本發明專利技術提供了一種檢測幽門螺桿菌的檢測組合物，所述組合物含有尿素、磷酸氫二鉀、氫氧化鈉、對羥基苯甲酸甲酯、溴百里酚藍和蒸餾水。本發明專利技術還提供了含有所述組合物的檢測幽門螺桿菌的試劑盒，所述試劑盒包括口腔樣本取樣裝置、檢測裝置、裝有所述組合物的擠壓式塑料瓶和裝有95%v/v乙醇的擠壓式塑料瓶。本發明專利技術具有如下技術效果：本發明專利技術的方法操作簡便，適合沒有專業知識和設備的一般消費者使用，能夠精確且快速檢測口腔樣本中的幽門螺桿菌。且快速檢測口腔樣本中的幽門螺桿菌。且快速檢測口腔樣本中的幽門螺桿菌。
【技術實現步驟摘要】
一種檢測口腔中幽門螺桿菌的組合物和試劑盒
[0001]本專利技術涉及致病菌的體外檢測，具體涉及一種檢測口腔中幽門螺桿菌的組合物和試劑盒。
技術介紹
[0002]至2015年，全球幽門螺桿菌感染率為60.3%，中國總體感染率在50%以上。尤其是青年人群中有較高的感染率。一般認為，社會經濟因素是影響幽門螺桿菌感染率的重要原因之一。低收入家庭攜帶幽門螺桿菌感染可能性更高，受教育程度低、生活在農村地區、擁擠的家庭和飲用水污染源等均會增加幽門螺桿菌感染率。而經濟的發展，生活水平的提高會降低幽門螺桿菌感染率。我國國情是現有且仍將有大量人民生活水平不高，屬于幽門螺桿菌易感人群。幽門螺桿菌感染是慢性胃炎和消化性潰瘍的主要病因，也與胃癌的產生密切相關。因此，幽門螺桿菌感染的早期準確檢測有助于相關疾病的預防和治療。
[0003]根據全國幽門螺桿菌感染處理共識報告，現有常用的非侵入性幽門螺桿菌感染檢測方法有尿素呼氣試驗、糞便抗原試驗和血清學試驗。但這些方法都有其局限性：尿素呼氣試驗包括碳13呼氣法和碳14呼氣法。一般認為，碳13呼氣法雖有一定的假陽性率，仍是檢測幽門螺桿菌感染的最好方法。但這兩種方法需要配合專業儀器使用，不適合一般消費者的自行檢查。
[0004]糞便抗原試驗因不夠方便，實際應用較少。同時其準確性較差，單價較高。
[0005]血清學試驗檢測的是血清中的幽門螺桿菌抗體，因此無法區分現癥感染與過去的感染。臨床應用受限。
[0006]快速尿素酶法（Rapid Urease Test，RUT）通過酶解尿素生成氨引起的環境pH值變化檢測人體組織樣本中是否存在幽門螺桿菌分泌的尿素酶，從而間接檢測樣本中是否存在幽門螺桿菌。傳統上基于此方法研制的試劑盒用于胃部樣本的檢測，如Serim公司的Helicobacter Pylori Test Kit和GI Supply公司的HpFast
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與HpOne
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。近年來也有廣州貝思奇，珠海克迪，深圳賽爾，珠海麗拓，福建三強等公司生產的面向一般消費者，用于牙垢樣本檢測的產品。但這些用于牙垢樣本檢測的產品外觀簡陋、檔次低，且工藝設計復雜，生產自動化程度低。在技術上，用于胃部樣本檢測的產品需要專業醫務人員通過胃鏡采樣后檢測，一般消費者無法自主進行；用于牙垢樣本檢測的產品的問題在于牙垢的組成復雜，易受到食物殘渣影響，且取樣困難，在清潔的口腔中幾乎無法取到牙垢。
[0007]中國專利CN102539424B，公開了一種pH值乙醇法舌苔快速尿素酶的檢測方法及試劑盒，該檢測方法包括如下步驟：A、用pH試紙測量口腔唾液的酸堿度；B、在快速尿素酶試劑杯中滴入95％乙醇液3～4滴，用牙簽將杯底部附著的試劑顆粒與乙醇液攪勻；C、取舌背后部舌苔置入試劑杯中，攪勻，靜置5分鐘后在試劑杯中再滴入3～4滴溶解液，攪勻，靜置5～10分鐘，觀察顏色變化；
D、若變成紅色，用pH試紙測量，將結果與口腔pH值比較，從而判斷結果。試劑盒，包括有盒體，在所述的盒體內設有快速尿素酶試劑杯，盛裝有1～10ml的溶解液和95％乙醇液的軟塑瓶，檢測范圍5.5～9.0的pH精密試紙，棉簽一包和牙簽一包。
[0008]該專利存在以下問題：1）未明確尿素酶相關試劑，僅說明使用寧波美康的快速診斷試劑杯。但目前已無法查詢到該產品信息。
[0009]2）檢測步驟繁瑣。既要取樣檢測尿素酶，還要取樣檢測pH值。且未說明使用者應該如何檢測口腔pH值。不方便普通人群的自行檢查。
