本發明專利技術涉及植物天然提取物技術領域,尤其涉及一種恰瑪古抗腫瘤成分的提取方法。本發明專利技術直接采用極性小的溶劑石油醚作為提取溶劑一步提取粗恰瑪古抗腫瘤成分,步驟簡單,提取時間短,提取溫度低。進一步地,本發明專利技術采用層析分離的方式對粗恰瑪古抗腫瘤成分進行進一步提純,得到活性更好的恰瑪古抗腫瘤成分。本發明專利技術實施例表明,采用本發明專利技術提取方法得到的抗腫瘤成分能夠有效抑制人肺癌A549細胞和小鼠肺癌LLC細胞的活性。LLC細胞的活性。LLC細胞的活性。
【技術實現步驟摘要】
一種恰瑪古抗腫瘤成分的提取方法
[0001]本專利技術涉及植物天然提取物
,尤其涉及一種恰瑪古抗腫瘤成分的提取方法。
技術介紹
[0002]恰瑪古為十字花科蕓苔屬二年生草本植物,學名為蕪菁(Brassica rapa L.)。隨著對恰瑪古的研究不斷深入,不同類別的化學成分被分離獲得,對其藥理作用的認識也不斷提升。
[0003]恰瑪古作為中國新疆常用的藥食兼用植物,其硫代葡萄糖苷、黃酮類、揮發油和多糖等多種活性成分,可發揮抗腫瘤、免疫調節、抗氧化和降血糖等多種生物活性。現有技術多采用加熱及超聲醇提的方式對抗腫瘤活性成分進行提取,醇提的溫度通常為80℃以上,且醇提后需要進行多步濃縮才能獲得粗產物,整體提取步驟復雜,所需時間長,提取溫度高。
技術實現思路
[0004]有鑒于此,本專利技術提供了一種恰瑪古抗腫瘤活性成分的提取方法。本專利技術提供的提取方法步驟簡單,提取時間短,提取溫度低,且提取的抗腫瘤成分活性高。
[0005]為了實現上述專利技術目的,本專利技術提供以下技術方案:
[0006]一種恰瑪古抗腫瘤成分的提取方法,包括以下步驟:
[0007]采用石油醚對恰瑪古粉末進行超聲提取和浸提,浸提后直接獲得粗恰瑪古抗腫瘤成分;
[0008]所述超聲提取的時間≤20min,所述浸提的次數≤3次,單次所述浸提的時間≤2h;所述超聲提取的溫度≤60℃;所述浸提的溫度為≤60℃
[0009]優選的,所述超聲提取的時間為15~20min;所述浸提的次數為1~3次,單次所述浸提的時間為1~2h;所述超聲提取的溫度為50~60℃;所述浸提的溫度為50~60℃。
[0010]優選的,所述恰瑪古粉末和石油醚的料液比為1:5~10g/mL。
[0011]優選的,浸提后,還包括對所述粗恰瑪古抗腫瘤成分進行層析分離。
[0012]優選的,所述層析分離的洗脫方式為梯度洗脫。
[0013]優選的,所述梯度洗脫包括:依次使用石油醚和乙酸乙酯的體積比為10:0、9:1、8:2和7:3的溶劑進行洗脫,石油醚和乙酸乙酯體積比為8:2和7:3時的洗脫組分為恰瑪古抗腫瘤成分。
[0014]優選的,所述梯度洗脫在硅膠柱中進行,所述硅膠的粒徑為50~150μm,所述硅膠柱的柱體體積為20~100cm3。
[0015]優選的,所述粗恰瑪古抗腫瘤成分與硅膠的質量比為1:1~6。
[0016]優選的,所述梯度洗脫中,每個梯度的洗脫量為1~2個硅膠柱的柱體體積。
[0017]優選的,所述恰瑪古粉末為恰瑪古地下部分的粉末,所述恰瑪古粉末的粒徑為250
~850μm。
[0018]本專利技術提供了一種恰瑪古抗腫瘤成分的提取方法,包括以下步驟:采用石油醚對恰瑪古粉末進行超聲提取和浸提,獲得粗恰瑪古抗腫瘤成分;所述超聲提取的時間≤20min,所述浸提的時間≤2h;所述超聲提取的溫度≤60℃;所述浸提的溫度為≤60℃。本專利技術直接采用用極性小的劑石油醚作為提取溶劑一步提取粗恰瑪古抗腫瘤成分,步驟簡單,提取時間短,提取溫度低。進一步地,本專利技術采用層析分離的方式對粗恰瑪古抗腫瘤成分進行進一步提純,得到活性更好的恰瑪古抗腫瘤成分。本專利技術實施例表明,采用本專利技術提取方法得到的抗腫瘤成分能夠有效抑制人肺癌A549細胞和小鼠肺癌LLC細胞的活性。
附圖說明
[0019]圖1為粗恰瑪古抗腫瘤成分以及恰瑪古醇提石油醚萃取物對人肺癌A549細胞活性的抑制結果圖;
[0020]圖2為粗恰瑪古抗腫瘤成分以及恰瑪古醇提乙酸乙酯萃取物對人肺癌A549細胞活性的抑制結果圖;
[0021]圖3為粗恰瑪古抗腫瘤成分硅膠柱層析分離TLC結果圖;
[0022]圖4為粗恰瑪古抗腫瘤成分不同梯度洗脫組分對人肺癌A549細胞活性的抑制結果圖;
[0023]圖5為粗恰瑪古抗腫瘤成分編號為23~25洗脫組分對人肺癌A549細胞形態改變的結果圖;
