一種毛發毒品痕量檢測提取液及其制備、使用方法技術

本申請描述了一種毛發毒品痕量檢測提取液及其制備、使用方法，所述的提取液包括溶劑雙蒸水，溶質50mM Tris

【技術實現步驟摘要】
一種毛發毒品痕量檢測提取液及其制備、使用方法


[0001]本專利技術屬于生物鑒定
，具體涉及一種毛發毒品痕量檢測提取液及其制備、使用方法。

技術介紹

[0002]藥物濫用也稱為“吸毒”或“毒品濫用”。藥物濫用(drug abuse)是指與醫療目的無關地反復大量使用一些具有依賴性或稱依賴性潛力的藥物，用藥者采用自身給藥形式，導致精神依賴性和身體依賴性，造成精神混亂和一些異常行為，其嚴重危害社會安全和人類生命健康。
[0003]毒品一經吸食會相應地在尿液、血液、唾液等生物檢材中留下痕跡，成為認定吸毒違法行為的證據。目前，國內外主要應用免疫膠體金技術、氣質聯用色譜和高效液相色譜
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質譜聯用分析對吸毒人員的尿液和唾液進行檢測和認定。不同種類的檢材具有不同的吸毒追溯期。但通常吸毒24
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48小時后，尿液和唾液毒品基本代謝排出，導致檢測陰性而無法提供有價值的信息。
[0004]血液中的毒品、藥物分子進入頭發、腿毛、陰毛、腋毛等毛發毛囊周圍密集的毛細血管，在毛囊中毒品分子被毛發中的角蛋白固定，大約3
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5天內含有毒品分子的毛發將長出頭皮表面。由于毛發的生長速度相對較慢，毒品分子可在毛發中長期穩定存在，且毛發中毒品及其代謝物的含量很低。毛發作為毒品小分子的一個特殊載體，具有樣本易獲取、易保存、結果穩定、檢測時限長、能反映較長時間(長達六個月以上)的藥物使用情況等獨特優勢。因此，毛發毒品和藥物分析在毒品檢測、法醫毒物學、臨床毒物學以及興奮劑檢測領域具有非常廣泛的應用前景。
[0005]由于毛發中的毒品包埋在角蛋白中，首先需要用酸解、堿解和甲醇等有機溶劑對毛發進行消解，使得毒品小分子釋放并呈游離狀態進入溶液，因此如何安全、快速、高效地對人體毛發樣本中富集的毒品小分子進行提取就成為當前首要的技術難題。

