L-谷氨酰胺在治療骨關節(jié)炎中的應用制造技術

本發(fā)明專利技術公開了L

【技術實現(xiàn)步驟摘要】
L
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谷氨酰胺在治療骨關節(jié)炎中的應用


[0001]本專利技術涉及生物醫(yī)藥領域，更具體地說，它涉及L
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谷氨酰胺在治療骨關節(jié)炎中的應用。

技術介紹

[0002]骨關節(jié)炎(Osteoarthritis，OA)是最常見的關節(jié)疾病，是由于勞損、創(chuàng)傷、增齡、關節(jié)先天性異常、關節(jié)畸形等諸多因素引起的關節(jié)軟骨退化損傷，主要以關節(jié)軟骨破壞為特征，同時包括滑膜和軟骨細胞炎癥、骨贅形成及軟骨下骨硬化等病理改變；臨床表現(xiàn)為緩慢發(fā)展的關節(jié)疼痛、僵硬、關節(jié)腫脹、活動受限和關節(jié)畸形等。大約有10％
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20％的成人患有OA，因此帶來巨大的社會經(jīng)濟負擔。
[0003]早期骨關節(jié)炎治療方法分為非藥物治療和藥物治療。非藥物治療包括減輕體重、有氧訓練和理療等，并非針對疾病病理狀態(tài)。而藥物治療有望改善患者的癥狀并延緩疾病的病理進程。但目前治療骨關節(jié)炎的藥物主要是消炎鎮(zhèn)痛藥，如非甾體類抗炎藥、醋氨酚及曲馬多等，緩解癥狀卻不能延緩骨關節(jié)炎病理進程，只是推遲最終手術時間。近年來骨關節(jié)炎疾病改善藥物(disease
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modifying osteoarthritis drugs，DMOADs)
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即能有效緩解骨關節(jié)炎的癥狀且改善已經(jīng)破壞的軟骨結構，成為研究的熱點，并給骨關節(jié)炎的治療帶來了光明的前景。其代表藥物有雷尼酸鍶、羥化氯喹和腫瘤壞死因子α阻斷劑等，但這類藥物基本上處于臨床前研究階段，其臨床療效尚不確切且價格昂貴。
[0004]因此，尋找新的、廉價的和更加有效的骨關節(jié)炎疾病改善藥物，具有著重要的科學和社會意義。

