一種具有纖溶活性昆蟲提取液、制備方法及應用技術

本發明專利技術屬于天然提取物技術領域，公開了一種具有纖溶活性昆蟲提取液、制備方法及應用，將美洲大蠊1

【技術實現步驟摘要】
一種具有纖溶活性昆蟲提取液、制備方法及應用


[0001]本專利技術屬于天然提取物
，尤其涉及一種具有纖溶活性昆蟲提取液、 制備方法及應用。

技術介紹

[0002]目前，纖溶活性蛋白是一種非常重要的堿性類胰蛋白酶絲氨酸蛋白酶，其 擁有較好的纖溶活性，廣泛存在于微生物、昆蟲和動物中。經過幾十年的研究， 在許多微生物、昆蟲和動物中分離純化得到纖溶活性蛋白酶。某些纖溶蛋白酶 已開發成為臨床治療血栓的重要藥物，而且纖溶蛋白酶對抗腫瘤的新藥開發也 在不斷進行中。
[0003]正常生理狀況下，血管受損后，會在損傷部位形成血栓，而當傷口愈合后， 形成的血栓又會被逐漸溶解。參與纖維蛋白降解或血栓溶解的是纖溶系統，它 與凝血系統相互拮抗，以防止血栓形成和保持血流暢通。人體對纖維蛋白的裂 解主要依靠纖溶酶。纖溶酶可以裂解單個的裂解纖維蛋白，也可以裂解網狀的 纖維蛋白。自然界存在大量具有抗凝、溶栓效應的活性物質。從作用機理上纖 溶活性蛋白酶大體上可以分成兩類：一類是纖溶酶原激活劑，如尿激酶、葡激 酶，其作用原理是纖溶酶原激活劑能將纖溶酶原激活為纖溶酶，而具有絲氨酸 蛋白酶活性的纖溶酶則能降解構成血栓骨架的纖維蛋白，從而引起溶栓的作用； 另一類是纖溶酶類物質，其作用不需通過激活纖溶酶原，直接降解血塊中的纖 維蛋白。例如，溶栓藥物鏈激酶先與纖溶酶原結合，形成SK
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纖溶酶原復合物， 這復合物才具有酶催化的活性，使游離的纖溶酶原轉變成纖溶酶，最后纖溶酶 溶解纖維蛋白。但是由于缺乏特異性，可導致廣泛的纖溶系統激活，導致抗纖 溶酶缺乏，產生游離的纖溶酶，甚至導致嚴重出血現象。目前人們正在開發具 有提高纖維蛋白特異性和溶栓效率，減少顱內出血的危險的新型纖溶蛋白。
[0004]美洲大蠊，學名Periplaneta americana(L.)俗名蟑螂、石姜、滑蟲、偷油 婆、茶婆子，為昆蟲綱有翅亞綱蜚蠊目蜚蠊科大蠊屬。含有蛋白質、氨基酸、 肽類、糖類等多種有效成分，具有活血化瘀、解毒消疳、利水消腫等功效。《神 農本草經》記載，謂“味咸，寒。主血瘀、癥堅、寒熱，破積聚，喉咽痹，內 寒，無子”，用以治療小兒疳積、疔瘡、癰腫、喉蛾、無名腫毒、梅毒以及毒 蛇、蜈蚣咬傷等疾病。藥用昆蟲蟻獅(Antlion)，屬于脈翅目蟻嶺科，又名稱 為沙牛、沙王八、土牛、老倒等。成蟲名為蟻嶺，屬脈翅目中分布最多、最廣 泛的一種。蟻獅被視為一種名貴的中藥材料。其功能主要有祛瘀消腫、平肝解 熱、通便散結等，主治癲癇、脈管炎、便秘、結石等疑難雜癥外用可醫治中耳 炎等，并且蟻獅作為粉末狀用處時，對于刀傷有很好的療效。但是，現有技術 中關于從美洲大蠊和蟻獅中制備提取液的方法還尚未見報道。
[0005]通過上述分析，現有技術存在的問題及缺陷為：現有技術中關于從美洲大 蠊和蟻獅中共同制備提取液的方法還尚未見報道。
[0006]解決以上問題及缺陷的難度為：如何選擇有效的配比，取得最佳的纖溶活 性和抑制人結腸癌細胞增殖。
[0007]解決以上問題及缺陷的意義為：為從美洲大蠊和蟻獅中共同制備抗血栓活 性提取液提供理論支撐和推動了活性提取液的實際應用。

