細胞擴增制造技術

本發明專利技術描述的實施方式涉及在中空纖維生物反應器中生長細胞的方法和系統。在實施方式中，細胞可暴露于激活細胞擴增的激活劑。在實施方式中，細胞可包括T細胞，且激活劑可為不同形式，包括例如抗原遞呈細胞或經抗體功能化的珠子。珠子。

【技術實現步驟摘要】
細胞擴增
[0001]本申請是2016年05月12日遞交的申請號為201680026705.8，專利技術名稱為“細胞擴增”的分案申請。
[0002]相關申請的交叉引用
[0003]本專利申請要求于2015年5月13日遞交名稱為“細胞擴增(CELL EXPANSION)”美國臨時專利申請號62/161,128的優先權，該美國臨時專利申請通過引用整體并入本文中，如同全文在本文中示出一樣。

技術介紹

[0004]細胞擴增系統(CES)可用于擴增多種細胞類型并且使多種細胞類型分化，這些細胞類型可用于研究和治療目的。作為一個實例，T細胞療法(例如自體T細胞療法)是用于治療很多疾病的新興技術。經基因工程處理過且經離體擴增的T細胞例如可示出有希望治療一些白血病(例如B細胞)和其它癌癥。目前，T細胞的擴增可在袋狀系統，或不完全自動化且還未功能性封閉的系統中進行。
[0005]鑒于這些和其它考慮，進行了實施方式。但是，上面討論的相對具體的問題不限制本公開的實施方式的適用性。

技術實現思路

[0006]本公開提供了簡要描述，來以特定形式引入一些實施方式的各方面，這并不旨于確定關鍵或必要元素，也不旨于限制權利要求書的范圍。
[0007]實施方式涉及細胞擴增系統(CES)和使細胞擴增系統的生物反應器中的細胞生長的方法。實施方式提供了用于使生物反應器，如中空纖維生物反應器，中的細胞擴增的方法。實施方式可提供將細胞(例如T細胞)引入到中空纖維生物反應器中，其中所述中空纖維生物反應器包括多個中空纖維。實施方式可提供將第一多個細胞暴露于激活劑，以激活在所述中空纖維生物反應器中的細胞的擴增。在實施方式中，所述激活劑可以是細胞、經固定的抗原(例如固定在珠子上)或可溶性抗原。在將細胞暴露于所述激活劑之后，細胞可擴增，以生成第二經擴增的多個細胞。然后，可從生物反應器中移出所述第二經擴增的多個細胞。
[0008]其它實施方式提供了用于擴增細胞的細胞擴增系統。在實施方式中，所述系統包括中空纖維生物反應器，所述中空纖維生物反應器包括具有至少相對端部的第一流體流動路徑，其中所述第一流體流動路徑的第一相對端部與所述中空纖維生物反應器的第一端口流體相連，并且所述第一流體流動路徑的第二端部與所述中空纖維生物反應器的第二端口流體相連，其中所述第一流體流動路徑包括所述中空纖維生物反應器的毛細管內部。與所述第一流體流動路徑流體相連的流體輸入路徑可用于將多個細胞引入到所述第一流體流動路徑。實施方式可進一步包括用于使流體在所述第一流體流動路徑中循環的泵。
[0009]系統可包括用于執行指令的處理器，以便在所述處理器執行指令時，進行包括以下步驟的方法：將含第一多個細胞的第一流體引入到所述中空纖維生物反應器的毛細管內部中，所述第一多個細胞包含白細胞。所述處理器可進一步執行指令，該指令用于將所述第
一多個細胞暴露于毛細管內部中的第一激活劑，以激活所述中空纖維生物反應器中的細胞的擴增。所述處理器可執行指令，該指令用于將含培養基的第二流體引入到所述毛細管內部，以使所述第一多個細胞的至少一部分擴增，并且生成第二經擴增的多個細胞。所述處理器可執行指令，該指令用于從所述生物反應器移出所述第二經擴增的多個細胞。
附圖說明
[0010]參照下列附圖，描述了非限制性和非詳盡的實施方式。
[0011]圖1描繪了根據實施方式的中空纖維生物反應器的透視圖。
[0012]圖2示出了根據實施方式的具有預安裝的流體輸送裝置的細胞擴增系統的透視圖。
[0013]圖3描繪了根據實施方式的細胞擴增系統的殼體的透視圖。
[0014]圖4示出了根據實施方式的預安裝的流體輸送裝置的透視圖。
[0015]圖5描繪了根據實施方式的細胞擴增系統的簡圖。
[0016]圖6示出了細胞擴增系統的另一實施方式的簡圖。
[0017]圖7示出了根據實施方式的用于擴增細胞的程序的流程圖。
[0018]圖8示出了可用于實施實施方式的計算系統的組件。
[0019]圖9示出了根據實施方式，示出在培養期間的多個時間點處的總細胞計數的柱狀圖。
[0020]圖10示出了根據實施方式，示出在培養期間的多個時間處的細胞存活率的柱狀圖。
[0021]圖11示出了根據實施方式，示出對于經純化的和未經純化的初始細胞加載的樹突細胞計數的柱狀圖。
[0022]圖12示出了根據實施方式，示出在培養期間的多個時間點處(且使用多種初始細胞加載純度)的總細胞計數的柱狀圖。
[0023]圖13示出了根據實施方式，示出在培養期間的多個時間點處(且使用多種初始細胞加載純度)的細胞存活率的柱狀圖。
[0024]圖14示出了根據實施方式，示出細胞表型分布的柱狀圖。
[0025]圖15示出了根據實施方式，對比了多種細胞因子組合和遞送方法的柱狀圖。
[0026]圖16示出了根據實施方式，示出在不同循環速率和反應器移動的情況下的細胞存活率的柱狀圖。
[0027]圖17示出了根據實施方式，示出在以不同細胞因子組合進行培養期間的多個時間點處收獲的總細胞的柱狀圖。
[0028]圖18示出了根據實施方式，示出使用不同激活劑的細胞產量的柱狀圖。
[0029]圖19示出了根據實施方式，示出使用不同激活劑的細胞表型的柱狀圖。
[0030]圖20示出了根據實施方式，示出細胞因子產生的柱狀圖。
[0031]圖21示出了根據另一實施方式，示出細胞因子產生的柱狀圖。
具體實施方式
[0032]通過參考下面的詳細描述和在附圖中描繪的實施方式，可以進一步理解本公開的
原理。應理解，盡管下文相對于具體實施方式示出和描述了特定的特征，但本公開并不局限于下文描述的實施方式。
[0033]現在將詳細參考附圖示出的和下文描述的實施方式。在附圖和說明書中盡可能使用相同的附圖標記來表示相同或相似的部件。
[0034]參照圖1，示出了可用于本公開的中空纖維生物反應器100的實例的正面立視圖。中空纖維生物反應器100具有縱軸線LA
?
LA，且包括腔室殼體104。在至少一個實施方式中，腔室殼體104包括四個開口或端口：IC入口108、IC出口120、EC入口128和EC出口132。
[0035]根據本公開的實施方式，第一循環路徑中的流體通過位于中空纖維生物反應器100的第一縱向末端112的IC入口108進入中空纖維生物反應器100，進入且穿過多個中空纖維116的毛細管內側(在多個實施方式中被稱為中空纖維膜的毛細管內(“IC”)側或“IC空間”)，且通過位于中空纖維生物反應器100的第二縱向末端124的IC出口120流出中空纖維生物反應器100。IC入口108和IC出口120之間的流體路徑界定了中空纖維生物反應器100的IC部126。第二循環路徑中的流體通過EC入口128流入中空纖維生物反應器100，與中空纖維116的毛細管外側或外部(被稱為膜的“EC側”或“EC空間”)接觸，本文檔來自技高網...