[0024]圖6為粗恰瑪古抗腫瘤成分編號為23~25洗脫組分對人肺癌A549細胞和小鼠肺癌LLC細胞活性的抑制結果圖。
具體實施方式
[0025]下面將結合本專利技術中的實施例,對本專利技術中的技術方案進行清楚、完整地描述。
[0026]本專利技術提供了一種恰瑪古抗腫瘤成分的提取方法,包括以下步驟:
[0027]采用石油醚對恰瑪古粉末進行超聲提取和浸提,浸提后直接獲得粗恰瑪古抗腫瘤成分;
[0028]所述超聲提取的時間≤20min,所述浸提的次數≤3次,所述單次浸提的時間≤2h;所述超聲提取的溫度≤60℃;所述浸提的溫度為≤60℃。
[0029]本專利技術采用石油醚對恰瑪古粉末進行超聲提取和浸提,浸提后直接獲得粗恰瑪古抗腫瘤成分。在本專利技術中,所述恰瑪古粉末優選為恰瑪古地下部分的粉末,所述恰瑪古粉末的粒徑優選為250~850μm,更優選為380~550μm。在本專利技術的實施例中,所述恰瑪古粉末的制備方法優選為:將恰瑪古地下部分依次進行洗凈切片、晾干、粉碎,得到恰瑪古粉粹物,將所述恰瑪古粉碎物過40目(孔徑為425μm)篩,取篩下物,得到恰瑪古粉末。
[0030]在本專利技術中,所述恰瑪古粉末和石油醚的料液比優選為1:5~10g/mL,更優選為1:7~10g/mL,進一步優選為1:10g/mL。
[0031]在本專利技術中,所述超聲的功率優選為280~320W,更優選為300W;所述超聲提取的時間優選為≤20min,更優選為15~20min,進一步優選為20min,超聲提取的溫度優選為50~60℃,更優選為50~55℃,進一步優選為50℃。本專利技術采用上述超聲時間和溫度,有利于
抗腫瘤有效成分從恰瑪古粉末中充分釋放到溶劑中。
[0032]在本專利技術中,所述浸提優選在水浴條件下進行,所述浸提的次數≤3次,優選為1~3次,進一步優選為3次,單次所述浸提的時間≤2h,優選為1~2h,進一步優選為2h,所述浸提的溫度≤60℃,優選為50~60℃,進一步優選為55~60℃,更優選為60℃。本專利技術優選采用上述浸提條件有利于對抗腫瘤有效成分進行充分提取。
[0033]得到粗恰瑪古抗腫瘤成分后,本專利技術優選對所述粗恰瑪古抗腫瘤進行層析分離以富集抗腫瘤成分。在本專利技術中,所述層析分離用裝置優選為硅膠柱,所述硅膠柱中硅膠的粒徑優選為50~150μm,更優選為75~150μm,進一步優選為75μm,所述硅膠柱的柱體體積優選為20~100cm3,更優選為50~80cm3,進一步優選為50cm3;所述層析分離的洗脫方法優選為梯度洗脫。在本專利技術中,在進行梯度洗脫前優選將粗恰瑪古抗腫瘤成分用石油醚溶解,再與硅膠進行拌樣混合。在本專利技術的實施例中,所述粗恰瑪古抗腫瘤成分和石油醚的質量比優選為1:10,與硅膠拌樣后,本專利技術優選將拌樣后的硅膠在60℃水浴下蒸發掉石油醚,使粗恰瑪古抗腫瘤成分完全被硅膠吸附。在本專利技術中,所述粗恰瑪古抗腫瘤成分與硅膠的質量比優選為1:1~6,更優選為1:2~5,進一步優選為1:3,本專利技術優選將粗恰瑪古抗腫瘤本文檔來自技高網...
【技術保護點】
【技術特征摘要】
1.一種恰瑪古抗腫瘤成分的提取方法,其特征在于,包括以下步驟:采用石油醚對恰瑪古粉末進行超聲提取和浸提,浸提后直接獲得粗恰瑪古抗腫瘤成分;所述超聲提取的時間≤20min,所述浸提的次數≤3次,單次所述浸提的時間≤2h;所述超聲提取的溫度≤60℃;所述浸提的溫度為≤60℃。2.根據權利要求1所述的提取方法,其特征在于,所述超聲提取的時間為15~20min;所述浸提的次數為1~3次,單次所述浸提的時間為1~2h;所述超聲提取的溫度為50~60℃;所述浸提的溫度為50~60℃。3.根據權利要求1所述的提取方法,其特征在于,所述恰瑪古粉末和石油醚的料液比為1:5~10g/mL。4.根據權利要求1所述的提取方法,其特征在于,浸提后,還包括對所述粗恰瑪古抗腫瘤成分進行層析分離。5.根據權利要求4所述的提取方法,其特征在于,所述層析分離...
【專利技術屬性】
技術研發人員:李金耀,馬榮斌,夏麗潔,謝仁古麗,
申請(專利權)人:新疆前進榮耀投資有限公司,
類型:發明
國別省市:
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