技術實現思路

[0008]針對現有技術存在的問題，本專利技術提供了一種具有纖溶活性昆蟲提取液、 制備方法及應用。
[0009]本專利技術是這樣實現的，一種具有纖溶活性昆蟲提取液的制備方法，所述具 有纖溶活性昆蟲提取液的制備方法包括以下步驟：
[0010]步驟一，將美洲大蠊1
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3份和蟻獅1
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3份混合物集中到一個燒杯中，用蒸餾 水進行沖洗，再用紙巾在桌面上進行濾干，濾干后將稱重。
[0011]步驟二，稱重結束后，加入沒過混合物的PBS溶液，浸泡2小時。
[0012]步驟三，將浸泡之后的混合物倒入玻璃研缽中，加入0.5倍體積預冷的PBS 進行研磨，完全研磨直至溶液完全呈現黑色糊狀為研磨完畢。
[0013]步驟四，將研磨好的勻漿倒入燒杯中，加入兩倍體積的PBS進行24小時浸 泡，將浸泡24小時過后的勻漿進行離心管分裝。
[0014]步驟五，在4℃、10000r/min的條件下進行離心15分鐘，得到的離心粗提 液。將離心管中沉淀去除，留上清液即可。(保留了提取液的纖溶活性)
[0015]本專利技術的另一目的在于提供一種應用所述具有纖溶活性昆蟲提取液的制備 方法制備得到的所述具有纖溶活性昆蟲提取液，所述具有纖溶活性昆蟲提取液 按質量份數計，由美洲大蠊1
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3份和蟻獅1
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3份組成。
[0016]本專利技術的另一目的在于提供一種具有纖溶活性昆蟲提取液在制備抗血栓藥 物中的應用。
[0017]結合上述的所有技術方案，本專利技術所具備的優點及積極效果為：本專利技術提 供的具有纖溶活性昆蟲提取液具有較強的纖溶活性。研究表明，隨著昆蟲提取 液濃度的升高，提取物上清液凍干粉能夠明顯的促進人結腸癌細胞的凋亡，提 取物上清液凍干粉對結腸癌細胞增殖具有明顯的抑制作用。
附圖說明
[0018]為了更清楚地說明本申請實施例的技術方案，下面將對本申請實施例中所 需要使用的附圖做簡單的介紹，顯而易見地，下面所描述的附圖僅僅是本申請 的一些實施例，對于本領域普通技術人員來講，在不付出創造性勞動的前提下 還可以根據這些附圖獲得其他的附圖。
[0019]圖1是本專利技術實施例提供的具有纖溶活性昆蟲提取液的制備方法流程圖。
[0020]圖2是本專利技術實施例提供的提取物的纖溶平板檢測結果示意圖；
[0021]圖2中：1：尿激酶(100u/ml)；2：提取物沉淀；3：提取物上清液；4： PBS。
[0022]圖3是本專利技術實施例提供的溫度對提取液纖溶活性的影響示意圖。
[0023]圖4是本專利技術實施例提供的pH對提取液纖溶活性的影響示意圖。
具體實施方式
[0024]為了使本專利技術的目的、技術方案及優點更加清楚明白，以下結合實施例， 對本專利技術進行進一步詳細說明。應當理解，此處所描述的具體實施例僅僅用以 解釋本專利技術，并不用于限定本專利技術。
[0025]針對現有技術存在的問題，本專利技術提供了一種具有纖溶活性昆蟲提取液、 制備方法及應用，下面結合附圖對本專利技術作詳細的描述。
[0026]如圖1所示，本專利技術實施例提供的具有纖溶活性昆蟲提取液的制備方法包 括以下步驟：
[0027]S101，將美洲大蠊1
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3份和蟻獅1
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3份混合物集中到一個燒杯中，用蒸餾水 進行沖洗，再用紙巾在桌面上進行濾干，濾干后將稱重。
[0028]S102，稱重結束后，加入沒過混合物的PBS溶液，浸泡2小時。
[0029]S103，將浸泡之后的混合物倒入玻璃研缽中，適當加入少許預冷的PBS進 行研磨，完全研磨直至溶液完全呈現黑色糊狀為研磨完畢。
[0030]S104，將研磨好的勻漿倒入燒杯中，加入兩倍體積的PBS進行24小時浸泡， 將浸泡2本文檔來自技高網...

【技術保護點】

【技術特征摘要】
1.一種具有纖溶活性昆蟲提取液的制備方法，其特征在于，所述具有纖溶活性昆蟲提取液的制備方法包括：將美洲大蠊和蟻獅混合物集中到一個燒杯中，用蒸餾水進行沖洗，再用紙巾在桌面上進行濾干，濾干后將稱重；稱重結束后，加入沒過混合物的PBS溶液，浸泡；將浸泡之后的溶液倒入玻璃研缽中，適當加入預冷的PBS進行研磨，完全研磨直至溶液完全呈現黑色糊狀為研磨完畢；將研磨好的勻漿倒入燒杯中，加入PBS進行浸泡，將浸泡過后的勻漿進行離心管分裝；離心，得到的離心粗提液；將離心管中沉淀去除，留上清液。2.如權利要求1所述的具有纖溶活性昆蟲提取液的制備方法，其特征在于，將美洲大蠊1
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3份和蟻獅1
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3份混合物集中到一個燒杯中。3.如權利要求1所述的具有纖溶活性昆蟲提取液的制...

【專利技術屬性】
技術研發人員：劉建濤，
申請(專利權)人：劉建濤，
類型：發明
國別省市：