SARS-CoV-2抗原檢測試劑盒制造技術

本發明專利技術公開了SARS

Sars-cov-2 antigen detection kit

【技術實現步驟摘要】
SARS
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CoV
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2抗原檢測試劑盒


[0001]本專利技術涉及新型冠狀病毒檢測
，更具體的說是涉及SARS
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CoV
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2抗原檢測試劑盒。

技術介紹

[0002]冠狀病毒是自然界廣泛存在的一個大型病毒家族，因其形態在電鏡下觀察似王冠而得名，主要引起呼吸系統疾病。冠狀病毒屬于單股正鏈RNA病毒，其遺傳物質是所有RNA病毒中最大的，分為α、β、γ和δ四個屬。2019新型冠狀病毒(SARS
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CoV
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2)是一類呈球形、表面有突起、電鏡下觀察形似皇冠的病毒，病毒基因為連續線性單鏈RNA，直徑在75
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160nm。SARS
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CoV
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2是目前發現的可以感染人類的冠狀病毒科中的第七個成員。其他6個成員分別為：HCoV 229E、HCoV NL63、HCoV OC43、HCoV HKU1、SARS
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CoV和MERS
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CoV。
[0003]SARS
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CoV
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2感染人的潛伏期1
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14天，多為3
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7天。病毒主要經呼吸道飛沫和密切接觸傳播；患者出現發熱、乏力和干咳，并逐漸出現呼吸困難等嚴重癥狀。因此，如何提供一種檢測速度快、操作簡單方便、檢測結果準確、穩定，且可以對抗原進行檢測的試劑盒是本領域技術人員亟需解決的問題。

