一種從防風中制備升麻素苷、升麻素和5-O-甲基維斯阿米醇苷的方法技術

本發(fā)明專利技術公開了一種從防風中制備升麻素苷、升麻素和5?O?甲基維斯阿米醇苷的方法，屬于中藥成分分離領域。方法包括以下具體步驟：用乙醇水溶液回流提取，合并濾液后，回收溶劑得防風提取物；配制提取物水溶液，上樣到大孔樹脂上，先用蒸餾水洗脫，再用乙醇水溶液洗脫，收集乙醇水溶液洗脫液，回收溶劑后，得樹脂純化產(chǎn)物；樹脂純化產(chǎn)物用制備高效液相色譜分離，獲得三個不同流份，經(jīng)重結(jié)晶后分別得到升麻素苷、升麻素和5?O?甲基維斯阿米醇苷，純度均大于95％，收率均大于70％。本發(fā)明專利技術將大孔樹脂和制備高效液相色譜技術聯(lián)用，通過兩步色譜同時制備了防風中高純度的升麻素苷、升麻素和5?O?甲基維斯阿米醇苷，簡便易行、成本低廉、收率高、適合規(guī)?；苽洹?br />

【技術實現(xiàn)步驟摘要】
一種從防風中制備升麻素苷、升麻素和5-O-甲基維斯阿米醇苷的方法
本專利技術屬于中藥成分分離領域，具體涉及一種從防風中制備升麻素苷、升麻素和5-O-甲基維斯阿米醇苷的方法。
技術介紹
防風是一味使用歷史悠久的常用中藥，為傘形科植物防風(Saposhnikoviadivaricata(Turcz.)Schischk.)的干燥根，味辛、微甘，性溫，歸肝、膀胱、脾經(jīng)，具有祛風解表、勝濕止痛、止痙的功效，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》。防風在臨床上可以治療風寒、骨節(jié)疼痛、頸椎病、風寒濕痹等癥狀?，F(xiàn)代研究表明，防風中含有豐富的化學成分，包括色原酮類、揮發(fā)油類、香豆素類和多糖類等。其中，色原酮類成分是防風中發(fā)揮藥效作用的主要成分，具有解熱鎮(zhèn)痛、抗炎、抗氧化、抗血小板凝固等多種藥理活性。升麻素苷、升麻素和5-O-甲基維斯阿米醇苷是防風中的三種主要色原酮類化合物，具有多種藥理活性，且升麻素苷和5-O-甲基維斯阿米醇苷是《中國藥典》規(guī)定的防風質(zhì)量控制指標。因此，從防風中制備高純度的升麻素苷、升麻素和5-O-甲基維斯阿米醇苷用于質(zhì)量控制和活性測試是非常必要的。
技術實現(xiàn)思路
本專利技術提供了一種簡便易行、成本低廉、收率高的從防風中同時制備升麻素苷、升麻素和5-O-甲基維斯阿米醇苷的方法。本專利技術包括以下具體步驟：1.提?。悍里L藥材粉碎成粉末，按一定料液比加入一定濃度的乙醇水溶液，室溫下浸泡24h，回流提取一定時間，提取完畢后，過濾，合并提取液，減壓蒸餾回收溶劑得防風提取物；2.大孔樹脂分離：防風提取物加水配成一定濃度的水溶液，控制一定流速和體積上樣到預處理好的大孔吸附樹脂柱上，上樣完成后，先用一定體積的蒸餾水以一定流速進行洗脫，再使用一定濃度的乙醇水溶液進行洗脫，收集乙醇水溶液洗脫液，減壓蒸餾，回收溶劑，得到防風提取物的大孔樹脂分離產(chǎn)物；3.制備高效液相色譜分離：大孔樹脂分離產(chǎn)物用甲醇溶解后，使用制備高效液相色譜分離，按照保留時間分別收集流份1、流份2和流份3，流份1重結(jié)晶后得升麻素苷、流份2重結(jié)晶后得升麻素、流份3重結(jié)晶后得5-O-甲基維斯阿米醇苷，純度均大于95％，收率均在70％以上。所述的步驟1中，提取防風藥材所用的乙醇濃度為40％-80％，加入溶劑的料液比為1:5-1:20，回流提取時間為0.5-2h，提取次數(shù)為2-3次。所述的步驟2中，選用的大孔樹脂為AB-8樹脂、HPD-400樹脂、HPD-300樹脂和D-101樹脂中的任一種。所述的步驟2中，大孔樹脂柱上樣液中防風提取物濃度為120-200mg/mL；上樣液體積控制在10-15倍柱體積(BV)，上樣流速控制在2-5BV/h。所述的步驟2中，洗脫用蒸餾水的體積為3-8BV，洗脫流速為2-5BV/h，洗脫用乙醇水溶液的濃度為30％-80％，洗脫體積為3-8BV，洗脫流速為2-5BV/h。所述的步驟3中，使用的制備高效液相色譜條件如下：色譜柱為YMC-packODS-A色譜柱(20×250mm，5μm)；流動相為甲醇(A)-水(B)；梯度洗脫條件為：0-20min，50％A；20-22min，50％-100％A；22-23min，100％A；23-25min，100％-50％A；流速設為10mL/min；波長設為254nm；進樣量為0.5-1mL。本專利技術的有益效果是：(1)本專利技術創(chuàng)造性地利用大孔吸附樹脂和制備高效液相色譜聯(lián)用的方法，同時分離了防風中的三種色原酮類化合物—升麻素苷、升麻素和5-O-甲基維斯阿米醇苷，所得三種化合物純度較高，均大于95％，收率高于70％。(2)本專利技術建立的三種化合物的制備方法只需要經(jīng)過兩步色譜分離，簡便易行、成本低廉、收率高、快速，適合規(guī)模化制備。附圖說明圖1為制備高效液相色譜圖圖2為制備的升麻素苷單體的色譜圖圖3為制備的升麻素單體的色譜圖圖4為制備的5-O-甲基維斯阿米醇苷的HPLC色譜圖具體實施方式下面結(jié)合具體實施例對本專利技術做進一步說明，但本專利技術不僅局限于下述的實施方式。實施例一：1.防風藥材的回流提?。悍里L藥材粉碎后，稱取藥材粉末400g，加入3L70％乙醇溶液，室溫環(huán)境下浸泡24h后，回流提取，提取時間為1h，連續(xù)提取2次，合并兩次回流提取液，過濾，得濾液，使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓蒸餾回收溶劑后，得到防風提取物。2.防風提取物的大孔樹脂分離：取預處理好的大孔吸附樹脂HPD-400，濕法裝到玻璃色譜柱中。取防風提取物加入蒸餾水，配成濃度為100mg/mL的水溶液上樣到大孔樹脂柱上，上樣流速為4BV/h。上樣完成后，先使用蒸餾水對吸附后的樹脂進行洗脫，洗脫流速為4BV/h，洗脫體積為5BV；再使用50％乙醇進行洗脫，洗脫流速為4BV/h，洗脫體積為5BV。收集50％乙醇的洗脫溶液，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓蒸餾回收溶劑后，得到大孔樹脂純化產(chǎn)物。3.大孔樹脂純化產(chǎn)物的制備高效液相色譜分離：把大孔樹脂純化產(chǎn)物用甲醇溶解后，過0.22μm的微孔濾膜，注入制備高效液相色譜儀進行分離。分離的色譜條件如下：色譜柱為YMC-packODS-A色譜柱(20×250mm，5μm)；流動相為甲醇(A)-水(B)；梯度洗脫條件為：0-20min，50％A；20-22min，50％-100％A；22-23min，100％A；23-25min，100％-50％A；流速設為10mL/min；波長設為254nm；進樣量為0.5mL。制備高效液相色譜圖見圖1，按照保留時間分別收集流份1、流份2和流份3，流份1重結(jié)晶后得升麻素苷(色譜圖見圖2)、流份2重結(jié)晶后得升麻素(色譜圖見圖3)、流份3重結(jié)晶后得5-O-甲基維斯阿米醇苷(色譜圖見圖4)，純度均大于95％，收率均在70％以上。本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術保護點】
1.一種從防風中制備升麻素苷、升麻素和5-O-甲基維斯阿米醇苷的方法，其特征在于包括以下具體步驟：/n(1)提?。悍里L藥材粉碎成粉末，按一定料液比加入一定濃度的乙醇水溶液，室溫下浸泡24h，回流提取一定時間，提取完畢后，過濾，合并提取液，減壓蒸餾回收溶劑得防風提取物；/n(2)大孔樹脂分離：防風提取物加水配成一定濃度的水溶液，控制一定流速和體積上樣到預處理好的大孔吸附樹脂柱上，上樣完成后，先用一定體積的蒸餾水以一定流速進行洗脫，再使用一定濃度的乙醇水溶液進行洗脫，收集乙醇水溶液洗脫液，減壓蒸餾，回收溶劑，得到防風提取物的大孔樹脂分離產(chǎn)物；/n(3)制備高效液相色譜分離：大孔樹脂分離產(chǎn)物用甲醇溶解后，使用制備高效液相色譜分離，按照保留時間分別收集流份1、流份2和流份3，流份1重結(jié)晶后得升麻素苷、流份2重結(jié)晶后得升麻素、流份3重結(jié)晶后得5-O-甲基維斯阿米醇苷，純度均大于95％，收率均在70％以上。/n

