腸道上皮細(xì)胞核受體抑制子NCoR作為靶標(biāo)在篩選藥物中的應(yīng)用制造技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及基因工程技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種防治胰島素抵抗和肥胖相關(guān)疾病的新靶標(biāo)腸道上皮細(xì)胞核受體抑制子NCoR的應(yīng)用，公開了腸道上皮細(xì)胞核受體抑制子NCoR作為靶標(biāo)在篩選藥物中的應(yīng)用。具體公開了一種以腸道上皮細(xì)胞核受體抑制子NCoR作為靶標(biāo)在篩選或制備預(yù)防、緩解或治療胰島素抵抗、肥胖及相關(guān)疾病的藥物或生物制劑中的應(yīng)用。以及一種腸道上皮細(xì)胞核受體抑制子NCoR在制備胰島素增敏或降脂小鼠模型中的應(yīng)用。胰島素增敏或降脂小鼠模型中的應(yīng)用。

【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
腸道上皮細(xì)胞核受體抑制子NCoR作為靶標(biāo)在篩選藥物中的應(yīng)用


[0001]本專利技術(shù)屬于醫(yī)藥
，涉及基因工程
，特別是涉及一種防治胰島素抵抗和肥胖相關(guān)疾病的新靶標(biāo)腸道上皮細(xì)胞核受體抑制子NCoR的應(yīng)用。

技術(shù)介紹

[0002]糖尿病及肥胖成為威脅我國城鄉(xiāng)居民健康的主要慢性病之一，在中國及全球的發(fā)病率逐年攀升，已成為主要的公共衛(wèi)生問題。糖尿病主要分為1型和2型糖尿病，1型糖尿病屬于自身免疫性疾病，主要原因是胰島beta細(xì)胞壞死，胰島素分泌絕對不足。2型糖尿病的發(fā)病機(jī)制和病理生理過程復(fù)雜，涉及多基因多器官異常，在發(fā)病過程中胰島素抵抗是其最重要的病生理缺陷，而肥胖及其相關(guān)的慢性炎癥則是導(dǎo)致胰島素抵抗的主要原因，近些年研究表明腸道菌群也是重要影響因素之一。
[0003]目前臨床上應(yīng)用的糖尿病治療藥物中明確可改善胰島素抵抗的只有胰島素增敏劑噻唑烷二酮(TZD)類化合物，但是TZD類藥物因增重和心血管風(fēng)險等副作用而被撤市或限制應(yīng)用
[3]，因此，實際上目前并沒有較好的胰島素增敏劑。因此，研究開發(fā)新的糖尿病治療靶點(diǎn)和藥物勢在必行，有著重要的社會價值。
[0004]核受體抑制子NCoR屬于核受體共抑制蛋白之一，核受體超家族包括過氧化物酶增殖體受體PPARα，PPARβ/δ，PPARγ，法尼醇X受體FXR和肝臟X受體LXR等，都參與了脂質(zhì)代謝和炎癥通路的調(diào)節(jié)，TZD的作用靶點(diǎn)即為PPARγ。在沒有配體結(jié)合的情況下，NCoR等共抑制蛋白結(jié)合在核受體上游啟動子區(qū)，抑制其活性；而當(dāng)配體與配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域LBD結(jié)合后，核受體與NCoR等解離，招募共激活蛋白來發(fā)揮其轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用。
[0005]NCoR在多組織廣泛表達(dá)，其全身性敲除可致死。針對不同組織NCoR條件性敲除的研究發(fā)現(xiàn)，雖然NCoR可與多種核受體相互作用，但在不同細(xì)胞，NCoR敲除后會特異性的活化某種核受體來調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄，其在不同細(xì)胞中功能并不相同。在脂肪組織
[5]，NCoR被敲除后通過活化PPARγ，可顯著減輕高脂喂養(yǎng)小鼠脂肪組織巨噬細(xì)胞浸潤和炎癥狀態(tài)，改善胰島素靶組織的胰島素抵抗；NCoR在巨噬細(xì)胞
[7]的條件性敲除則可解除對LXR的抑制，激活脂肪酸合成通路基因表達(dá)，增加抗炎脂肪酸的合成，抑制NF
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κB依賴的炎癥反應(yīng)，從而改善整體炎癥狀態(tài)，增加胰島素敏感性；而在肌肉組織
[11]，NCoR敲除后的主要作用則是PPARδ等的活化。因此我們認(rèn)為，NCoR在腸道上皮細(xì)胞被敲除后也會表現(xiàn)為某種特定核受體受到活化，并進(jìn)一步調(diào)節(jié)脂質(zhì)等營養(yǎng)物質(zhì)的吸收代謝、膽汁酸的代謝、腸促胰島素GLP
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1的分泌以及腸道菌群組成等，從而調(diào)節(jié)整體胰島素敏感性。
[0006]到目前為止，關(guān)于對腸道上皮細(xì)胞NCoR在肥胖、胰島素抵抗和糖尿病等發(fā)生發(fā)展中的作用未見報道，關(guān)于以腸道上皮細(xì)胞NCoR為靶點(diǎn)治療肥胖和糖尿病的藥物和生物制劑也未見報道。

