CDCA1衍生的肽和含有它們的疫苗制造技術

本發(fā)明專利技術提供了具有誘導細胞毒性T細胞的能力的CDCA1衍生的表位肽。本發(fā)明專利技術還提供編碼所述肽的多核苷酸，呈遞所述肽的抗原呈遞細胞，和靶向所述肽的細胞毒性T細胞，以及誘導抗原呈遞細胞或CTL的方法。本發(fā)明專利技術還提供了含有它們作為活性成分的組合物和藥物組合物。此外，本發(fā)明專利技術提供了使用本發(fā)明專利技術的肽、多核苷酸、抗原呈遞細胞、細胞毒性T細胞或藥物組合物來治療和/或預防癌癥，和/或預防其手術后復發(fā)的方法。還提供了誘導針對癌癥的免疫應答的方法。

【技術實現(xiàn)步驟摘要】
CDCA1衍生的肽和含有它們的疫苗本申請是申請日為2015年7月31日，申請?zhí)枮?01580052500.2，專利技術名稱為“CDCA1衍生的肽和含有它們的疫苗”的中國專利技術專利申請的分案申請。
專利技術涉及生物科學領域，更具體的說涉及癌癥治療領域。具體而言，本專利技術涉及作為癌癥疫苗有效的新肽，使用所述肽治療和/或預防腫瘤的方法，以及包含所述肽的藥物組合物。本申請要求提交于2014年08月04日提交的日本專利申請(日本專利申請?zhí)?014-158922、2014-158923,和2014-158924)的權益，其全部內(nèi)容通過提述并入本文。
技術介紹
已經(jīng)顯示細胞毒性T細胞(CTLs)可識別主要組織相容性復合物(MHC)I類分子上發(fā)現(xiàn)的腫瘤相關抗原(TAA)所衍生的表位肽，然后殺死腫瘤細胞。從發(fā)現(xiàn)黑素瘤抗原(MAGE)家族以來，已經(jīng)通過免疫學方法發(fā)現(xiàn)了許多其它TAA(NPL1:BoonT,IntJCancer1993May8,54(2):177-80；NPL2:BoonT&vanderBruggenP,JExpMed1996Mar1,183(3):725-9)。這些TAAs中的一些目前正在作為免疫治療靶標進行臨床開發(fā)。在這些TAAs中的數(shù)個中，鑒定了可以被CTLs識別的表位肽，并且預期它們在用于各種類型的癌癥的免疫治療中的應用(NPL3:HarrisCC,JNatlCancerInst1996Oct16,88(20):1442-55；NPL4:ButterfieldLH等人,CancerRes1999Jul1,59(13):3134-42；NPL5:VissersJL等人,CancerRes1999Nov1,59(21):5554-9；NPL6:vanderBurgSH等人,JImmunol1996May1,156(9)3308-14；NPL7:TanakaF等人,CancerRes1997Oct15,57(20):4465-8；NPL8:FujieT等人,IntJCancer1999Jan18,80(2):169-72；NPL9:KikuchiM等人,IntJCancer1999May5,81(3):439-66；NPL10:OisoM等人,IntJCancer1999May5,81(3):387-94)。到目前為止，已經(jīng)報道了使用這些TAA衍生的CTL表位肽的幾項臨床試驗。不幸的是，許多這些臨床試驗顯示出低的客觀反應率(NPL11:BelliF等人,JClinOncol2002Oct15,20(20):4169-80；NPL12:CouliePG等人,ImmunolRev2002Oct,188:33-42；NPL13:RosenbergSA等人,NatMed2004Sep,10(9):909-15)。因此，仍然需要鑒定可以用于癌癥免疫治療的新的CTL表位。CDCA1(細胞分裂周期相關蛋白1；也描述為NUF2、NDC80動粒復合物組分(NDC80kinetochorecomplexcomponent):Nuf2；參考序列：GeneBank登錄號NM_145697(SEQIDNO:81)或GeneBank登錄號NM_031423(SEQIDNO:83))，已被鑒定為與CDC2、細胞周期蛋白、拓撲異構酶II和其它細胞周期基因共表達的基因的成員(NPL14:Walker等人,CurrCancerDrugTargets2001May；1(1):73-83)。