【技術特征摘要】
1.一種從防風中制備升麻素苷、升麻素和5-O-甲基維斯阿米醇苷的方法，其特征在于包括以下具體步驟：
(1)提?。悍里L藥材粉碎成粉末，按一定料液比加入一定濃度的乙醇水溶液，室溫下浸泡24h，回流提取一定時間，提取完畢后，過濾，合并提取液，減壓蒸餾回收溶劑得防風提取物；
(2)大孔樹脂分離：防風提取物加水配成一定濃度的水溶液，控制一定流速和體積上樣到預處理好的大孔吸附樹脂柱上，上樣完成后，先用一定體積的蒸餾水以一定流速進行洗脫，再使用一定濃度的乙醇水溶液進行洗脫，收集乙醇水溶液洗脫液，減壓蒸餾，回收溶劑，得到防風提取物的大孔樹脂分離產(chǎn)物；
(3)制備高效液相色譜分離：大孔樹脂分離產(chǎn)物用甲醇溶解后，使用制備高效液相色譜分離，按照保留時間分別收集流份1、流份2和流份3，流份1重結(jié)晶后得升麻素苷、流份2重結(jié)晶后得升麻素、流份3重結(jié)晶后得5-O-甲基維斯阿米醇苷，純度均大于95％，收率均在70％以上。


2.根據(jù)權利要求1所述的一種從防風中制備升麻素苷、升麻素和5-O-甲基維斯阿米醇苷的方法，其特征在于，所述的步驟(1)中，提取防風藥材所用的乙醇濃度為40％-80％，加入溶劑的料液比為1:5-1:20，回流提取時間為0.5-2h，提取次數(shù)為2-3次。


3.根據(jù)權利要求1所述的一種從防風中制備升麻素苷、升麻素和5-O-甲基維斯阿米醇苷的...

【專利技術屬性】
技術研發(fā)人員：李洪娟，王春華，侯桂革，孫佳佳，蘇香溢，
申請(專利權)人：濱州醫(yī)學院，
類型：發(fā)明
國別省市：山東;37