)量。多指標(biāo)性化學(xué)成分的定量能更加全面、客觀地評(píng)價(jià)復(fù)方制劑的質(zhì)量。強(qiáng)力定眩片的法定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中缺乏反映藥品質(zhì)量的多化學(xué)成分定量檢測(cè)指標(biāo)。專利技術(shù)人在前期研究中采用液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)定性研究了強(qiáng)力定眩片中的化學(xué)成分，結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)研究、對(duì)照品比對(duì)、以及HPLC系統(tǒng)分析等方法驗(yàn)證，最終確定了強(qiáng)力定眩片中與質(zhì)量控制和功效相關(guān)的化學(xué)成分主要包含但不限于12種。為此，本專利技術(shù)首次建立了采用HPLC法同時(shí)測(cè)定強(qiáng)力定眩片中12種成分含量的方法，以期為強(qiáng)力定眩片的生產(chǎn)工藝和質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)提供理論和技術(shù)支持。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的在于建立一種采用HPLC法同時(shí)測(cè)定強(qiáng)力定眩片中12種化學(xué)成分含量的方法，該方法快速、準(zhǔn)確、高效、靈敏，測(cè)定結(jié)果不受藥材、制劑中其他物質(zhì)的干擾，專屬性強(qiáng)，能夠較為全面地對(duì)強(qiáng)力定眩片進(jìn)行定量檢測(cè)和分析。為了達(dá)到上述目的，本專利技術(shù)采用了以下技術(shù)手段：本專利技術(shù)的一種采用HPLC法同時(shí)測(cè)定強(qiáng)力定眩片中12種化學(xué)成分含量的方法，其中，所述的12種化學(xué)成分為天麻素、沒食子酸、5-羥甲基糠醛、對(duì)羥基苯甲醇、新綠原酸、綠原酸、香草酸、對(duì)羥基苯甲醛、松脂醇二葡萄糖苷、槐角苷、藁本內(nèi)脂以及蒙花苷，所述的方法包括以下步驟：(1)供試品溶液的制備取供試品5-10片，去除薄膜衣，研細(xì)，精密稱取0.4g，置5-50mL量瓶中，加稀乙醇適量，超聲處理15-45min，放冷，加稀乙醇定容至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；(2)對(duì)照品溶液的制備精密稱取天麻素、沒食子酸、5-羥甲基糠醛、對(duì)羥基苯甲醇、新綠原酸、綠原酸、香草酸、對(duì)羥基苯甲醛、松脂醇二葡萄糖苷、槐角苷、藁本內(nèi)酯、蒙花苷對(duì)照品適量，加甲醇制成混合對(duì)照品溶液；(3)單味藥材及陰性樣品溶液的制備采用水煎煮、乙醇回流提取、濃縮和減壓干燥工藝，分別制備天麻、杜仲、杜仲葉、野菊花、川芎?jiǎn)挝端幉臉悠泛腿碧炻椤⑷倍胖俸痛ㄜ骸⑷倍胖俸投胖偃~、缺野菊花和川芎的陰性模擬樣品，按步驟(1)的方法制成相應(yīng)陰性對(duì)照溶液；(4)HPLC法測(cè)定12種化學(xué)成分含量色譜柱：LamdoStamsilC18柱(250×4.6mm，5μm)；流動(dòng)相乙腈(A)-0.05％磷酸水溶液(B)，梯度洗脫(0～5min，5％～7％A；5～15min，7％A；15～30min，7％～12％A；30～90min，12％～20％A；90～100min，20％～50％A)；檢測(cè)波長(zhǎng)：280nm；進(jìn)樣量：5μL；體積流量：0.8mL/min；柱溫：30℃；(5)線性回歸方程的制備分別精密吸取混合對(duì)照品溶液適量，逐級(jí)稀釋成一系列不同質(zhì)量濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，按步驟(4)的色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得到線性回歸方程；(6)供試品溶液中12種化學(xué)成分含量的測(cè)定吸取供試品溶液按步驟(4)的色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，得到供試品溶液中12種化學(xué)成分的色譜圖，并確定相應(yīng)的峰面積，分別將12種化學(xué)成分的峰面積帶入所述線性回歸方程，即可得到樣品溶液中12種化學(xué)成分的含量。