一種小秦艽組織培養(yǎng)繁育方法技術(shù)

一種小秦艽組織培養(yǎng)繁育方法，包括如下步驟：(1)取小秦艽種子作為外植體進(jìn)行消毒；(2)將消毒后的外植體置于MS基本培養(yǎng)基中誘導(dǎo)得到無菌試管苗；(3)將所述無菌試管苗置于MS繁殖培養(yǎng)基中進(jìn)行試管苗快速繁殖培養(yǎng)獲得叢生芽。采用本發(fā)明專利技術(shù)所述的培養(yǎng)方法得到的小秦艽叢生芽增殖系數(shù)達(dá)到15

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
一種小秦艽組織培養(yǎng)繁育方法


[0001]本專利技術(shù)涉及一種植物繁殖方法，特別是一種小秦艽組織培養(yǎng)繁育方法。

技術(shù)介紹

[0002]小秦艽，拉丁名Gentiana dahurica Fisch.，又稱達(dá)烏里秦艽，為龍膽科龍膽屬植物，是我國重要的傳統(tǒng)中藥之一。主產(chǎn)于我國西北、華北大部。其干燥根入藥，主要成分為龍膽苦苷，是治療結(jié)核病、黃疸、蕁麻疹、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等癥的主藥之一，具有重要的開發(fā)應(yīng)用價(jià)值。隨著小秦艽藥理藥效的深入研究及臨床應(yīng)用量的增加，大量的野生資源被掠奪性采挖，而小秦艽一般通過種子進(jìn)行繁殖，但在初步的種苗繁育工作中發(fā)現(xiàn)，小秦艽的種子繁殖存在發(fā)芽率低、發(fā)芽不整齊、種苗質(zhì)量不穩(wěn)定等問題，嚴(yán)重制約了小秦艽的規(guī)范化種植和生產(chǎn)。采用生物技術(shù)組織培養(yǎng)技術(shù)，可以有效快速地提高小秦艽種苗的繁殖速度和質(zhì)量，實(shí)現(xiàn)小秦艽優(yōu)質(zhì)種苗的工廠化育苗，以滿足生產(chǎn)上的需要。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