技術實現(xiàn)思路

[0005]為解決現(xiàn)有技術中的不足，本專利技術的目的是提供L
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谷氨酰胺在治療骨關節(jié)炎中的應用。
[0006]本專利技術的上述技術目的是通過以下技術方案得以實現(xiàn)的：L
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谷氨酰胺在制備治療骨關節(jié)炎藥物中的應用。
[0007]進一步的，所述L
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谷氨酰胺通過TGF
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β1信號通路調(diào)控lncRNA NKILA基因表達上調(diào)治療骨關節(jié)炎。
[0008]進一步的，所述lncRNA NKILA基因表達上調(diào)后通過抑制NF
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κB活化以降低軟骨細胞炎性損傷。
[0009]進一步的，所述L
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谷氨酰胺與TGF
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β1的丙氨酸殘基230、亮氨酸殘基278、賴氨酸殘基232中的至少一種相互結合。
[0010]進一步的，所述TGF
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β1作用于膜受體TGF
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βR后激活下游的Smad2和Smad3信號蛋白，Smad2和Smad3信號蛋白進入細胞核結合到NKILA啟動子區(qū)促使NKILA表達升高，以阻止NF
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κB的激活以及向核內(nèi)的轉移。
[0011]進一步的，所述lncRNA NKILA基因位于人染色體20p13。
[0012]與現(xiàn)有技術相比，本專利技術具有以下有益效果：
[0013]本專利技術利用L
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Gln治療大鼠OA動物模型，從炎性反應、細胞外基質(zhì)分泌、軟骨細胞存活與軟骨再生等多個方面，系統(tǒng)評估L
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Gln對OA的直接療效；并結合NKILA基因沉默以及TGF
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β受體阻滯劑等方法，揭示了L
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Gln治療OA的分子機制，驗證了L
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Gln能通過TGF
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β1通路上調(diào)NKILA表達，從而抑制NF
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κB活化，降低軟骨細胞炎性損傷，促進細胞外基質(zhì)分泌和軟骨修復，為OA防治提供新的理論依據(jù)；由此得知，L
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Gln可作為一種新的、廉價的且更有效的骨關節(jié)炎疾病改善藥物，不僅可以緩解患者疾病帶來的疼痛，且從根本上改善已經(jīng)破壞的軟骨結構，從而延緩疾病的進程。
附圖說明
[0014]此處所說明的附圖用來提供對本專利技術實施例的進一步理解，構成本申請的一部分，并不構成對本專利技術實施例的限定。在附圖中：
[0015]圖1是本專利技術實施例中L
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Gln治療后膝關節(jié)KSS評分結果圖；
[0016]圖2是本專利技術實施例中高通量測序方法檢測人正常軟骨與OA軟骨中l(wèi)ncRNAs表達譜圖；
[0017]圖3是本專利技術實施例中Real
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time PCR檢測OA軟骨與OA軟骨細胞中l(wèi)ncRNAs表達情況結果圖；
[0018]圖4是本專利技術實施例中L
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谷氨酰胺潛在靶點TGF
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β1的Docking結果圖。
具體實施方式
[0019]為使本專利技術的目的、技術方案和優(yōu)點更加清楚明白，下面結合實施例和附圖，對本專利技術作進一步的詳細說明，本專利技術的示意性實施方式及其說明僅用于解釋本專利技術，并不作為對本專利技術的限定。
[0020]實施例：L
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谷氨酰胺在治療骨關節(jié)炎中的應用。
[0021]L
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谷氨酰胺(L
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glutamine，L
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Gln)(商品名新麥林)，分子式為C5H10N2O3，，它是一種主要集中在血漿和骨骼肌中的非必需氨基酸，在人體新陳代謝中發(fā)揮著重要的調(diào)節(jié)作用。其結構式如下：
[0022][0023](1)前期臨床觀察結果
[0024]觀察40例慢性胃炎同時合并膝關節(jié)OA患者口服L
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Gln(新麥林)6月后膝關節(jié)疼痛情況及關節(jié)功能情況，利用疼痛視覺模擬評分(Visual Analogue Scale，VAS)和膝關節(jié)評分法(Keen Society Score，KSS)對患者分別進行休息及活動時疼痛評估和關節(jié)功能評分，發(fā)現(xiàn)在口服L
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Gln后，患者膝關節(jié)疼痛癥狀得到明顯緩解，同時關節(jié)功能也得到改善，結果如表1和圖1所示。圖1中，A為Knee score(膝關節(jié)得分)；B為Functional score(功能得分)。
[0025]表1L
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Gln治療前后膝關節(jié)疼痛VAS評分和改善率
[0026][0027](2)利用高通量測序的方法檢測發(fā)現(xiàn)人正常膝關節(jié)軟骨(年輕車禍傷截肢病人)與膝關節(jié)OA軟骨(膝關節(jié)置換病人)中l(wèi)ncRNAs表達譜差異明顯。結果如圖2所示，其中：A為差異表達lncRNA火山圖，橫坐標為不同樣品中表達倍數(shù)變化，縱坐標為表達量變化的統(tǒng)計學顯著程度；B為差異表達lncRNA熱點圖，圖中為差異表達顯著性前20的lncRNA。
[0028](3)根據(jù)高通量測序結果，挑選差異表達顯著程度前10個lncRNA進行驗證，利用Real
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time PCR檢測體外培養(yǎng)的人膝OA軟骨細胞中其表達差異情況，結果同前述一致；然后向體外人膝OA軟骨細胞中加入10mM的L
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Gln后，利用Real
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time 本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術保護點】

【技術特征摘要】
1.L
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谷氨酰胺在治療骨關節(jié)炎藥物中的應用。2.根據(jù)權利要求1所述的應用，其特征是，所述L
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谷氨酰胺通過TGF
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β1信號通路調(diào)控lncRNA NKILA基因高表達治療骨關節(jié)炎。3.根據(jù)權利要求2所述的應用，其特征是，所述lncRNA NKILA基因高表達后通過抑制NF
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κB通路的活化以降低軟骨細胞炎性損傷。4.根據(jù)權利要求2所述的應用，其特征是，所述L
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谷氨酰胺與TGF
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【專利技術屬性】
技術研發(fā)人員：程文丹，馬瀟，
申請(專利權)人：安徽醫(yī)科大學第二附屬醫(yī)院，
類型：發(fā)明
國別省市：