技術實現思路
<br/>[0004]有鑒于此，本專利技術提供了SARS
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CoV
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2抗原檢測試劑盒，該試劑盒可以直接對鼻腔、鼻咽、口咽的抗原進行檢測，檢測時間短，方便，快捷。
[0005]一種SARS
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CoV
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2抗原檢測試劑盒，包括底板和設置在底板上的樣品墊、膠體金結合墊、硝酸纖維素膜和吸水墊，膠體金結合墊和吸水墊分別錯位搭接于硝酸纖維素膜的兩側，樣品墊與膠體金結合墊錯位搭接；硝酸纖維素膜上平行設置有質控區和檢測區，且質控區靠近吸水墊；膠體金結合墊包被膠體金標記新型冠狀病毒單克隆抗體I和膠體金標記的鼠IgG抗體；檢測區上包被新型冠狀病毒單克隆抗體II；質控區上包被抗鼠IgG抗體。
[0006]作為本專利技術優選的技術方案，所述樣品墊和所述吸水墊均為吸水紙。
[0007]作為本專利技術優選的技術方案，所述試劑盒中還包括獨立設置的提取管、干燥劑和樣品稀釋液。
[0008]作為本專利技術優選的技術方案，所述樣品稀釋液為0.01
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0.015M的PBS緩沖液，pH7.4
±
0.2。
[0009]經由上述的技術方案可知，與現有技術相比，本專利技術提供了一種SARS
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CoV
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2抗原檢測試劑盒，以膠體金免疫層析法來檢測SARS
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CoV
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2核殼抗原(N
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抗原)的定性檢測產品。當含有SARS
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CoV
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2的N
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抗原的陽性樣本被引入測試盒的孔中時，N
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抗原與相應抗原的膠體金標記的新型冠狀病毒單克隆抗體I結合。這種復合物在毛細血管效應的作用下沿著膜條遷移，并與固定在測試區域的單克隆抗體II結合，在那里形成一條紫紅色的線。其使用方便，準確度高、特異型好、檢測穩定性和儲存穩定性強，抗干擾性強，可檢測鼻腔、鼻咽、口咽樣品，適于推廣使用。
附圖說明
[0010]為了更清楚地說明本專利技術實施例或現有技術中的技術方案，下面將對實施例中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅是本專利技術的實施例，對于本領域普通技術人員來講，在不付出創造性勞動的前提下，還可以根據提供的附圖獲得其他的附圖。
[0011]圖1附圖為一次性檢測試劑卡示意圖；其中，T
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檢測線；C
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質控線；S
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加樣孔。
具體實施方式
[0012]下面將結合本專利技術實施例中的附圖，對本專利技術實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本專利技術一部分實施例，而不是全部的實施例。基于本專利技術中的實施例，本領域普通技術人員在沒有做出創造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本專利技術保護的范圍。
[0013]實施例中通過使用RT
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PCR確診的新型冠狀病毒肺炎患者身上采集的回顧性臨床標本對新型冠狀病毒的檢測進行臨床研究。
[0014]實施例1SARS
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CoV
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2抗原檢測試劑盒，包括一次性檢測試劑卡，提取管，干燥劑和樣品稀釋液。
[0015]一次性檢測試劑卡包括底板和設置在底板上的樣品墊、膠體金結合墊、硝酸纖維素膜和吸水墊，膠體金結合墊和吸水墊分別錯位搭接于硝酸纖維素膜的兩側，樣品墊與膠體金結合墊錯位搭接；硝酸纖維素膜上平行設置有質控區和檢測區，且質控區靠近吸水墊；膠體金結合墊包被膠體金標記新型冠狀病毒單克隆抗體I和膠體金標記的鼠IgG抗體；檢測區上包被新型冠狀病毒單克隆抗體II；質控區上包被抗鼠IgG抗體。
[0016]一次性檢測試劑卡，提取管和干燥劑封裝于鋁箔袋中。
[0017]樣品稀釋液為0.01M的PBS緩沖液，pH7.4
±
0.2。
[0018]其中，一次性檢測試劑卡的制備包括以下步驟：（1）制備膠體金標記新型冠狀病毒單克隆抗體I1）制備膠體金溶液：取質量分數0.2%氯金酸水溶液，加熱至95℃，迅速加入質量分數為1.5%的檸檬酸三鈉水溶液，不斷攪拌直至溶液變為酒紅色，獲得的20
?
40nm粒徑20~40nm的膠體金溶液，4℃保存備用；2）使用0.12 mM的PB緩沖液將新型冠狀病毒單克隆抗體I和鼠IgG抗體稀釋至0.5mg/mL，得到兩種蛋白溶液；調節膠體金溶液pH至9.0，將兩種蛋白溶液分別添加到10mL膠體金溶液中，使新型冠狀病毒單克隆抗體I和鼠IgG抗體濃度為20
μ
g/mL；靜置5min后加入1mL質量分數為10%的BSA溶液，攪拌20min，離心；3）離心后收集沉淀，使用含BSA的三羥甲基氨基甲烷溶液溶解，離心后取沉淀，使用含疊氮化鈉、蔗糖、BSA的三羥甲基氨基甲烷溶液溶解，獲得膠體金標記的新型冠狀病毒單克隆抗體I和膠體金標記的鼠IgG抗體。
[0019]含BSA的三羥甲基氨基甲烷溶液中BSA質量分數為1%，三羥甲基氨基甲烷濃度為
0.015mol/L，pH為8.0；含疊氮化鈉、蔗糖、BSA的三羥甲基氨基甲烷溶液中BSA質量分數為1.2%，疊氮化鈉質量分數為0.01%，蔗糖質量分數為1%，三羥甲基氨基甲烷濃度為0.015mol/L，pH為8.0。
[0020]使用噴膜儀將膠體金標記的新型冠狀病毒單克隆抗體I和膠本文檔來自技高網...

【技術保護點】

【技術特征摘要】
1.SARS
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CoV
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2抗原檢測試劑盒，包括底板和設置在底板上的樣品墊、膠體金結合墊、硝酸纖維素膜和吸水墊，膠體金結合墊和吸水墊分別錯位搭接于硝酸纖維素膜的兩側，樣品墊與膠體金結合墊錯位搭接；硝酸纖維素膜上平行設置有質控區和檢測區，且質控區靠近吸水墊；其特征在于，膠體金結合墊包被膠體金標記新型冠狀病毒單克隆抗體I和膠體金標記的鼠IgG抗體；檢測區上包被新型冠狀病毒單克隆抗體II；質控區上包被抗鼠IgG抗體。2.根據權利要求1所述的SARS
?
CoV

【專利技術屬性】
技術研發人員：張伯清，賈正虎，祝佳杏，
申請(專利權)人：天津貝羅尼生物科技有限公司，
類型：發明
國別省市：