抗VSIG4抗體或抗原結合片段及其用途制造技術

公開了新型抗VSIG4(含V

【技術實現步驟摘要】
【國外來華專利技術】抗VSIG4抗體或抗原結合片段及其用途


[0001]本專利技術涉及抗VSIG4(含V
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set Ig結構域蛋白4，V
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set Ig domain
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containing 4)抗體或抗原結合片段及其用途。

技術介紹

[0002]癌細胞的免疫逃避機制是通過與存在于T細胞表面的免疫檢查點蛋白結合后使具有殺傷活性的細胞毒性T細胞失活來實現的。這提供了免疫檢查點抑制劑的理論背景，免疫檢查點抑制劑可以通過將免疫檢查點作為靶標來恢復T細胞的功能、增強T細胞的活化，從而殺死病毒感染的細胞或癌細胞。
[0003]2010年食品藥品監督管理局首次批準了免疫檢查點抑制劑作為第三代抗癌免疫治療劑，并且從黑色素瘤的臨床治療開始，不斷發表了一系列研究成果，顯示了在肺癌、肝癌等抗癌治療中的非凡療效。近10年來，免疫檢查點抑制劑已成為全世界的重要話題。由于抗癌免疫治療劑是為了使T細胞攻擊癌細胞而生產的抗體，因此報道的研究結果顯示，即使在與常規抗癌劑的聯合治療中也展示出非凡效果。迄今為止，已知多種免疫檢查點蛋白，包括CTLA
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4(細胞毒性T淋巴細胞相關蛋白4，cytotoxic T
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lymphocyte
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associated protein 4)、PD
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1(程序性細胞死亡蛋白1，programmed cell death protein 1)、TIM
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3(含T細胞免疫球蛋白和粘蛋白結構域蛋白3，T cell immunoglobulin and mucin
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domain containing
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3)、LAG
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3(淋巴細胞活化基因3，lymphocyte activation gene 3)、TIGIT(具有免疫球蛋白和免疫受體酪氨酸基抑制基序結構域的T細胞免疫受體，T cell immunoreceptor with immunoglobulin and immunoreceptor tyrosine
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based inhibitory motif domains)和VISTA(含V結構域Ig的T細胞活化抑制因子，v
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domain Ig
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containing suppressor of T cell activation)。
[0004]含V
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set Ig結構域蛋白4(VSIG4、CRIg或Z39Ig)是近年來正在研究的免疫檢查點蛋白，它是B7相關家族蛋白。已知VSIG4在肝臟、樹突狀細胞、中性粒細胞和靜息巨噬細胞中高水平表達，但在其他器官包括肺、心臟、脾臟和淋巴結中低水平表達，而在T細胞和B細胞中不表達。VSIG4和B7家族蛋白共享保守的氨基酸序列，VSIG4具有一個完整的IgV型結構域和一個切割的IgC型結構域(Vogt L.等人,J Clin Invest.(2006)116:2817
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2826；Helmy KY.等人,Cell(2006)124:915
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927)。已知VSIG4通過結合轉化酶的亞基C3b來抑制補體活性的替代補體途徑。此外，據報道，根據與未知T細胞受體的結合，VSIG4可以抑制CD4+和CD8+T細胞的增殖。已研究了VSIG4與自身免疫和/或炎性疾病發生的關系，表明了可溶性VSIG4
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Fc融合蛋白看來可以防止實驗性自身免疫性關節炎、葡萄膜炎和肝炎的發生(He等人,Mol.Immunol.(2008)Molecular Immunology 45(16):4041
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4047)。但最近也有報道稱，VSIG4的表達與抗腫瘤免疫的調節如肺癌的發生和高級別膠質瘤的預后不良等有關(Liao Y.等人,Lab Invest.(2014)94:706
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715；Xu T.等人,Am J Transl Res.(2015)7:1172
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1180)。此外，根據Jung等人的研究(Hepatology(2012)56(5):1838
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48)，在抗炎和T細胞抑制之間VSIG4的結合位點存在差異。
[0005]先前已經描述了針對VSIG4的抗體(參見例如WO 2020/069507)。然而，這些抗體僅結合該蛋白質的兩種形式中的一種，從而僅介導其活性的部分抑制。
[0006]因此，仍然需要提供可以建立最佳抗腫瘤免疫的新型抗VSIG4抗體。

