使用基于細胞的療法治療癌癥和傳染病的方法技術

本申請涉及使用基于細胞的療法治療癌癥和傳染病的方法。本公開涉及通過中斷血管活性腸肽(VIP)信號傳導和/或抑制磷脂酰肌醇

【技術實現步驟摘要】
使用基于細胞的療法治療癌癥和傳染病的方法
[0001]本申請是申請日為2017年04月05日，申請號為201780018755.6，專利技術名稱為“使用基于細胞的療法治療癌癥和傳染病的方法”的申請的分案申請。
[0002]相關申請的交叉引用
[0003]本申請要求于2016年4月8日提交的美國臨時申請號62/319,957的權益。出于所有目的，本申請的全部內容通過引用結合于此。
[0004]通過辦公室電子申請系統(EFS
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WEB)提交作為文本文件的材料的引用結合
[0005]與本申請相關的序列表以文本格式提供以代替紙質副本，并且通過引用結合到本說明書中。包含序列表的文本文件的名稱是16094PCT_ST25.txt。該文本文件為11KB，于2017年4月5日創建，并通過EFS
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Web以電子方式提交。

技術介紹

[0006]細胞毒性T細胞直接殺死細胞，并且該應答是抗原特異性的。為了破壞腫瘤，細胞毒性細胞必須以足夠的數量增殖以超過分裂的癌細胞。然而，如果T細胞具有響應抗原刺激的有限增殖潛力，則認為它們是衰老的。Filaci等人報道了效應T細胞的一個亞群CD8+CD28
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T調節淋巴細胞抑制人癌癥中的T細胞增殖和細胞毒性功能(J Immunol[免疫學雜志],2007,179:4323
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4334)。Montes等人表明作為腫瘤免疫逃避的潛在形式，腫瘤誘導衰老T細胞(Cancer Res[癌癥研究],2008,68:870
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879)。衰老T細胞的特征在于CD27和CD28表達的喪失，增殖能力的缺乏以及衰老相關分子的表達增加。參見Ramello等人.Cell Death and Disease[細胞死亡與疾病],2014.5,e1507。因此，需要鑒定通過逆轉T細胞衰老來治療癌癥的改進方法。
[0007]已經報道了用抗CD3和抗CD28(抗CD3/CD28珠)包被的磁珠用于T細胞擴增，T細胞擴增已被實驗地用于增強免疫抑制的癌癥患者中的T細胞免疫。參見Porter等人，A phase 1trial of donor lymphocyte infusions expanded and activated ex vivo via CD3/CD28 costimulation[通過CD3/CD28共刺激擴增和離體活化供體淋巴細胞輸注的1期試驗].Blood[血液],2006,107:1325
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1331。
[0008]Li等人報道通過拮抗血管活性腸肽信號來調節同種異體移植物中的移植物抗白血病(Cancer Res[癌癥研究],2016,76(23):6802
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681)。還參見Li等人PLoS One[公共科學圖書館期刊].2013,8(5):e63381；Li等人，Blood[血液].2013,121(12):2347
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51，Li等人，J Immunol[免疫學雜志].2011,187(2):1057
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65；美國專利9,458,217；以及美國公開申請號2013/0302351。
[0009]本文引用的參考文獻不是對現有技術的承認。

