本發明專利技術公開了一種胃靶向載藥外泌體及應用和治療胃部疾病的藥物；由用于治療胃部疾病的藥物導入到具有胃組織靶向性的外泌體中獲得，具有胃組織靶向性的外泌體來源于胰腺部位的細胞；胃部疾病治療藥物包含上述胃靶向載藥外泌體。與現有技術相比，本發明專利技術使用胰腺部位的細胞分泌的外泌體不需要做任何修飾就可以在胃富集，用胰腺部位的細胞來源的外泌體，解決了外泌體產量的問題，具有很好的應用前景；而且用胰腺部位的細胞來源的外泌體可以裝載不同藥物或活性分子，通過靶向胃組織給藥，提高胃部疾病的治療效果，降低藥物毒副反應。降低藥物毒副反應。降低藥物毒副反應。
【技術實現步驟摘要】
一種胃靶向載藥外泌體及應用和治療胃部疾病的藥物
[0001]本專利技術屬于生物醫學領域，涉及一種胃靶向載藥外泌體及應用和治療胃部疾病的藥物。
技術介紹
[0002]胃部疾病是發生胃部的器質性或功能性疾病，胃癌的治療主要是靠外科手術進行治療，但該方法復發率較高。胃癌的其他的治療包括放療、化療、中藥治療等方法，這些方法具有較大的毒副作用，給患者帶來極大的痛苦。而靶向藥物，可以將藥物遞送到病灶部位，而正常細胞沒有藥物的聚集，這樣極大的降低了藥物的副作用，提高了藥物的療效。外泌體可以作為載體，裝載藥物并遞送到相鄰或者遠處的細胞。與被廣泛研究的脂質體相比，外泌體顯示出更大的優勢，其具備良好的生物相容性，生物可降解性，低毒性，穩定性以及低免疫原性。
[0003]目前針對胃癌的靶點主要包括EGFR、HER
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2、VEGF、VEGFR、mTOR
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MET、HGF等，目前上市的靶向制劑有抗EGFR單克隆抗體如：西妥昔單抗、帕尼單抗、尼妥珠單抗。抗HER
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2單克隆抗體如：曲妥珠單抗、帕妥珠單抗等。多靶點抑制劑如：瑞戈非尼、蘇尼替尼、索拉非尼等。但以上藥物都存在較強的副作用，且療效不夠顯著。
[0004]因此，制備一種高效的胃靶向外泌體載藥體系對胃部相關疾病進行治療是亟需的。
技術實現思路
[0005]本專利技術的目的是要解決現有技術中存在的不足，提供一種胃靶向外泌體及應用和治療胃部疾病的藥物，通過靶向胃組織給藥，提高胃部疾病的治療效果，降低藥物毒副反應。
[0006]為達到上述目的，本專利技術是按照以下技術方案實施的：
[0007]本專利技術第一方面提供了一種胃組織靶向外泌體，所述靶向外泌體來源于胰腺部位的細胞。
[0008]術語“外泌體”是一種囊泡，其從細胞向細胞外分泌，或具有由存在于細胞內的脂質雙分子層構成的膜結構。外泌體的直徑約為30
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1000nm，外泌體在多泡體與細胞膜融合時從細胞中釋放出來，或直接從細胞膜中釋放出來。已知外泌體發揮運輸細胞內的生物分子蛋白、生物活性脂質和RNA(miRNA)的作用，以實現其在介導凝固、細胞間通訊和細胞免疫方面的功能性作用。
[0009]上述外泌體的概念包括微泡。已知外泌體的標記蛋白有CD63、CD81、TSG101等，除此之外，已知的還有細胞表面受體(如：EGFR)，信號傳導相關分子、細胞粘附相關蛋白、MSC相關抗原、熱休克蛋白、囊泡形成相關Alix等蛋白。
[0010]在一些實施方案中，外泌體直徑為約30到約500nm，直徑為約30到約300，直徑為約30到約250nm，直徑為約30到約220nm，直徑為約40到約175、約50到約150、約30到約150或約
30到約120nm。
[0011]進一步，所述細胞選自正常細胞或其衍生株、癌細胞。
[0012]進一步，所述細胞來源于人或非人類哺乳動物。
[0013]進一步，所述非人類哺乳動物包括非人靈長類動物、嚙齒動物、牛、豬、羊、犬、兔、貓、馬。
[0014]進一步，所述嚙齒動物包括小鼠、大鼠、倉鼠、豚鼠。
[0015]進一步，所述靈長類動物包括猴、猩猩、狒狒、猿。
[0016]在本專利技術中，所述胰腺部位的細胞是指來源于胰腺的細胞或者干細胞誘導分化的胰腺細胞。所述干細胞包括多能干細胞、胚胎干細胞。在本專利技術中，所述多能干細胞選自誘導多能干細胞。
[0017]誘導多能干細胞是通過誘導一種或多種干細胞特異性基因的表達而產生的非多能細胞(通常是成熟體細胞)的人工衍生干細胞。這樣的干細胞特異性基因包括但不限于八聚體轉錄因子家族，即Oct
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3/4；Sox基因家族，即Sox1，Sox2，Sox3，Sox15和Sox 18；Klf基因家族，即Klf1，Klf2，Klf4和Klf5；Myc基因家族，即c
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myc和L
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myc；Nanog基因家族，即OCT4，NANOG和REX1。
[0018]進一步，所述胰腺部位的細胞包括胰腺細胞、胰腺癌細胞、誘導多能干細胞誘導的胰腺細胞。
[0019]進一步，所述胰腺細胞包括胰腺組織細胞、胰腺星狀細胞、胰腺上皮細胞、胰腺導管上皮細胞、胰腺腺泡細胞、胰島細胞。
[0020]進一步，所述胰腺組織細胞包括HPC
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Y5，胰腺星狀細胞包括CP
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H024，胰腺導管上皮細胞包括HPDE6
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C7，胰島細胞包括RIN和INS，胰腺腺泡細胞MPC
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83，胰腺癌細胞包括PANC
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1、Aspc
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1、Bxpc
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1、Capan