技術實現思路

[0007]目的
[0008]本公開的目的是提供一種針對VSIG4的新型抗體或其抗原結合片段。
[0009]本公開的另一個目的則是提供一種用于治療癌癥的包含上述抗體或抗原結合片段的組合物。
[0010]實現上述目的的技術方法
[0011]為了實現上述目的，本專利技術提供了一種特異性結合VSIG4的單克隆抗體或其抗原結合片段。本文公開的抗體結合VSIG4的長形式和短形式，導致有效抑制VSIG4介導的抗炎信號。因此，本文公開的抗VSIG4抗體激活有需要的患者的免疫應答，從而賦予患者保護性抗腫瘤免疫力。
[0012]本公開特別提供了具有三個重鏈CDR和三個輕鏈CDR的抗VSIG4單克隆抗體或其抗原結合片段，其中CDR的序列選自SEQ ID NO.3
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58中列出的序列。更具體地，本文公開的抗體包含如表2中所列的三個重鏈CDR和三個輕鏈CDR。
[0013]本公開進一步提供了抗VSIG4單克隆抗體或其抗原結合片段，其包含選自以下氨基酸序列的任一重鏈可變區：SEQ ID NO:129、131、133、135、137、139、141、143、145、147和149；和選自以下氨基酸序列的任一輕鏈可變區：SEQ ID NO:130、132、134、136、138、140、142、144、146、148和150，和單克隆抗體的抗原結合片段。
[0014]此外，本專利技術進一步提供了編碼單克隆抗體或其抗原結合片段的重鏈可變區和輕鏈可變區的多核苷酸。
[0015]此外，本專利技術進一步提供了包含所述多核苷酸的表達載體。
[0016]此外，本專利技術進一步提供了用所述表達載體轉化的轉化體。
[0017]此外，本專利技術進一步提供了通過培養所述轉化體來制備特異性結合VSIG4的單克隆抗體或其抗原結合片段的方法。
[0018]此外，本專利技術進一步提供了用于刺激免疫應答的組合物，其包含特異性結合VSIG4的單克隆抗體或其抗原結合片段作為有效成分。
[0019]此外，本專利技術進一步提供了用于治療癌癥的藥物組合物，其包含特異性結合VSIG4的單克隆抗體或其抗原結合片段作為有效成分。
[0020]此外，本專利技術進一步提供了治療癌癥的方法，其包括將所述用于治療癌癥的藥物組合物施用于個體。
[0021]此外，本文檔來自技高網...