技術實現思路

[0010]本公開涉及通過中斷血管活性腸肽(VIP)信號傳導和/或抑制磷脂酰肌醇
?3?
激酶(PI3激酶)抑制劑信號傳導來逆轉T細胞衰老的組合物和方法，以及用于管理癌癥和慢性病毒感染的用途。在某些實施例中，本公開構思通過在體外將T細胞與阻止VIP與VIP受體相互
作用的試劑混合和/或添加PI3激酶抑制劑來逆轉T細胞衰老的方法。在某些實施例中，本公開構思通過與PI3激酶抑制劑、阻斷VIP和VIP受體信號傳導的試劑、VIP降解酶及其組合混合來擴增衰老T細胞。
[0011]在某些實施例中，本公開構思通過將T細胞體外暴露于跟PI3激酶抑制劑、艾代拉利司(idelalisib)(阻止VIP與VIP受體相互作用的試劑，例如阻止通過VIP受體的信號傳導)、VIP降解酶及其組合相組合的結合CD3和/或CD28的抗體來刺激分離的T細胞或擴增衰老T細胞的方法。在某些實施例中，本公開構思使用任選與固體基質如磁珠連接的抗CD3和抗CD28抗體或結合劑。
[0012]在某些實施例中，本公開構思使用如本文公開的體外細胞培養物增殖CD28和/或CD27陰性的T細胞的方法，其提供與復制前水平相比具有增加的CD28和/或CD27表達的復制的T細胞。
[0013]在某些實施例中，本公開構思增殖T細胞的方法，其中在增殖T細胞之前、過程中或之后，將T細胞與具有編碼嵌合抗原受體的核酸序列的載體在使得這些細胞在細胞表面表達嵌合抗原受體的條件下混合，其中該嵌合抗原受體包含癌靶向序列、跨膜結構域、T細胞共刺激分子結構域和T細胞抗原受體結構域的信號轉導組分。
[0014]在某些實施例中，本公開涉及體外細胞培養組合物，其包含最小必需培養基和T細胞和VIP受體拮抗劑、PI3激酶抑制劑、VIP降解酶及其組合，并且任選地還包含任選地固定在固體基質如珠子上的抗CD3抗體和抗CD28抗體。在某些實施例中，從骨髓細胞或血細胞中純化T細胞。
[0015]在某些實施例中，磷脂酰肌醇
?3?
激酶抑制劑選自艾代拉利司、渥曼青霉素、去甲氧基綠啶(demethoxyviridin)、哌立福辛、布帕尼西(buparlisib)、度維利塞(duvelisib)、庫潘尼西(copanlisib)和阿培利司(alpelisib)。在某些實施例中，磷脂酰肌醇
?3?
激酶抑制劑選自培養物中的艾代拉利司，其濃度大于0.001nM、0.1nM、1nM、10nM、100nM或是10nM至10微摩爾或10nM至500nM、或10nM至1微摩爾。
[0016]在某些實施例中，培養物包含VIP受體拮抗劑，例如VIPhyb，其包含具有C端酰胺的(SEQ ID NO:1)KPRRPYTDNYTRLRKQMAVKKYLNSILN。在某些實施例中，培養物包含VIP受體拮抗劑，例如VIPhyb，其濃度至少為0.001微摩爾、0.01微摩爾、0.1微摩爾、0.5微摩爾、1.0微摩爾、2或3微摩爾。在某些實施例中，培養物包含VIP受體拮抗劑，例如VIPhyb，其濃度為0.5微摩爾至10微摩爾或1微摩爾至8微摩爾。
[0017]在某些實施例中，培養物包含水解VIP的酶。在某些實施例中，培養物包含VIP降解酶，例如肽酶、絲氨酸肽酶、類胰蛋白酶、糜酶、人糜酶1(CMA1)或緩激肽釋放絲氨酸蛋白酶(chymotrypic serine proteinase)。在某些實施例中，培養物具有至少0.001微克/mL、0.01微克/mL、0.1微克/mL或1微克/mL的VIP降解酶，例如肥大細胞糜酶。在某些實施例中，本公開構思T細胞培養物，其包含最小必需培養基和表達CD3和/或CD4和/或CD8并且對CD27和/本文檔來自技高網...

【技術保護點】

【技術特征摘要】
1.一種體外細胞培養組合物，其包含純化的T細胞和VIP受體拮抗劑和任選固定在珠子或固體表面上的抗CD3抗體和抗CD28抗體。2.如權利要求1所述的組合物，其中超過15％的T細胞是CD28陰性的。3.如權利要求1所述的組合物，其中該VIP受體拮抗劑包含KPRRPYTDNYTRLRKQMAVKKYLNSILN)(SEQ ID NO:1)。4.一種體外細胞培養組合物，其包含純化的T細胞和VIP降解酶和任選固定在珠子或固體表面上的抗CD3抗體和抗CD28抗體。5.如權利要求4所述的組合物，其中超過15％的T細胞是CD28陰性的。6.如權利要求4所述的組合物，其中該VIP降解酶包含mllklkekasltlavgtlpfpsqfnfvppgrmcrvagwgrtgvlkpgsdtlqevklrlmdpqacshfrdfdhnlqlcvgnprktksafkgdsggpllcagvaqgivsygrsdakppavftrishyrpwinqilqan(SEQ ID NO:2)。7.如權利要求4所述的組合物，其中該VIP降解酶包含(SEQ ID NO:3)DGICKSSDCIKSAARLIQNMDATTEPCTDFFKYACGGWLKRNVIPETSSRYGNFDILRDELEVVLKDVLQEPKTEDIVAVQKAKALYRSCINESAIDSRGGEPLLKLLPDIYGWPVATENWEQKYGASWTAEKAIAQLNSKYGKKVLINLFVGTDDKNSVNHVIHIDQPRLGLPSRDYYECTGIYKEACTAYVDFMIS...

【專利技術屬性】
技術研發人員：埃德蒙，
申請(專利權)人：愛默蕾大學，
類型：發明
國別省市：