在本專利技術(shù)所述的方法中，優(yōu)選的，步驟(1)中超聲處理的時(shí)間為15-30min，功率為250W，頻率為40kHz。在本專利技術(shù)所述的方法中，優(yōu)選的，步驟(2)中每1mL所述的混合對(duì)照品溶液中含天麻素1.045mg、沒食子酸1.002mg、5-羥甲基糠醛0.185mg、對(duì)羥基苯甲醇0.41mg、新綠原酸0.102mg、綠原酸0.1mg、香草酸0.135mg、對(duì)羥基苯甲醛0.136mg、松脂醇二葡萄糖苷0.109mg、槐角苷0.108mg、藁本內(nèi)酯22mg、蒙花苷0.111mg。在本專利技術(shù)所述的方法中，優(yōu)選的，步驟(1)和步驟(2)中所述的稀乙醇為45％-55％(v/v)的乙醇溶液。研究結(jié)果證明，使用本專利技術(shù)的檢測(cè)方法同時(shí)測(cè)定強(qiáng)力定眩片中12種化學(xué)成分含量，12種化學(xué)成分在試驗(yàn)范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r＞0.9990)，平均加樣回收率為96.0％～117.0％，RSD為1.00％～2.80％。相較于現(xiàn)有技術(shù)，本專利技術(shù)的有益效果是：本專利技術(shù)首次建立了采用HPLC法同時(shí)測(cè)定強(qiáng)力定眩片中12種化學(xué)成分含量的方法，該方法準(zhǔn)確、靈敏、測(cè)定結(jié)果不受藥材、制劑中其他物質(zhì)的干擾，專屬性強(qiáng)，能夠較為全面地對(duì)強(qiáng)力定眩片進(jìn)行定量檢測(cè)和分析，為強(qiáng)力定眩片的質(zhì)量控制提供了參考和依據(jù)。附圖說明圖1A-K為各成分HPLC色譜圖；其中，1：天麻素；2：沒食子酸；3:5-羥甲基糠醛；4：對(duì)羥基苯甲醇；5：新綠原酸；6：綠原酸；7：香草酸；8：對(duì)羥基苯甲醛；9：松脂醇二葡萄糖苷；10：槐角苷；11：藁本內(nèi)酯；12：蒙花苷。具體實(shí)施方式下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本專利技術(shù)作進(jìn)一步說明，但本專利技術(shù)不限于以下實(shí)施例。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解的是，在不偏離本專利技術(shù)的精神及范圍下可對(duì)本專利技術(shù)技術(shù)方案的細(xì)節(jié)和形式進(jìn)行修改或替換，但這些修改和替換均落入本專利技術(shù)的保護(hù)范圍內(nèi)。實(shí)施例11.材料1.1儀器LC-2010CHT高效液相色譜儀(日本島津公司)，LCLabsolution色譜工作站(日本島津公司)，BSA2202S型電子天平(德國(guó)sartorius公司)，移液槍(德國(guó)Eppendorf)，Milli-QIntegral5超純水一體化系統(tǒng)(密理博公司)；KQ-500E超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司，250W，40kHz)。1.2試劑與藥物6批強(qiáng)力定眩片批號(hào)007101、024102、019101、016101、021101、026102均由陜西漢王藥業(yè)股份有限公司提供。天麻素(HR16313B1，純度≥98.0％)、5-羥甲基糠醛(HH248894198，純度≥98.0％)、對(duì)羥基苯甲醇(H21D6Q7813，純度≥98.0％)、新綠原酸(HR20422B1，純度≥98.0％)、對(duì)羥基苯甲醛(HA060208198，純度≥98.0％)、松脂醇二葡萄糖苷(HS0870W2，純度≥98.0％)、藁本內(nèi)酯(HL09355198，純度≥98.0％)等對(duì)照品均購(gòu)自寶雞辰光生物科技有限公司；綠原酸(110753-201415，純度≥96.20％)、蒙花苷(1本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