【技術保護點】

【技術特征摘要】
【國外來華專利技術】1.一種單克隆抗
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VSIG4抗體或其抗原結合片段，所述抗體選自：a)包含序列SEQ ID No.3、4和5的三個重鏈CDR和序列SEQ ID No.6、7和8的三個輕鏈CDR的抗體；b)包含序列SEQ ID No.9、10和5的三個重鏈CDR和序列SEQ ID No.6、7和8的三個輕鏈CDR的抗體；c)包含序列SEQ ID No.11、12和13的三個重鏈CDR和序列SEQ ID No.14、15和16的三個輕鏈CDR的抗體；d)包含序列SEQ ID No.17、18和19的三個重鏈CDR和序列SEQ ID No.20、21和22的三個輕鏈CDR的抗體；e)包含序列SEQ ID No.23、24和3的三個重鏈CDR和序列SEQ ID No.6、7和25的三個輕鏈CDR的抗體；f)包含序列SEQ ID No.26、27和28的三個重鏈CDR和序列SEQ ID No.29、30和31的三個輕鏈CDR的抗體；g)包含序列SEQ ID No.32、33和34的三個重鏈CDR和序列SEQ ID No.35、36和16的三個輕鏈CDR的抗體；h)包含序列SEQ ID No.37、38和39的三個重鏈CDR和序列SEQ ID No.40、41和42的三個輕鏈CDR的抗體；i)包含序列SEQ ID No.43、44和45的三個重鏈CDR和序列SEQ ID No.46、47和48的三個輕鏈CDR的抗體；j)包含序列SEQ ID No.49、50和51的三個重鏈CDR和序列SEQ ID No.52、53和54的三個輕鏈CDR的抗體；k)包含序列SEQ ID No.17、18和55的三個重鏈CDR和序列SEQ ID No.56、57和58的三個輕鏈CDR的抗體。2.根據權利要求1所述的單克隆抗VSIG4抗體或其抗原結合片段，其中所述抗體選自單鏈抗體、駱駝化抗體、嵌合抗體、人源化抗體和人抗體。3.根據權利要求1或2中任一項所述的單克隆抗VSIG4抗體或其抗原結合片段，其中所述抗體是人抗體。4.根據權利要求1至3中任一項所述的單克隆抗VSIG4抗體或其抗原結合片段，其中所述抗體選自IgA1抗體、IgA2抗體、IgD抗體、IgE抗體、IgG1抗體、IgG2抗體、IgG3抗體、IgG4抗體和IgM抗體。5.根據權利要求1至3中任一項所述的單克隆抗VSIG4抗體或其抗原結合片段，其中所述抗原結合片段選自Fab、Fab'、(Fab')2、Fv、scFv(sc表示單鏈)、Bis
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scFv、scFv
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Fc片段、Fab2、Fab3、微型抗體、雙抗體、三抗體、四抗體和納米抗體。6.根據權利要求1至5中任一項所述的單克隆抗VSIG4抗體或其抗原結合片段，其中所述抗原結合片段是scFv。7.根據權利要求1至6中任一項所述的單克隆抗VSIG4抗體或其抗原結合片段，其中所述抗體選自：a)包含序列SEQ ID No.129或與SEQ ID No.129顯示出至少80％同一性的任何序列的重鏈可變結構域、和序列SEQ ID No.6、7和8的三個輕鏈CDR的抗體；
b)包含序列SEQ ID No.131或與SEQ ID No.131顯示出至少80％、85％、90％、95％或98％同一性的任何序列的重鏈可變結構域、和序列SEQ ID No.6、7和8的三個輕鏈CDR的抗體，或由其組成的抗體；c)包含序列SEQ ID No.133或與SEQ ID No.133顯示出至少80％、85％、90％、95％或98％同一性的任何序列的重鏈可變結構域、和序列SEQ ID No.14、15和16的三個輕鏈CDR的抗體，或由其組成的抗體；d)包含序列SEQ ID No.135或與SEQ ID No.135顯示出至少80％、85％、90％、95％或98％同一性的任何序列的重鏈可變結構域、和序列SEQ ID No.20、21和22的三個輕鏈CDR的抗體，或由其組成的抗體；e)包含序列SEQ ID No.137或與SEQ ID No.137顯示出至少80％、85％、90％、95％或98％同一性的任何序列的重鏈可變結構域、和序列SEQ ID No.6、7和25的三個輕鏈CDR的抗體，或由其組成的抗體；f)包含序列SEQ ID No.139或與SEQ ID No.139顯示出至少80％、85％、90％、95％或98％同一性的任何序列的重鏈可變結構域、和序列SEQ ID No.29、30和31的三個輕鏈CDR的抗體，或由其組成的抗體；g)包含序列SEQ ID No.141或與SEQ ID No.141顯示出至少80％、85％、90％、95％或98％同一性的任何序列的重鏈可變結構域、和序列SEQ ID No.35、36和16的三個輕鏈CDR的抗體，或由其組成的抗體；h)包含序列SEQ ID No.143或與SEQ ID No.143顯示出至少80％、85％、90％、95％或98％同一性的任何序列的重鏈可變結構域、和序列SEQ ID No.40、41和42的三個輕鏈CDR的抗體，或由其組成的抗體；i)包含序列SEQ ID No.145或與SEQ ID No.145顯示出至少80％、85％、90％、95％或98％同一性的任何序列的重鏈可變結構域、和序列SEQ ID No.46、47和48的三個輕鏈CDR的抗體，或由其組成的抗體；j)包含序列SEQ ID No.147或與SEQ ID No.147顯示出至少80％、85％、90％、95％或98％同一性的任何序列的重鏈可變結構域、和序列SEQ ID No.52、53和54的三個輕鏈CDR的抗體，或由其組成的抗體；k)包含序列SEQ ID No.149或與SEQ ID No.149顯示出至少80％、85％、90％、95％或98％同一性的任何序列的重鏈可變結構域、和序列SEQ ID No.56、57和58的三個輕鏈CDR的抗體，或由其組成的抗體。8.根據權利要求1至6中任一項所述的單克隆抗VSIG4抗體或其抗原結合片段，所述抗體選自：a)包含序列SEQ ID No.130或與SEQ ID No.130顯示出至少80％、85％、90％、95％或98％同一性的任何序列的輕鏈可變結構域、和序列SEQ ID No.3、4和5的三個重鏈CDR的抗體；b)包含序列SEQ ID No.132或與SEQ ID No.132顯示出至少80％、85％、90％、95％或98％同一性的任何序列的輕鏈可變結構域、和序列SEQ ID No.9、10和5的三個重鏈CDR的抗體；c)包含序列SEQ ID No.134或與SEQ ID No.134顯示出至少80％、85％、90％、95％或
98％同一性的任何序列的輕鏈可變結構域、和序列SEQ ID No.11、12和13的三個重鏈CDR的抗體；d)包含序列SEQ ID No.136或與SEQ ID No.136顯示出至少80％、85％、90％、95％或98％同一性的任何序列的輕鏈可變結構域、和序列SEQ ID No.17、18和19的三個重鏈CDR的抗體；e)包含序列SEQ ID No.138或與SEQ ID No.138顯示出至少80％、85％、90％、95％或98％同一性的任何序列的輕鏈可變結構域、和序列SEQ ID No.23、24和3的三個重鏈CDR的抗體；f)包含序列SEQ ID No.140或與SEQ ID No.140顯示出至少80％、85％、90％、95％或98％同一性的任何序列的輕鏈可變結構域、和序列SEQ ID No.26、27和28的三個重鏈CDR的抗體；g)包含序列SEQ ID No.142或與SEQ ID No.142顯示出至少80％、85％、90％、95％或98％同一性的任何序列的輕鏈可變結構域、和序列SEQ ID No.32、33和34的三個重鏈CDR的抗體；h)包含序列SEQ ID No.144或與SEQ ID No.144顯示出至少80％、85％、90％、95％或98％同一性的任何序列的輕鏈可變結構域、和序列SEQ ID No.37、38和39的三個重鏈CDR的抗體；i)包含序列SEQ ID No.146或與SEQ ID No.146顯示出至少80％、85％、90％、95％或98％同一性的任何序列的輕鏈可變結構域、和序列SEQ ID No.43、44和45的三個重鏈CDR的抗體；j)包含序列SEQ ID No.148或與SEQ ID No.148顯示出至少80％、85％、90％、95％或98％同一性的任何序列的輕鏈可變結構域、和序列SEQ ID No.49、50和51的三個重鏈CDR的抗體；k)包含序列SEQ ID No.150或與SEQ ID No.150顯示出至少80％、85％、90％、95％或98％同一性的任何序列的輕鏈可變結構域、和序列SEQ ID No.17、18和55的三個重鏈CDR的抗體。9.根據權利要求1至8中任一項所述的單克隆抗VSIG4抗體或其抗原結合片段，所述抗體選自：a)包含序列SEQ ID No.129或與SEQ ID No.129顯示出至少80％、85％、90％、95％或98％同一性的任何序列的重鏈可變結構域、和序列SEQ ID No.130或與SEQ ID No.130顯示出至少80％、85％、90％、95％或98％同一性的任何序列的輕鏈可變結構域的抗體；b)包含序列SEQ ID No.131或與SEQ ID No.131顯示出至少80％、85％、90％、95％或98％同一性的任何序列的重鏈可變結構域、和序列SEQ ID No.132或與SEQ ID No.132顯示出至少80％、85％、90％、95％或98％同一性的任何序列的輕鏈可變結構域的抗體；c)包含序列SEQ ID No.133或與SEQ ID No.133顯示出至少80％、85％、90％、95％或9...

【專利技術屬性】
技術研發人員：N，
申請(專利權)人：皮埃爾法布雷醫藥公司，
類型：發明
國別省市：