通過肺部遞送減毒活分枝桿菌的治療效果制造技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)涉及一種用于治療有需要的人類對(duì)象的減毒活結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis)組合物，所述組合物包含屬于結(jié)核分枝桿菌MTBVAC菌株的分離的微生物，所述分離的微生物具有：i)通過使Rv0757基因遺傳缺失而失活的PhoP

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
【國(guó)外來華專利技術(shù)】通過肺部遞送減毒活分枝桿菌的治療效果


[0001]本專利技術(shù)涉及藥物組合物，例如疫苗，以及制備和使用這種組合物的方法。

技術(shù)介紹

[0002]據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)稱，哮喘已達(dá)到流行病水平，全世界有超過2億哮喘患者。盡管在發(fā)達(dá)國(guó)家中尤其流行，但在低收入和中等收入情況下發(fā)病率也在迅速增加。在過去的幾十年里，關(guān)于哮喘增加最被接受的解釋之一是所謂的“衛(wèi)生假說”，其提示這種急劇增加背后的原因之一是兒童對(duì)確定的環(huán)境因素的暴露程度較低的結(jié)果(Strachan DP.Hay fever,hygiene,and household size.BMJ 1989；299:1259
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60.)。就這一點(diǎn)而言，在生命早期階段暴露于某些微生物和螨蟲(如農(nóng)場(chǎng)中存在的那些)似乎教化(educate)了免疫系統(tǒng)，從而獲得對(duì)過敏原的更高耐受性(Stein MM,Hrusch CL,Gozdz J,Igartua C,Pivniouk V,Murray SE,et al.Innate Immunity and Asthma Risk in Amish and Hutterite Farm Children.N Engl J Med 2016；375:411
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21.)。
[0003]哮喘是一種以慢性氣道炎癥和氣道重塑為特征的異質(zhì)性疾病。盡管哮喘可能與不同類型的炎癥反應(yīng)有關(guān)，但2型炎癥存在于超過80％的兒童哮喘病例中。大多數(shù)患者中存在具有Th2譜的T輔助(Th)淋巴細(xì)胞，其產(chǎn)生細(xì)胞因子如IL
?/>4、IL
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5或IL
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13，這些細(xì)胞因子是一些特征性臨床癥狀的原因。IL
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5在嗜酸性粒細(xì)胞的存活和募集中發(fā)揮著核心作用，嗜酸性粒細(xì)胞是哮喘的主要參與者之一，其在唾液中的存在代表了用于診斷該疾病的最被接受的生物標(biāo)志物之一。此外，IL
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4和IL
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13通過誘導(dǎo)氣道上皮細(xì)胞增殖以及加劇粘液產(chǎn)生來觸發(fā)氣道重塑(Holgate ST,Wenzel S,Postma DS,Weiss ST,Renz H,Sly PD.Asthma.Nat Rev Dis Primers2015；1:15025.)。
[0004]除了適應(yīng)性反應(yīng)，在過去幾年中，不同的研究已經(jīng)證明肺固有群體對(duì)哮喘觸發(fā)的至關(guān)重要性。事實(shí)上，通過來自抗原呈遞細(xì)胞(APC)的MHC
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II分子呈遞過敏原對(duì)于誘導(dǎo)過敏原特異性T細(xì)胞至關(guān)重要(Holgate ST.Innate and adaptive immune responses in asthma.Nat Med2012；18:673
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83.)。哮喘與病理性巨噬細(xì)胞朝向M2表型的極化有關(guān)(Girodet PO,Nguyen D,Mancini JD,Hundal M,Zhou X,Israel E,et al.Alternative Macrophage Activation Is Increased in Asthma.Am J Respir Cell Mol Biol 2016；55:467
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75)。M2型巨噬細(xì)胞，或可選地激活的M2型巨噬細(xì)胞，采用調(diào)節(jié)技能，并觸發(fā)損害Th1反應(yīng)且有利于Th2細(xì)胞擴(kuò)增的免疫調(diào)節(jié)環(huán)境(Mills CD,Kincaid K,Alt JM,Heilman MJ,Hill AM.M
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1/M
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2macrophages and the Th1/Th2 paradigm.J Immunol 2000；164:6166
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73.)。因此，已在動(dòng)物哮喘模型以及來自患者的樣本中發(fā)現(xiàn)M2巨噬細(xì)胞水平升高。靶向M2巨噬細(xì)胞的療法已顯示出減輕了過敏反應(yīng)(Moreira AP,Cavassani KA,Hullinger R,Rosada RS,Fong DJ,Murray L,et al.Serum amyloid P attenuates M2macrophage activation and protects against fungal spore
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induced allergic airway disease.J Allergy Clin Immunol 2010；126:712
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21e7.)。
[0005]當(dāng)前的結(jié)核病疫苗BCG是歷史上使用最多的疫苗。由于BCG一直被認(rèn)為是促進(jìn)Th1
反應(yīng)的疫苗，因此多年來一直在討論皮內(nèi)BCG疫苗接種對(duì)哮喘的益處。關(guān)于這個(gè)問題的結(jié)論仍然存在爭(zhēng)議，不同的流行病學(xué)研究顯示了相反的結(jié)果。
[0006]已在不同的動(dòng)物模型中普遍證明BCG活疫苗和滅活疫苗以及不同的分枝桿菌成分對(duì)哮喘有效(Erb KJ,Holloway JW,Sobeck A,Moll H,Le Gros G.Infection of mice with Mycobacterium bovis
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Bacillus Calmette
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Guerin(BCG)suppresses allergen
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induced airway eosinophilia.J Exp Med 1998；187:561
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9.Lagranderie M,Abolhassani M,Vanoirbeek J,Lefort J,Nahori MA,Lapa ESJR,et al.M.bovis BCG killed by extended freeze
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drying reduces airway hyperresponsiveness in 2animal models.J Allergy Clin Immunol 2008；121:471
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8.Tsujimura Y,Inada H,Yoneda M,Fujita T,Matsuo K,Yasutomi Y.Effects of mycobacteria major secretion protein,Ag85B,on allergic inflammation in the lung.PLoS One 2014；9:e106807)。然而，這些結(jié)果中的大多數(shù)是在過敏原致敏之前或與過敏原致敏同時(shí)遞送BCG而獲得的。因此，BCG逆轉(zhuǎn)已建立的哮喘的能力尚未得到解決，這對(duì)于闡明這種疫苗作為哮喘治療的治療潛力至關(guān)重要。此外，以前的研究主要集中在Th1/Th2反應(yīng)平衡，而沒有關(guān)注與哮喘有關(guān)的免疫系統(tǒng)的其他分支，例如肺泡巨噬細(xì)胞，它們似乎在哮喘發(fā)展過程中起主要作用。
[0007]MTBVAC是一種基于結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis)減毒的活疫苗(Arbues A,Aguilo JI,Gonzalo
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Asensio J,Marinova D,Uranga S,Pu本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】