[0003]本專利技術(shù)的目的是提供一種小秦艽組織培養(yǎng)繁育方法，它能夠快速繁殖出大量適合移栽的優(yōu)良小秦艽種苗、滿足生產(chǎn)需要。
[0004]本專利技術(shù)通過以下技術(shù)方案達(dá)到上述目的：一種小秦艽組織培養(yǎng)繁育方法，包括以下步驟：
[0005](1)外植體的選擇與消毒：取小秦艽飽滿果實(shí)，剝?nèi)スず笕〕龇N子作為外植體，作為外植體，依次用2％(v/v)洗潔精水溶液浸泡5min、線狀自來水沖洗15
?
30min、添加入2
?
3滴吐溫
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20的100毫升0.1％(v/v)升汞消毒8
?<br/>10min、無菌水沖洗3
?
5次，最后用消毒濾紙除去表面水分，得到無菌外植體，其中無菌水為經(jīng)高壓滅菌的蒸餾水；
[0006](2)外植體初代誘導(dǎo)獲得無菌試管苗：將步驟(1)得到的無菌外植體接種到MS培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度為23
?
27℃，光照強(qiáng)度1500lux，光照時(shí)間為8
?
10小時(shí)/天的條件下培養(yǎng)45天得到無菌試管苗，其中MS培養(yǎng)基中添加1.0mg/L的6
?
芐基腺嘌呤6
?
BA、0.1mg/L的吲哚乙酸IAA、30g/L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養(yǎng)基的pH值為5.8；
[0007](3)試管苗叢生芽快速繁殖培養(yǎng)：將步驟(2)中得到的無菌試管苗置于MS繁殖培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度23
?
27℃，光照強(qiáng)度1500lux，光照時(shí)間為8
?
10小時(shí)/天的條件下培養(yǎng)75天得到試管苗叢生芽，其中MS繁殖培養(yǎng)基中添加0.5
?
2.5mg/L的6
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芐基腺嘌呤6
?
BA、0.1
?
0.3mg/L的吲哚乙酸IAA、0.1
?
1.0mg/L的激動(dòng)素KT、30g/L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養(yǎng)基的pH值為5.8。
[0008]本專利技術(shù)的突出優(yōu)點(diǎn)在于：
[0009](1)采用生物技術(shù)對小秦艽進(jìn)行組織培養(yǎng)快速繁殖，通過小秦艽叢生芽的繁殖，在短時(shí)間內(nèi)可培育出大量適合栽培種植的小秦艽幼苗，保障小秦艽種苗的增殖系數(shù)和種苗質(zhì)量，實(shí)現(xiàn)規(guī)模化生產(chǎn)，滿足生產(chǎn)上的需要。
[0010](2)采用本專利技術(shù)所述的培養(yǎng)方法得到的小秦艽叢生芽增殖系數(shù)達(dá)到15
?
25倍，叢生
芽健壯，接種到生根培養(yǎng)基后容易生根。
具體實(shí)施方式
[0011]下面結(jié)合實(shí)施例對本專利技術(shù)的技術(shù)方案進(jìn)一步說明。
[0012]實(shí)施例1
[0013]本專利技術(shù)所述的小秦艽的組織培養(yǎng)快速繁殖方法的一個(gè)實(shí)例，包括以下步驟：
[0014](1)外植體的選擇與消毒：取小秦艽飽滿果實(shí)，剝?nèi)スず笕〕龇N子作為外植體，作為外植體，依次用2％(v/v)洗潔精水溶液浸泡5min、線狀自來水沖洗15
?
30min、添加入2
?
3滴吐溫
?
20的100毫升0.1％(v/v)升汞消毒8
?
10min、無菌水沖洗3
?
5次，最后用消毒濾紙除去表面水分，得到無菌外植體，其中無菌水為經(jīng)高壓滅菌的蒸餾水；
[0015](2)外植體初代誘導(dǎo)獲得無菌試管苗：將步驟(1)得到的無菌外植體接種到MS培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度為23
?
27℃，光照強(qiáng)度1500lux，光照時(shí)間為8
?
10小時(shí)/天的條件下培養(yǎng)45天得到無菌試管苗，其中MS培養(yǎng)基中添加1.0mg/L的6
?
芐基腺嘌呤6
?
BA、0.1mg/L的吲哚乙酸IAA、30g/L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養(yǎng)基的pH值為5.8；
[0016](3)試管苗叢生芽快速繁殖培養(yǎng)：將步驟(2)中得到的無菌試管苗置于MS繁殖培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度23
?
27℃，光照強(qiáng)度1500lux，光照時(shí)間為8
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10小時(shí)/天的條件下培養(yǎng)75天得到試管苗叢生芽，其中MS繁殖培養(yǎng)基中添加0.5mg/L的6
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芐基腺嘌呤6
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BA、0.1mg/L的吲哚乙酸IAA、0.1mg/L的激動(dòng)素KT、30g/L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養(yǎng)基的pH值為5.8，生長倍率為7.0倍，叢生芽增殖系數(shù)為15.5。
[0017]實(shí)施例2
[0018]本專利技術(shù)所述的小秦艽的組織培養(yǎng)快速繁殖方法的另一個(gè)實(shí)例，包括以下步驟：
[0019](1)外植體的選擇與消毒：取小秦艽飽滿果實(shí)，剝?nèi)スず笕〕龇N子作為外植體，作為外植體，依次用2％(v/v)洗潔精水溶液浸泡5min、線狀自來水沖洗15
?
30min、添加入2
?
3滴吐溫
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20的100毫升0.1％(v/v)升汞消毒8
?
10min、無菌水沖洗3
?
5次，最后用消毒濾紙除去表面水分，得到無菌外植體，其中無菌水為經(jīng)高壓滅菌的蒸餾水；
[0020](2)外植體初代誘導(dǎo)獲得無菌試管苗：將步驟(1)得到的無菌外植體接種到MS培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度為23
?
27℃，光照強(qiáng)度1500lux，光照時(shí)間為8
?
10小時(shí)/天的條件下培養(yǎng)45天得到無菌試管苗，其中MS培養(yǎng)基中添加1.0mg/L的6
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芐基腺嘌呤6
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BA、0.1mg/L的吲哚乙酸IAA、30g/L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養(yǎng)基的pH值為5.8；
[0021](3)試管苗叢生芽快速繁殖培養(yǎng)：將步驟(2)中得到的無菌試管苗置于MS繁殖培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度23
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27℃，光照強(qiáng)度1500lux，光照時(shí)間為8
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10小時(shí)/天的條件下培養(yǎng)75天得到試管苗叢生芽，其中MS繁殖培養(yǎng)基中添加1.5mg/L的6
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芐基腺嘌呤6
?
BA、0.3mg/L的吲哚乙酸IAA、0.本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】

【技術(shù)特征摘要】
1.一種小秦艽組織培養(yǎng)繁育方法，其特征在于：該方法包括以下步驟：(1)外植體的選擇與消毒：取小秦艽飽滿果實(shí)，剝?nèi)スず笕〕龇N子作為外植體，作為外植體，依次用2％(v/v)洗潔精水溶液浸泡5min、線狀自來水沖洗15
?
30min、添加入2
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3滴吐溫
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20的100毫升0.1％(v/v)升汞消毒8
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10min、無菌水沖洗3
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5次，最后用消毒濾紙除去表面水分，得到無菌外植體，其中無菌水為經(jīng)高壓滅菌的蒸餾水；(2)外植體初代誘導(dǎo)獲得無菌試管苗：將步驟(1)得到的無菌外植體接種到MS培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度為23
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27℃，光照強(qiáng)度1500lux，光照時(shí)間為8
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10小時(shí)/天的條件下培養(yǎng)45天得到無菌試管苗，其中MS培養(yǎng)基中添加1.0mg/L的6
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芐基腺嘌呤6
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BA、0.1mg/L的吲哚乙酸IAA、30g/L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養(yǎng)基的pH值為5.8；(3)試管苗叢生芽快速繁殖培養(yǎng)：將步驟(2)中得到的無菌試管苗置于MS繁殖培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度23
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27℃，光照強(qiáng)度1500lux，光照時(shí)間為8
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10小時(shí)/天的條件下培養(yǎng)75天得到試管苗叢生芽，其中MS繁殖培養(yǎng)基中...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：張文靜，王劍，郝博文，徐建文，任康達(dá)，孔妍，徐建平，白小榮，馬巖，
申請(專利權(quán))人：張文靜，
類型：發(fā)明
國別省市：