技術(shù)實現(xiàn)思路

[0007]本專利技術(shù)解決的技術(shù)問題是提供了腸道上皮細(xì)胞核受體抑制子NCoR作為靶標(biāo)在篩選或制備預(yù)防、緩解或治療胰島素抵抗、肥胖及相關(guān)疾病的藥物或生物制劑中的應(yīng)用，從而為糖尿病和肥胖等的治療提供一種有效的解決辦法。
[0008]本專利技術(shù)解決的另一技術(shù)問題是提供一種腸道上皮細(xì)胞核受體抑制子NCoR在制備胰島素增敏或降脂小鼠模型中的應(yīng)用，具體在動物水平驗證通過敲除小鼠腸道上皮細(xì)胞NCoR的表達(dá)，能夠增加葡萄糖耐受和清除能力，減少脂質(zhì)吸收能力，促進(jìn)脂質(zhì)代謝和清除能力。
[0009]為此，本專利技術(shù)提供了如下技術(shù)方案：
[0010]本專利技術(shù)技術(shù)方案的第一方面是提供了一種以腸道上皮細(xì)胞核受體抑制子NCoR作為靶標(biāo)在篩選或制備預(yù)防、緩解或治療胰島素抵抗、肥胖及相關(guān)疾病的藥物或生物制劑中的應(yīng)用。
[0011]優(yōu)選的是，所述胰島素抵抗、肥胖及相關(guān)疾病為糖尿病、高胰島血癥、高血脂癥、高膽固醇血癥、肥胖及葡萄糖不耐性。
[0012]優(yōu)選的是，所述生物制劑或所述藥物用于抑制腸道上皮細(xì)胞核受體NCoR與核受體的相互作用，改變膽汁酸的含量和組成，減少腸道甘油三酯、膽固醇等脂質(zhì)的吸收，增加其排泄；促進(jìn)氧化代謝產(chǎn)熱和能量消耗；促進(jìn)腸促胰島素GLP
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1的分泌，調(diào)節(jié)胰島素分泌及糖脂代謝通路。所述生物制劑或所述藥物上述作用并不依賴于腸道菌群變化。。
[0013]本專利技術(shù)技術(shù)方案的第二方面是提供一種腸道上皮細(xì)胞核受體抑制子NCoR在制備胰島素增敏或降脂小鼠模型中的應(yīng)用。
[0014]優(yōu)選的是，所述抑制NCoR是，包括但不限于，通過Cre
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LoxP系統(tǒng)以基因重組方式敲除該基因，以獲得NCoR組織特異性敲除的胰島素增敏或降脂小鼠模型。
[0015]優(yōu)選的是，所述NCoR組織特異性敲除的胰島素增敏或降脂小鼠模型能夠增加葡萄糖耐受和清除能力，減少脂質(zhì)吸收能力，促進(jìn)脂質(zhì)代謝和清除能力。
[0016]優(yōu)選的是，所述的組織選自腸道上皮細(xì)胞。
[0017]有益技術(shù)效果：
[0018]本專利技術(shù)通過系統(tǒng)的研究發(fā)現(xiàn)：條件性敲除小鼠腸道上皮細(xì)胞NCoR基因，得到NCoR組織特異性敲除的小鼠，再進(jìn)行高脂飲食喂養(yǎng)后，可顯著逆轉(zhuǎn)小鼠肥胖及胰島素抵抗表型，降低體重，降低肝臟及腹腔脂肪重量，改善口服葡萄糖耐受性及胰島素敏感性，采用金標(biāo)準(zhǔn)高胰島素正常血糖鉗夾實驗評價后，進(jìn)一步精確證明了整體和肝臟、脂肪組織等靶器官的胰島素敏感性均得到了顯著改善。同時，條件性敲除小鼠腸道上皮細(xì)胞NCoR也可顯著改善肥胖小鼠的高胰島素血癥和肝臟脂質(zhì)堆積，改變膽汁酸的含量和組成，減少腸道脂質(zhì)吸收，并刺激活性胰高血糖素樣肽(GLP
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1)的分泌。采用代謝籠對小鼠的能量代謝的監(jiān)控表明條件性敲除小鼠腸道上皮細(xì)胞NCoR還可增加代謝率，如產(chǎn)熱及氧化代謝等，但并不增加小鼠的活動頻率。進(jìn)一步的，通過野生型小鼠與條件性腸道上皮細(xì)胞NCoR敲除小鼠共飼養(yǎng)的方法，證明條件性腸道上皮細(xì)胞NCoR敲除對表型的改善作用并不依賴腸道菌群介導(dǎo)。綜上所述，專利技術(shù)人首次發(fā)現(xiàn)，通過條件性敲除腸道上皮細(xì)胞NCoR，可以改善整體的胰島素敏感性并降低體重，說明其可以作為靶標(biāo)。通過抑制腸道上皮細(xì)胞NCoR來增加腸促胰島素激素GLP
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1的分泌，改變膽汁酸的含量和組成，抑制腸道脂質(zhì)吸收，增加能量代謝率等，從而改善脂質(zhì)
代謝，胰島素抵抗及肥胖，有助于改變臨床胰島素增敏劑缺乏的現(xiàn)狀，對2型糖尿病及肥胖的預(yù)防和治療都有著積極的意義。
[0019]本專利技術(shù)的其他優(yōu)點(diǎn)、目標(biāo)和特征將部分通過下面的說明體現(xiàn)，部分還將通過對本專利技術(shù)的研究和實踐而為本領(lǐng)域的技術(shù)人員所理解。
附圖說明
[0020]圖1為本專利技術(shù)條件性腸道上皮細(xì)胞NCoR敲除后對體重及組織重量的影響；A為高脂飲食喂養(yǎng)期間野生型小鼠(WT小鼠)和腸道上皮細(xì)胞NCoR敲除小鼠(IKO小鼠)的體重變化情況；B為高脂飲食喂養(yǎng)期間WT和IKO小鼠的每周平均攝食情況；C為高脂飲食喂養(yǎng)后WT和IKO小鼠的主要本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】

