一種用于兒童威爾森氏癥快速篩查的參數組合和試劑盒制造技術

本發明專利技術提供了一種用于兒童威爾森氏癥快速篩查的參數組合和試劑盒。該參數組合包括ALT水平、血漿銅藍蛋白水平和24小時尿銅水平中一種或者多種。試劑盒，其包括檢測ALT水平、血漿銅藍蛋白水平和/或尿銅水平的試劑；和一說明書。本發明專利技術提供的參數組合物和試劑盒通過參考ALT升高、血漿銅藍蛋白水平降低和24小時尿銅升高三個參數，可以適用于威爾森氏癥的早期診斷和篩查，操作簡單易行，可信度高，便于早期的診斷和介入治療，將有利于大大提高生存率并具有良好的預后。并具有良好的預后。

【技術實現步驟摘要】
一種用于兒童威爾森氏癥快速篩查的參數組合和試劑盒


[0001]本專利技術涉及醫學檢測
，具體涉及一種用于兒童威爾森氏癥快速篩查的參數組合和試劑盒。

技術介紹

[0002]肝豆狀核變性(HLD)，也稱為威爾遜病/威爾森氏癥(WD)，是一種常染色體隱性遺傳病。該病在世界各地均有發生，在人群中的發病率約為活產兒的1/30,000
[1]。WD是由編碼13號染色體上細胞內銅轉運蛋白的ATP7B基因突變導致的，導致細胞內銅輸出受損
[2]。ATP7B是一種P型ATP酶，主要在肝臟中表達。ATP7B將銅與其N端結構域結合，并負責銅跨膜運輸，使用ATP作為其能源。研究表明，不同位點的突變會影響ATPase的活性。迄今為止，已在WD患者中發現ATP7B位點的800多種不同突變
[3]。特別是，WD ATP7B基因的突變影響銅離子與銅藍蛋白的相互作用，進而影響膽汁中銅的排泄，是肝臟銅排泄的主要途徑。如果膽汁中的銅排泄減少，銅就會沉積在肝臟周圍的地方，造成肝細胞損傷，臨床上首先診斷為丙氨酸氨基轉移酶(ALT)升高。隨后銅在腦、角膜和腎臟上的沉積會對相應器官造成損害，并伴有各種臨床癥狀
[4]。隨著時間的推移，肝臟逐漸受到沉積銅的損害，部分患者最終會出現肝硬化或肝功能衰竭，以及嚴重的神經系統損害、血液系統損害和精神癥狀
[4]。
[0003]由于治療開始的時間不同，WD兒童的臨床表現可能多種多樣
[5,6]。通常，新生嬰兒的銅排泄機制尚未完全發育，在出生后一年內變得更加有效。然而，WD患者銅排泄的關鍵途徑未能發展或出現功能障礙，導致患者一生中銅的積累，逐漸產生各種臨床癥狀
[7]。一般來說，雖然WD患者的診斷年齡為5
?
35歲(平均＝13歲)
[8]，但也有年輕和年齡較大的患者(>70)需要診斷
[4,8
?
10]。此外，一項對143名WD兒童的研究表明，21名兒童(15％)在5歲前出現肝功能異常的癥狀或檢查結果
[10]。WD兒童平均年齡在9
?
13歲最常見的初始表現是肝臟疾病
[11,12]，而WD占慢性活動性肝炎兒童的8％
?
10％
[13]。對于其他患者，肝病可能無癥狀進展，肝硬化或急性肝功能衰竭的多種并發癥往往直到青春期才會出現。此外，在某些情況下，在明顯的肝臟疾病之前也可能出現神經或精神表現。總而言之，兒童和老年患者更可能分別被診斷為肝臟和神經系統表現。老年患者出現神經系統癥狀的平均年齡為15
?
21歲
[6,11,14,15]。WD發病年齡的差異可能反映了基因突變和外顯率、基因外因素和其他環境因素(例如飲食)的變化
[16]?，F有技術主要依據基因突變檢測分析，病人多半鑒于病情出現表征后才會進行檢測，不適合早期體檢篩查中使用。因此，高精度的早期診斷對于WD患者及其預后至關重要。