【技術(shù)特征摘要】
【國(guó)外來華專利技術(shù)】1.一種用于治療有需要的人類對(duì)象的減毒活結(jié)核分枝桿菌(M.tuberculosis)組合物，所述組合物包含屬于結(jié)核分枝桿菌MTBVAC菌株的分離的微生物，所述分離的微生物具有：i)通過使Rv0757基因遺傳缺失而失活的PhoP
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表型，其中PhoP的開放閱讀框(ORF)序列由SEQ ID NO 4組成；和ii)防止PDIM產(chǎn)生的第二基因Rv2930(fadD26)缺失(PDIM
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表型)，其中fadD26的開放閱讀框(ORF)序列由SEQ ID NO 2組成，其中，所述組合物通過使用氣溶膠技術(shù)的吸入方法施用于所述對(duì)象。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述用途的減毒活結(jié)核分枝桿菌組合物，其中，所述組合物是可選地還包含特定的穩(wěn)定劑、填充劑或緩沖劑的凍干組合物。3.根據(jù)權(quán)利要求1至2中任一項(xiàng)所述用途的減毒活結(jié)核分枝桿菌組合物，其中，所述組合物用作主要預(yù)防劑用于具有感染結(jié)核分枝桿菌的風(fēng)險(xiǎn)或具有發(fā)展為結(jié)核病的風(fēng)險(xiǎn)的對(duì)象，或用作治療感染患者的輔助劑。4.根據(jù)權(quán)利要求1至2中任一項(xiàng)所述用途的減毒活結(jié)核分枝桿菌組合物，其中，所述組合物用作靶向M2巨噬細(xì)胞以減輕過敏反應(yīng)的預(yù)防劑。5.根據(jù)權(quán)利要求1至2中任一項(xiàng)所述用途的減毒活結(jié)核分枝桿菌組合物，其中，所述組合物用作預(yù)防劑用于具有遭受過敏性哮喘的風(fēng)險(xiǎn)...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：胡安，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：薩拉戈薩大學(xué)，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：