【技術(shù)特征摘要】
1.一種以腸道上皮細(xì)胞核受體抑制子NCoR作為靶標(biāo)在篩選或制備預(yù)防、緩解或治療胰島素抵抗、肥胖及相關(guān)疾病的藥物或生物制劑中的應(yīng)用。2.根據(jù)權(quán)利要求1的應(yīng)用，其特征在于，所述胰島素抵抗、肥胖及相關(guān)疾病為糖尿病、高胰島血癥、高血脂癥、高膽固醇血癥、肥胖及葡萄糖不耐性。3.根據(jù)權(quán)利要求1的應(yīng)用，其特征在于，所述生物制劑或所述藥物用于抑制腸道上皮細(xì)胞核受體NCoR與核受體的相互作用，改變膽汁酸的含量和組成，減少腸道甘油三酯、膽固醇等脂質(zhì)的吸收，增加其排泄；促進(jìn)氧化代謝產(chǎn)熱和能量消耗；促進(jìn)腸促胰島素GLP
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1的分泌，調(diào)節(jié)胰島素分泌及糖脂代謝通路；所述生物制劑或所述藥物上述作用...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：李平平，侯少聰，于恒彩，崔冰，柳星峰，姜茜，孔麗娟，馬春曉，趙其錦，
申請(專利權(quán))人：中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所，
類型：發(fā)明
國別省市：