【技術保護點】

【技術特征摘要】
1.一種擴增細胞的方法，所述方法包括：將含白細胞的第一多個細胞引入到中空纖維生物反應器中，其中，所述中空纖維生物反應器包括多個中空纖維；將所述第一多個細胞暴露于激活劑，以激活在所述中空纖維生物反應器中的細胞的擴增；使在所述生物反應器的多個中空纖維中的所述第一多個細胞的至少一部分擴增，以生成第二經擴增的多個細胞；以及從所述生物反應器中移出所述第二經擴增的多個細胞。2.根據權利要求1所述的方法，其中，所述第一多個細胞的一部分包含T細胞。3.根據權利要求2所述的方法，其中，使用白細胞去除術生成所述第一多個細胞。4.根據權利要求3所述的方法，其中，在沒有額外純化的情況下，將所述第一多個細胞添加到所述中空纖維生物反應器中。5.根據權利要求4所述的方法，其中，所述第一多個細胞包含紅細胞。6.根據權利要求5所述的方法，其中，所述第一多個細胞包含血小板。7.根據權利要求6所述的方法，其中，所述第一多個細胞包含粒細胞。8.根據權利要求7所述的方法，其中，所述暴露包括將所述第一多個細胞暴露于珠子，所述珠子在它們的表面上包含所述激活劑。9.根據權利要求7所述的方法，其中，所述暴露包括將所述第一多個細胞暴露于含所述激活劑的樹突細胞。10.根據權利要求9所述的方法，其中，所述激活劑包含一種或多種抗原。11.根據權利要求8所述的方法，其中，所述激活劑包含選自由抗CD2的抗體、抗CD3的抗體、抗CD28的抗體和它們的組合組成的組中的一種或多種抗體。12.根據權利要求1所述的方法，其中，在封閉的系統中進行各步驟。13.根據權利要求11所述的方法，其中，所述擴增包括使培養基在所述中空纖維生物反應器中循環。14.根據權利要求13所述的方法，其中，所述培養基包含白介素2(IL
?
2)、白介素4(IL
?
4)、白介素5(IL
?
5)、白介素7(IL
?
7)、白介素15(IL
?
15)和它們的組合中的一種或多種。15.一種用于擴增細胞的細胞...

【專利技術屬性】
技術研發人員：金姆，
申請(專利權)人：泰爾茂比司特公司，
類型：發明
國別省市：