1.一種采用HPLC法同時(shí)測(cè)定強(qiáng)力定眩片中12種化學(xué)成分含量的方法，其特征在于，所述的12種化學(xué)成分為天麻素、沒食子酸、5-羥甲基糠醛、對(duì)羥基苯甲醇、新綠原酸、綠原酸、香草酸、對(duì)羥基苯甲醛、松脂醇二葡萄糖苷、槐角苷、藁本內(nèi)脂以及蒙花苷，所述的方法包括以下步驟：/n(1)供試品溶液的制備/n取供試品5-10片，去除薄膜衣，研細(xì)，精密稱取0.4g，置5mL量瓶中，加稀乙醇適量，超聲處理15-45min，放冷，加稀乙醇定容至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；/n(2)對(duì)照品溶液的制備/n精密稱取天麻素、沒食子酸、5-羥甲基糠醛、對(duì)羥基苯甲醇、新綠原酸、綠原酸、香草酸、對(duì)羥基苯甲醛、松脂醇二葡萄糖苷、槐角苷、藁本內(nèi)酯、蒙花苷對(duì)照品適量，加甲醇制成混合對(duì)照品溶液；/n(3)單味藥材及陰性樣品溶液的制備/n采用水煎煮、乙醇回流提取、濃縮和減壓干燥工藝，分別制備天麻、杜仲、杜仲葉、野菊花、川芎?jiǎn)挝端幉臉悠泛腿碧炻?、缺杜仲和川芎、缺杜仲和杜仲葉、缺野菊花和川芎的陰性模擬樣品，按步驟(1)的方法制成相應(yīng)陰性對(duì)照溶液；/n(4)HPLC法測(cè)定12種化學(xué)成分含量/n色譜柱：Lamdo Stamsil C
【技術(shù)特征摘要】
1.一種采用HPLC法同時(shí)測(cè)定強(qiáng)力定眩片中12種化學(xué)成分含量的方法，其特征在于，所述的12種化學(xué)成分為天麻素、沒食子酸、5-羥甲基糠醛、對(duì)羥基苯甲醇、新綠原酸、綠原酸、香草酸、對(duì)羥基苯甲醛、松脂醇二葡萄糖苷、槐角苷、藁本內(nèi)脂以及蒙花苷，所述的方法包括以下步驟：
(1)供試品溶液的制備
取供試品5-10片，去除薄膜衣，研細(xì)，精密稱取0.4g，置5mL量瓶中，加稀乙醇適量，超聲處理15-45min，放冷，加稀乙醇定容至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；
(2)對(duì)照品溶液的制備
精密稱取天麻素、沒食子酸、5-羥甲基糠醛、對(duì)羥基苯甲醇、新綠原酸、綠原酸、香草酸、對(duì)羥基苯甲醛、松脂醇二葡萄糖苷、槐角苷、藁本內(nèi)酯、蒙花苷對(duì)照品適量，加甲醇制成混合對(duì)照品溶液；
(3)單味藥材及陰性樣品溶液的制備
采用水煎煮、乙醇回流提取、濃縮和減壓干燥工藝，分別制備天麻、杜仲、杜仲葉、野菊花、川芎?jiǎn)挝端幉臉悠泛腿碧炻?、缺杜仲和川芎、缺杜仲和杜仲葉、缺野菊花和川芎的陰性模擬樣品，按步驟(1)的方法制成相應(yīng)陰性對(duì)照溶液；
(4)HPLC法測(cè)定12種化學(xué)成分含量
色譜柱：LamdoStamsilC18柱(250×4.6mm，5μm)；流動(dòng)相乙腈(A)-0.05％磷酸水溶液(B)，梯度洗脫(0～5min，5％～7％A；5～15min，7％A；15～30min，7％～12％A；30～90min，12％～20％A；90～100...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：羅歡歡，馮澤宇，李捷，田惠玲，謝艷華，肖會(huì)敏，王四旺，李志平，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：陜西漢王藥業(yè)股份有限公司，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：陜西;61
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