一種細胞通用凍存液制造技術

本發明專利技術提供一種細胞通用凍存液，其成分主要包括人血清白蛋白、DMSO、甘油、復方電解質注射液、右旋糖苷。其中：人血清白蛋白的含量為40%，DMSO的含量為3%，甘油的含量為7%，復方電解質注射液的含量為20%，右旋糖苷的含量為30%。本發明專利技術通過結合各凍存成分的特點進行最優配比，顯著提高了細胞的存活率，并且避免了血清的使用，降低了污染源。降低了污染源。降低了污染源。

【技術實現步驟摘要】
一種細胞通用凍存液


[0001]本專利技術涉及細胞及生物工程學領域，具體涉及一種細胞通用凍存液。

技術介紹

[0002]細胞凍存時，如果細胞中不添加凍存保護成分，由于細胞內和外環境中的水會形成冰晶導致細胞發生機械損傷、電解質濃度升高等一系列變化，最終導致細胞的死亡。因此添加細胞凍存保護劑對于細胞的凍存是必須的，目前，實驗室通用的細胞保存手段是使用90%的新生胎牛血清加10%DMSO，其中血清成分由于批次不確定、成分不確定對細胞造成一定突發性結果，如細胞污染等，且一些細胞的凍存并不可以使用血清，如干細胞等一系列細胞，用血清凍存可能導致干細胞的分化。而DMSO對細胞具有一定的毒副作用。因此，專利技術一種細胞通用的且易制備的細胞凍存液顯得尤為重要。

技術實現思路

[0003]專利技術一種對所有細胞通用的、甚至是對動物精子有一定保護效果的、無血清、易制備的細胞凍存液。本專利技術提供一種細胞通用凍存液，其中：人血清白蛋白的含量為40%，DMSO的含量為3%，甘油的含量為7%，復方電解質注射液的含量為20%，右旋糖苷的含量為30%。
[0004]本專利技術的有益效果如下：以本專利技術提供的細胞通用凍存液,結合了各凍存成分的特點進行最優配比，顯著提高了細胞的存活率，并且避免了血清的使用，易制備、易保存、復蘇后的細胞活性極高且避免了血清存在的潛在危險。
附圖說明
[0005]圖1為實施例、對比例1
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4的細胞凍存一周后細胞復蘇活率數據結果圖；圖2為實施例、對比例1
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4的細胞凍存三個月后細胞復蘇活率數據結果圖；圖3為實施例、對比例1
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4的細胞凍存六個月后細胞復蘇活率數據結果圖；圖4位實施例、對比例1
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4的細胞凍存六個月后細胞復蘇培養三天后的細胞數量結果圖；
具體實施方式
[0006]為更好的說明本專利技術的目的、技術方案和優點，下面將結合具體實施例對本申請作進一步說明。
實施例
[0007]本實施例提供了提供一種細胞通用凍存液配方。以10mL為例：人血清白蛋白4mL，DMSO 0.3mL，甘油0.7mL，復方電解質2mL，右旋糖苷3mL。將上述物質混合形成無血清細胞凍存液。
[0008]對比例1本實施例還設置了對比例1、對比例2、對比例3、對比例4，對比例1、2、3、4均為實施例的變形，其中對比例1與實施例的區別在于凍存液配方中的DMSO含量從原先的、3%變為10%，甘油不添加，具體配方為：人血清白蛋白4mL，添加1 mL的DMSO，2mL的復方電解質注射液，3mL的右旋糖苷。將上述物質混合形成無血清細胞凍存液。
[0009]對比例2對比例2與實施例的區別在于凍存液配方中的甘油含量從原先的7%變為10%mL，DMSO不添加，具體配方為：人血清白蛋白4mL，添加1mL的甘油，2mL的復方電解質注射液，3mL的右旋糖苷。將上述物質混合形成無血清細胞凍存液。
[0010]對比例3對比例3與實施例的區別在于凍存液配方中的人血清白蛋白含量從原先的40%變為20%，復方電解質注射液含量從原先的20%變為40%，具體配方為：人血清白蛋白2mL，添加0.3mL的DMSO，添加0.7mL的甘油，4mL的復方電解質注射液，3mL的右旋糖苷。將上述物質混合形成無血清細胞凍存液。
[0011]對比例4對比例3與實施例的區別在于凍存液配方中的人血清白蛋白含量從原先的40%變為60%，復方電解質注射液含量從原先的20%變為10%，右旋糖苷含量從原先的30%變為20%，具體配方為：人血清白蛋白6mL，添加0.3mL的DMSO，添加0.7mL的甘油，1mL的復方電解質注射液，2mL的右旋糖苷。將上述物質混合形成無血清細胞凍存液。
[0012]使用五種不同的細胞凍存液凍存同一批間充質干細胞，每種凍存液凍存十支細胞，每支凍存5
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105細胞，在細胞凍存滿一周、三月、六月的時候分別各組取出三支細胞進行復蘇并統計細胞存活率進行匯總求平均值。在細胞凍存六個月后復蘇細胞對細胞進行三天的培養，分別統計各組細胞的細胞數量。
[0013]最后所應當說明的是，以上實施例僅用以說明本專利技術的技術方案而非對本專利技術保護范圍的限制，盡管參照較佳實施例對本專利技術作了詳細說明，本領域的普通技術人員應當理解，可以對本專利技術的技術方案進行修改或者等同替換，而不脫離本專利技術技術方案的實質和范圍。
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【技術保護點】

【技術特征摘要】
1.一種細胞通用凍存液，其特征在于：其成分主要包括人血清白蛋白、DMSO、甘油、復方電解質注射液、右旋糖苷。2.如權利要求1所述的一種細胞通用凍存液，其特征在于：人血清白蛋白的濃度范圍在20
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60%、DMSO的濃度范圍在5%
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10%；甘油的度范圍在0%
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10%；復方電解質注射液的度范圍在10
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50%，右旋糖苷的度范圍在10
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60%。3.權利要求1或2所述的一種細胞通用凍存液，其特征在于：人血清白蛋白、DMSO、甘油、復方電解質注射液、右旋糖苷的濃度比為(2
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6)∶(0.5

【專利技術屬性】
技術研發人員：賈正虎，武曉麗，駱靜，孟子愉，楊成茂，
申請(專利權)人：天津尤金生物科技有限公司，
類型：發明
國別省市：