[0010]綜上，現有技術或產品存在多種問題，不適于消費者對疑似幽門螺桿菌癥狀的自行檢查。
技術實現思路
[0011]本專利技術的目的是解決現有技術存在的上述技術問題，提供一種檢測口腔中幽門螺桿菌的組合物、試劑盒和方法。
[0012]本專利技術的專利技術人提供了一種新的技術方案，并解決了現有技術存在的技術問題。
[0013]本專利技術的技術方案如下：首先，本專利技術提供了一種檢測幽門螺桿菌的檢測組合物，所述組合物含有尿素、磷酸氫二鉀、氫氧化鈉、對羥基苯甲酸甲酯、溴百里酚藍和蒸餾水；各組分含量如下：尿素1%~3%w/v，磷酸氫二鉀0.014%~0.041%w/v，氫氧化鈉0.001%~0.004%w/v，對羥基苯甲酸甲酯0.1%~0.3%w/v，溴百里酚藍0.01%~0.03%w/v，所述組合物的pH值為6~7。
[0014]上述組合物中，尿素起著幽門螺桿菌產生的尿素酶底物的作用，對于測定幽門螺桿菌產生的尿素酶的活性，含量優選1%~3%w/v。
[0015]磷酸氫二鉀和氫氧化鈉起著設定體系pH值的作用，使得組合物在保存過程中pH值不發生大的改變；同時兩者濃度較低，使其不影響樣本中尿素酶引起的pH值變化；其中磷酸氫二鉀含量優選0.014%~0.041%w/v，氫氧化鈉含量優選0.001%~0.004%w/v。
[0016]對羥基苯甲酸甲酯起著防腐劑的作用，可防止組合物在保存過程中滋生細菌影響檢測結果，含量優選0.1%~0.3% w/v。
[0017]pKa值在6.5~8.5的指示劑起著對pH變化敏感的作用，在本專利技術中溴百里酚藍是最合適的；其具有在酸性溶液中表現出黃色和在中性、堿性溶液中為綠色、藍色的特征，黃綠色與藍色的差異比黃色與粉紅色的差異更明顯；且溴百里酚藍顏色豐富，隨pH值升高可顯示青、淺藍、深藍等顏色，可半定量的提示幽門螺桿菌感染程度；含量優選0.01%~0.03%w/v。
[0018]最優選地，所述組合物中，各組分含量如下：尿素2%w/v，磷酸氫二鉀0.027%w/v，氫氧化鈉0.002%w/v，對羥基苯甲酸甲酯0.2%w/v，溴百里酚藍0.02%w/v，所述組合物的pH值為6.5。
[0019]其次，本專利技術得到了上述組合物并且提供了一種檢測幽門螺桿菌的試劑盒，該試劑盒包括口腔樣本取樣裝置、檢測裝置、裝有上述組合物的擠壓式塑料瓶和裝有95%v/v乙醇的擠壓式塑料瓶。
[0020]95%v/v乙醇的作用是封閉口腔內唾液鏈球菌等產尿素酶的非幽門螺桿菌菌株，阻止其尿素酶的釋出，減少對實驗結果的影響。幽門螺桿菌的尿素酶基本位于細胞壁上，且幽門螺桿菌具有耐酸能力，其尿素酶的釋放不受乙醇影響。
[0021]口腔樣本取樣裝置為特定大小的牙刷。
[0022]檢測裝置為具有一定厚度的，包含一個特定尺寸孔洞的塑料片。檢測裝置通過切割塑料板后進行沖壓獲得。
[0023]第三，本專利技術提供一種從口腔樣本中檢測幽門螺桿菌的方法，其檢測步驟包括用上述組合物與口腔樣本反應和觀察反應后上述組合物的顏色變化。使用者使用上述試劑盒附帶的取樣裝置自舌上表面中后部刮取舌苔作為口腔樣本，將口腔樣本放置在反應孔中，在反應孔中加入95%乙醇浸泡樣本數分鐘后再加入上述組合物并觀察顏色變化。
[0024]本專利技術中，w/v的單位均為g/mL。
[0025]v/v的單位均為mL/mL。
[0026]本專利技術具有如下技術效果：本專利技術通過使用95%乙醇浸泡樣本，使得本文檔來自技高網...
【技術保護點】
【技術特征摘要】
1.一種檢測幽門螺桿菌的檢測組合物，其特征在于，所述組合物含有尿素、磷酸氫二鉀、氫氧化鈉、對羥基苯甲酸甲酯、溴百里酚藍和蒸餾水；各組分含量如下：尿素1%~3%w/v，磷酸氫二鉀0.014%~0.041%w/v，氫氧化鈉0.001%~0.004%w/v，對羥基苯甲酸甲酯0.1%~0.3%w/v，溴百里酚藍0.01%~0.03%w/v，所述組合物的pH值為6~7。2.根據權利要求1所述的組合物，其...
【專利技術屬性】
技術研發人員：張弨，
申請(專利權)人：修正生物醫藥杭州研究院有限公司，
類型：發明
國別省市：
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