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)CDCA1與經(jīng)歷有絲分裂的HeLa細胞的著絲粒相關，并被認為是酵母Nuf2的功能同源物(NPL15:WiggePA等人,JCellBiol2001Jan22；152(2):349-60)。同時，通過使用包含23,040個基因的全基因組cDNA微陣列的基因表達譜分析，已經(jīng)將CDCA1鑒定為在非小細胞肺癌中上調(diào)的基因(NPL16:Hayama等人,CancerRes2006Nov1；66(21):10339-48；PTL1:WO2007/013480；PTL2:WO2005/089735)。CDCA1表達在腫瘤和腫瘤細胞系中上調(diào)，并且在除睪丸外的正常器官中檢測不到(NPL16；PTL1)。此外，siRNA介導的CDCA1表達的下調(diào)引起表達CDCA1的肺癌細胞系中細胞增殖的抑制。最近，已經(jīng)鑒定了CDCA1衍生的HLA-A2限制性CTL表位肽(NPL17：Haraoetal.,IntJCancer.2008:123(11):2616-25；PTL3:WO2009/025117)和HLA-A24限制性CTL表位肽(PTL4:WO2009/153992)。這些肽在具有HLA-A2型或HLA-A24型的癌癥患者中有效，但不能預期對不具有這些HLA型的癌癥患者具有效果。[引用列表][專利文獻][PTL1]WO2007/013480[PTL2]WO2005/089735[PTL3]WO2009/025117[PTL4]WO2009/153992[非專利文獻][NPL1]BoonT,IntJCancer1993May8,54(2):177-80[NPL2]BoonT&vanderBruggenP,JExpMed1996Mar1,183(3):725-9[NPL3]HarrisCC,JNatlCancerInst1996Oct16,88(20):1442-55[NPL4]ButterfieldLH等人,CancerRes1999Jul1,59(13):3134-42[NPL5]VissersJL等人,CancerRes1999Nov1,59(21):5554-9[NPL6]vanderBurgSH等人,JImmunol1996May1,156(9):3308-14[NPL7]TanakaF等人,CancerRes1997Oct15,57(20):4465-8[NPL8]FujieT等人,IntJCancer1999Jan18,80(2):169-72[NPL9]KikuchiM等人,IntJCancer1999May5,81(3):459-66[NPL10]OisoM等人,IntJCancer1999May5,81(3):387-94[NPL11]BelliF等人,JClinOncol2002Oct15,20(20):4169-80[NPL12]CouliePG等人,ImmunolRev2002Oct,188:33-42[NPL13]RosenbergSA等人,NatMed2004Sep,10(9):909-15[NPL14]Walker等人,CurrCancerDrugTargets2001May,1(1):73-83[NPL15]WiggePA等人,JCellBiol2001Jan22,152(2):349-60[NPL16]Hayama等人,CancerRes2006Nov1,66(2本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術保護點】
1.具有細胞毒性T細胞(CTL)誘導能力的少于15個氨基酸的肽，其包含選自以下組的氨基酸序列：/n(a)選自下組的氨基酸序列：SEQ ID NOs:38，3,5-7,9,10,12-14,17,19,21,30,35,39，40,45,53,56,58,和47；以及/n(b)選自下組的氨基酸序列中取代、缺失、插入和/或添加了一個、兩個或數(shù)個氨基酸的氨基酸序列：SEQ ID NOs:38，3,5-7,9,10,12-14,17,19,21,30,35,39，40,45,53,56,58和47。/n