技術實現思路

[0006]本專利技術的目的為提供一種痕量毒品檢測的毛發提取液及其制備、使用方法，該方法操作簡單，提取率高，可以快速地從毛發中提取痕量毒品及其代謝物，毒品釋放快，無毒高效。
[0007]為實現本專利技術的上述目的，本專利技術采用以下技術方案：
[0008]一種毛發毒品痕量檢測提取液，包括下述重量份的原料：包括溶劑雙蒸水，溶質50mM Tris
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Hcl、體積濃度0.5％
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1％聚乙二醇辛基苯基醚、質量濃度0.5％十二烷基硫酸鈉(SDS)、50mM
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100mM二硫蘇糖醇(DTT)、50
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100ug/ml蛋白酶K和1mM氯化鈣。
[0009]三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽(Tris
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Hcl)被廣泛用作核酸和蛋白質的溶劑。
[0010]聚乙二醇辛基苯基醚是一種有機高分子化合物，為無色或幾乎無色透明黏稠液體。用作氣相色譜固定液，分離分析烴類化合物，含氧化合物、堿性和中性含氮化合物、硫
醇、無機氣體。
[0011]十二烷基硫酸鈉是一種有機化合物，為白色或淡黃色粉末，易溶于水，具有去污、乳化和優異的發泡力。
[0012]二硫蘇糖醇是一種小分子有機還原劑，其還原狀態下為線性分子，被氧化后變為包含二硫鍵的六元環狀結構。其可作為巰基化DNA的還原劑和去保護劑，也常常被用于蛋白質中二硫鍵的還原，可用于阻止蛋白質中的半胱氨酸之間所形成的蛋白質分子內或分子間二硫鍵。
[0013]蛋白酶K為強力蛋白溶解酶，是一種從白色念珠菌分離出來的強力蛋白溶解酶，具有很高的比活性，是DNA提取的關鍵試劑。在DNA提取中，主要作用是酶解與核酸結合的組蛋白，使DNA游離在溶液中，隨后用不同方法進行抽提，除去雜質，收集DNA。蛋白酶K溶液為無色透明，如出現沉淀就不能再使用。
[0014]雙蒸水是重蒸水的一種，是將經過一次蒸餾后的水，再次蒸餾所得到的水。
[0015]上述一種毛發毒品痕量檢測提取液，作為一種優選的實施方案，包括下述重量份的原料：包括溶劑雙蒸水，溶質50mM Tris
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Hcl、體積濃度0.8％聚乙二醇辛基苯基醚、質量濃度0.5％十二烷基硫酸鈉、80mM二硫蘇糖醇、80ug/ml蛋白酶K、1mM氯化鈣。
[0016]其中：nM為納摩爾每升，mM為毫摩爾每升。
[0017]上述一種毛發毒品痕量檢測提取液，作為一種優選的實施方案，所述Tris
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Hcl的pH為7.5。
[0018]本申請的第二方面，提供一種毛發毒品痕量檢測提取液的制備方法，包括以下步驟：
[0019](1)將除去蛋白酶K的其余原料溶于雙蒸水中混合攪拌均勻，得中間產品；
[0020](2)將待檢測樣品放入前，向中間產品中加入蛋白酶K，混合均勻得所述提取液。
[0021]本申請的第三方面，提供一種毛發毒品痕量檢測提取液的使用方法，
[0022](1)將10mg的毛發剪為1
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2mm，放入研磨管，震蕩研磨；
[0023](2)將所述提取液加入研磨管中，混合均勻，得毛發研磨液；
[0024](3)將步驟(2)所得毛發研磨液滴加到嗎啡、冰毒或氯胺酮試劑條，5min后，上機檢測。
[0025]上述一種毛發毒品痕量檢測提取液的使用方法，作為一種優選的實施方案，步驟(1)中，震蕩研磨為將研磨管放入震蕩儀中，在100Hz下震蕩研磨100s。
[0026]上述一種毛發毒品痕量檢測提取液的使用方法，作為一種優選的實施方案，步驟(2)中，毛發與提取液的用量比為10mg：1ml。
[0027]本申請的有益效果為：本申請所述提取液所含原料蛋白酶K可水解毛發角蛋白的肽鍵，分解角蛋白，釋放毒品小分子，提取液中的Ca
2+
離子可以提高酶的活性，二硫蘇糖醇作為還原劑可提高蛋白酶的活性，十二烷基硫酸鈉可破壞蛋白結構，有助于毒品分子釋放，聚乙二醇辛基苯基醚是一種非離子表面活性劑，與脂質形成可溶性復合物，疏水端可結合膜蛋白的疏水區，溶于溶液，即本申請所述提取液所含各原料有機地結合在一起可使毛發中的毒品分子快速溶出。
[0028]本申請所述提取液可以對嗎啡、甲基安非他命、氯胺酮、3,4
?
亞甲二氧基苯丙胺、可卡因、甲卡西酮、合成大麻素等毒品小分子進行有效提取，使毒品小分子充分釋放，提取
率高；工藝簡單，無毒、無污染，現場檢測的可行性高；與傳統提取方法相比，將提取時間縮短到100s，并保證了結果的真實可靠，大大提高了執法機關及戒毒機構在一線檢測的準備性和高效性。
具體實施方式
[0029]為使本專利技術的目的、技術方案和優點更加清楚，下面將對本專利技術的技術方案進行詳細的描述。顯然，所描述的實施例僅僅是本專利技術的一部分實施例，而不是全部的實施例。基于本專利技術中的實施例，本領域普通技術人員在沒有做出創造性勞動的前提下所得到的所有其它實施方式，都屬于本專利技術所保護的范圍。
[0030]本申請實施例中所使用的毛發毒品檢測儀器本文檔來自技高網...

【技術保護點】

【技術特征摘要】
1.一種毛發毒品痕量檢測提取液，其特征在于，包括溶劑雙蒸水，溶質50mM Tris
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Hcl、體積濃度0.5％
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1％聚乙二醇辛基苯基醚、質量濃度0.5％十二烷基硫酸鈉、50mM
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100mM二硫蘇糖醇、50
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100ug/ml蛋白酶K、1mM氯化鈣。2.根據權利要求1所述毛發毒品痕量檢測提取液，其特征在于，包括下述重量份的原料：包括溶劑雙蒸水，溶質50mM Tris
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Hcl、體積濃度0.8％聚乙二醇辛基苯基醚、質量濃度0.5％十二烷基硫酸鈉、80mM二硫蘇糖醇、80ug/ml蛋白酶K、1mM氯化鈣。3.根據權利要求1所述毛發毒品痕量檢測提取液，其特征在于，所述Tris
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Hcl的pH為7.5。4.權利要求1
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【專利技術屬性】
技術研發人員：張國華，李令磊，楊雅惠，
申請(專利權)人：上海凱創生物技術有限公司，
類型：發明
國別省市：