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1、Capan
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2、CFPAC
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1、HPAC、HPAF
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II、Hs7667、MIA、Paca
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2、MIN6、266
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6、MZ
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3221。
[0021]在本專利技術中，胰腺部位的細胞也可以進行基因修飾或改造或誘導以使其對胃組織具有靶向性，包括但不限于基因改造、基因修飾、基因過表達或刪除、分子修飾等；胰腺部位的細胞分泌的外泌體也可以進行表面修飾或改造以使其對胃組織具有靶向性，包括但不限于表面蛋白修飾、表面蛋白改造、表面小分子修飾等。
[0022]本專利技術第二方面提供了一種本專利技術第一方面所述的靶向外泌體的制備方法，包括以下步驟：
[0023]培養細胞，獲取細胞培養液；
[0024]離心，取上清液；
[0025]二次離心，取上清液；
[0026]再次離心，緩沖液重懸沉淀獲得靶向外泌體。
[0027]進一步，步驟2)離心條件為2000g離心10min。
[0028]進一步，步驟3)離心條件為10000g離心30min。
[0029]進一步，步驟4)離心條件為100000g離心2h。
[0030]進一步，步驟4)所述的緩沖液為PBS。
[0031]進一步，所述細胞選自胰腺部位的細胞。
[0032]本專利技術第三方面提供了一種藥物組合物，所述藥物組合物包括本專利技術第一方面所
述的靶向外泌體；和治療劑/預防劑。
[0033]進一步，所述治療劑或預防劑包括小分子化學藥物、肽類或蛋白質藥物、抗體、酶、細胞因子、激素、抗生素、疫苗和/或核酸類藥物。所述治療劑或預防劑可以是任何常規藥物，只要其能起到治療胃部疾病即可。
[0034]進一步，所述核酸類藥物包括質粒DNA、mRNA、microRNA、小干擾RNA、shRNA、有義RNA、反義寡核苷酸、適配體。
[0035]進一步，所述小分子化學藥物包括鹽酸吉西他濱、順鉑、吉西他濱、紫杉醇、卡鉑、依托泊苷、長春新堿、氟尿嘧啶、奧沙利鉑、伊立替康、卡培他濱、蘇尼替尼、替西羅莫司、帕唑帕尼本文檔來自技高網...
【技術保護點】
【技術特征摘要】
1.一種胃組織靶向外泌體，其特征在于，所述靶向外泌體來源于胰腺部位的細胞；優選地，所述細胞選自正常細胞或其衍生株、癌細胞；優選地，所述細胞來源于人或非人類哺乳動物；優選地，所述非人類哺乳動物包括非人靈長類動物、嚙齒動物、牛、豬、羊、犬、兔、貓、馬；優選地，所述嚙齒動物包括小鼠、大鼠、倉鼠、豚鼠。2.根據權利要求1所述的靶向外泌體，其特征在于，所述胰腺部位的細胞包括胰腺細胞、胰腺癌細胞、誘導多能干細胞誘導的胰腺細胞；優選地，所述胰腺細胞包括胰腺組織細胞、胰腺星狀細胞、胰腺上皮細胞、胰腺導管上皮細胞、胰腺腺泡細胞、胰島細胞；優選地，所述胰腺組織細胞包括HPC
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Y5，胰腺星狀細胞包括CP
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H024，胰腺導管上皮細胞包括HPDE6
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C7，胰島細胞包括RIN和INS，胰腺腺泡細胞MPC
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83，胰腺癌細胞包括PANC
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1、Aspc
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1、Bxpc
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1、Capan
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1、Capan
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2、CFPAC
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1、HPAC、HPAF
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II、Hs7667、MIA、Paca
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2、MIN6、266
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6、MZ
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3221。3.權利要求1或2所述的靶向外泌體的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：1)培養細胞，獲取細胞培養液；2)離心，取上清液；3)二次離心，取上清液；4)再次離心，緩沖液重懸沉淀獲得靶向外泌體；優選地，其特征在于，步驟2)離心條件為2000g離心10min；優選地，步驟3)離心條件為10000g離心30min；優選地，步驟4)離心條件為100000g離心2h；優選地，步驟4)所述的緩沖液為PBS；優選地，所述細胞選自胰腺部位的細胞。4.一種藥物組合物，其特征在于，所述藥物組合物包括權利要求1或2所述的靶向外泌體；和治療劑/預防劑；優選地，所述治療劑或預防劑包括小分子化...
【專利技術屬性】
技術研發人員：姜海濤，
申請(專利權)人：姜海濤，
類型：發明
國別省市：
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