【技術特征摘要】
20140804 JP 2014-158922;20140804 JP 2014-158923;201.具有細胞毒性T細胞(CTL)誘導能力的少于15個氨基酸的肽，其包含選自以下組的氨基酸序列：
(a)選自下組的氨基酸序列：SEQIDNOs:38，3,5-7,9,10,12-14,17,19,21,30,35,39，40,45,53,56,58,和47；以及
(b)選自下組的氨基酸序列中取代、缺失、插入和/或添加了一個、兩個或數(shù)個氨基酸的氨基酸序列：SEQIDNOs:38，3,5-7,9,10,12-14,17,19,21,30,35,39，40,45,53,56,58和47。


2.權利要求1的肽，其選自下組(i)至(ii)：
(i)包含氨基酸序列的肽，其中將選自下組(a)至(b)的一個或多個取代引入選自下組的氨基酸序列中：SEQIDNOs:38，7和47：
(a)用選自由亮氨酸、甲硫氨酸、纈氨酸、丙氨酸、異亮氨酸、絲氨酸和蘇氨酸組成的組的氨基酸取代自N端起的第二個氨基酸；
和
(b)用選自由精氨酸、賴氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸組成的組的氨基酸取代C端的氨基酸；
(ii)包含氨基酸序列的肽，其中將選自下組(a)至(d)的一個或多個取代引入選自下組的氨基酸序列中：SEQIDNOs:38,3,5-7,9,10,12-14,17,19,21,30,35,39,40,45,53,56和58：
(a)用選自由蘇氨酸、纈氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸和酪氨酸組成的組的氨基酸取代自N端起的第二個氨基酸；
(b)用選自由亮氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、異亮氨酸和丙氨酸組成的組的氨基酸取代自N端起的第三個氨基酸；
(c)用選自由亮氨酸、異亮氨酸、酪氨酸、纈氨酸和苯丙氨酸組成的組的氨基酸取代自N端起的第七個氨基酸；和
(d)用選自由賴氨酸和精氨酸組成的組的氨基酸取代C端的氨基酸。


3.權利要求1的肽，其由選自下組的氨基酸序列組成：SEQIDNOs:38，3,5-7,9,10,12-14,17,19,21,30,35,39，40,45,53,56,58和47。


4.多核苷酸，其編碼權利要求1至3中任一項的肽。


5.組合物，其包含藥學上可接受的載體和選自下組(a)至(e)的至少一種成分：
(a)一種或多種類型的權利要求1至3中任一項的肽；
(b)一種或多種類型的多核苷酸，其以可表達的形式編碼權利要求1至3中任一項的肽；
(c)抗原呈遞細胞(APC)，其在其細胞表面上呈遞權利要求1至3中任一項的肽與HLA抗原的復合物；
(d)外來體，其在其細胞表面上呈遞權利要求1至3中任一項的肽與HLA抗原的復合物；和
(e)CTL，其靶向權利要求1至3中任一項的肽。


6.權利要求5的組合物，其是用于誘導CTL的組合物，其中所述成分是選自下組(a)至(d)的至少一種成分：
(a)一種或多種類型的權利要求1至3中任一項的肽；
(b)一種或多種類型的多核苷酸，其以可表達的形式編碼權利要求1至3中任一項的肽；
(c)抗原呈遞細胞(APC)，其在其細胞表面上呈遞權利要求1至3中任一項的肽與HLA抗原的復合物；和
(d)外來體，其在其細胞表面上呈遞權利要求1至3中任一項的肽與HLA抗原的復合物。


7.權利要求5的組合物，其是藥物組合物。


8.權利要求7的組合物，其用于選自下組的一種或多種用途：(i)癌癥治療,(ii)癌癥預防(防范)和(iii)手術后癌癥復發(fā)的預防(防范)。


9.權利要求7的組合物，其用于誘導針對癌癥的免疫應答。


10.權利要求8或9的組合物，其中所述癌癥選自由以下組...

【專利技術屬性】
技術研發(fā)人員：角田卓也，大澤龍司，山下祥子，渡邊朝久，
申請(專利權)人：腫瘤療法科學股份有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：日本;JP