技術實現思路

[0004]為了克服現有技術中的缺陷，本專利技術提供了一種用于兒童威爾森氏癥快速篩查的參數組合和試劑盒。
[0005]為實現上述目的，本專利技術采用如下技術方案：
[0006]本專利技術的第一方面是提供一種用于兒童威爾森氏癥快速篩查的參數組合，包括
ALT水平、血漿銅藍蛋白水平和24小時尿銅水平中一種或者多種。
[0007]進一步地，ALT升高、血漿銅藍蛋白水平降低和/或24小時尿銅升高，則可以初步診斷為威爾森氏癥。
[0008]本專利技術的第二方面是提供一種用于兒童威爾森氏癥快速篩查的試劑盒，其包括檢測ALT水平、血漿銅藍蛋白水平和/或尿銅水平的試劑；和
[0009]一說明書。
[0010]進一步地，上述說明書包括如下指示：
[0011]a.檢測ALT水平、血漿銅藍蛋白水平和24小時尿銅水平；和
[0012]b.判斷是否可以初步診斷為威爾森氏癥：若ALT升高、血漿銅藍蛋白水平降低和/或24小時尿銅升高，則可以初步診斷為威爾森氏癥；若無任一符合上述標準的指標，則可以判斷未患有威爾森氏癥。
[0013]進一步地，上述說明書還包括如下指示：
[0014]c.若可以初步診斷為威爾森氏癥，則再采用ATP7B基因的基因突變試驗用于確診是否為威爾森氏癥。
[0015]本專利技術采用以上技術方案，與現有技術相比，具有如下技術效果：
[0016]本專利技術提供的參數組合物和試劑盒通過參考ALT升高、血漿銅藍蛋白水平降低和24小時尿銅升高三個參數，可以適用于威爾森氏癥的早期診斷和篩查，操作簡單易行，可信度高，便于早期的診斷和介入治療，將有利于大大提高生存率并具有良好的預后。
具體實施方式
[0017]本專利技術提供了一種用于兒童威爾森氏癥快速篩查的參數組合和試劑盒。該參數組合包括ALT水平、血漿銅藍蛋白水平和24小時尿銅水平中一種或者多種。ALT升高、血漿銅藍蛋白水平降低和/或24小時尿銅升高，則可以初步診斷為威爾森氏癥。
[0018]下面通過具體實施例對本專利技術進行詳細和具體的介紹，以使更好的理解本專利技術，但是下述實施例并不限制本專利技術范圍。
[0019]實施例中方法如無特殊說明的采用常規方法，使用的試劑如無特殊說明的使用常規市售試劑或按常規方法配制的試劑。
[0020]實施例1
[0021]本實施例驗證包括ALT水平、血漿銅藍蛋白水平和24小時尿銅水平中一種或者多種的參數組合可以適用于威爾森氏癥的早期快速篩查，具體的操作過程和結果如下：
[0022]招募了深圳市兒童醫院就診的30名以丙氨酸氨基轉移酶ALT升高為WD首發表現的華南地區兒童，其中女14例，男16例，并對臨床資料和基因檢測結果的橫斷面進行了回顧性分析及其短期預后的隨訪研究。
[0023]就診期間，上述30名兒童患者被進行了體檢，發現肝酶升高30例(100％)，且在所有30例(100％)中，血清銅藍蛋白(CP)水平降低，而24小時尿銅排泄量增加(如下表1)。
[0024]表1 30名兒童患者的臨床資料
[0025][0026][0027]注：Hb：血紅蛋白，ALT：谷丙轉氨酶，AST：谷草轉氨酶，TB：總膽紅素，ALP：血清堿性磷酸酶，GGT：γ
?
谷氨酰轉肽酶，CP：血清銅藍蛋白。
[0028]最終，使用經典確診方法，ATP7B基因的基因突變試驗用于確診，其中c.2333G>T和c.3443T>C這兩個突變位點的突變頻率最高，分別占突變位點總數的23.0％和10.7％(如下表2、3)。
[0029]表2 30名兒童患者ATP7B的突變類型
[0030][0031][0032]表3 30名兒童患者中的ATP7B突變類型總結
[0033]children:analysis of 57cases.J Pediatr Gastroenterol Nutr 2009；48本文檔來自技高網...

【技術保護點】

【技術特征摘要】
1.一種用于兒童威爾森氏癥快速篩查的參數組合，其特征在于，包括ALT水平、血漿銅藍蛋白水平和24小時尿銅水平中一種或者多種。2.根據權利要求1所述的參數組合，其特征在于，ALT升高、血漿銅藍蛋白水平降低和/或24小時尿銅升高，則可以初步診斷為威爾森氏癥。3.一種用于兒童威爾森氏癥快速篩查的試劑盒，其特征在于，包括檢測ALT水平、血漿銅藍蛋白水平和/或尿銅水平的試劑；和一說明書。4.根據權利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述說明...

【專利技術屬性】
技術研發人員：周建利，周少明，陳沫先，趙煜楨，
申請(專利權)人：深圳市兒童醫院，
類型：發明
國別省市：