本發明專利技術屬于生物醫藥研究領域，具體涉及一種組織pH變化血清標志物及應用。本發明專利技術經過廣泛而深入的研究，首次發現，AEP可以作為全身治療/局部治療后，病理病變后組織pH升高的血清標志物，進而作為治療，疾病預后標志物。在此基礎上，本發明專利技術提供一種全新的用于檢測組織pH的方法及檢測試劑，具有廣闊的臨床應用前景。具有廣闊的臨床應用前景。具有廣闊的臨床應用前景。
【技術實現步驟摘要】
一種組織pH變化血清標志物及應用
[0001]本專利技術屬于生物醫藥研究領域，具體涉及一種組織pH變化血清標志物及應用。
技術介紹
[0002]Legumain(LGMN)是發現于溶酶體中的一種天冬酰胺內肽酶(Asparaginyl endopeptidase or AEP)(EC 3.4.22.34)。它屬于半胱胺酸蛋白酶C13家族。AEP底物的P1位置為天冬酰胺特異性。Legumain是以前體合成的,其摩爾分子量約為56kDa。Legumain前體的N端和C端都有前肽。Legumain前體在核糖體合成后被運輸到溶酶體中，并在其酸性環境中發生連續自活化成為成熟的AEP，其摩爾分子量約為35kDa。因此，Legumain具有pH響應性，并且其pH依賴的活化與其在SDS
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PAGE上從56kDa條帶轉化為35kDa條帶相吻合。
[0003]Legumain高表達于多種正常組織和器官中。在血液和免疫系統中，Legumain高表達于CD8 T細胞、外周單核細胞、血小板、淋巴結、扁桃體、骨髓間充質干細胞；在神經系統中，Legumain高表于大腦皮層；在肌骨胳系統中，Legumain高表達于心臟和骨骼；在內臟中，Legumain高表達于口腔上皮細胞、食管、胃腸道各部、肝臟、腎臟、脾臟、脂肪；在分泌器官中，Legumain高表達于唾液腺、甲狀腺、腎上腺、乳腺、胰腺、胰島、膽囊、前裂腺、膀胱、皮膚、虹毛囊、胎盤；在生殖系統中，Legumain高表達于子宮、卵巢、睪丸。Legumain高表達于多種人類實體瘤中，如結直腸癌，乳腺癌，前裂腺癌，胃癌、卵巢癌等。Legumain也高表于急性淋巴母細胞性白血病。此外，Legumain還高表于其他病變組織如動脈粥樣硬化的斑塊及周邊組織。Legumain不僅表達于細胞溶酶體、胞質及細胞核中，而且能分泌到細胞外，進而能在血液中被檢測到并與某些疾病預后相關。
[0004]眾多研究表明，腫瘤的酸性微環境是腫瘤的一個基本特征。腫瘤在酸性微環境中增殖而不在中性或偏堿性的微環境中生長。腫瘤的酸性微環境是腫瘤進展的一個主要決定因素。此外，腫瘤的酸性微環境是腫瘤耐藥性的重要機制。腫瘤的酸性微環境還能促進腫瘤免疫逃逸。此外，炎癥性疾病也與組織酸性pH相關；反之，酸性pH被證明會促進炎癥。因此可以說，組織酸性微環境與大多數慢性、退行性疾病相關。
[0005]但組織微環境的酸堿性變化難以測量，也就無法測量特別是治療后組織微環境酸堿性變化。
技術實現思路
[0006]為了克服現有技術中所存在的問題，本專利技術的目的在于提供一種組織pH變化血清標志物及應用。
[0007]為了實現上述目的以及其他相關目的，本專利技術采用如下技術方案：
[0008]本專利技術的第一方面，提供Legumain作為生物標志物在制備或篩選組織pH檢測試劑中的用途。
[0009]具體地，所述Legumain又稱為LGMN或AEP。所述Legumain的中文名字是天冬酰胺內肽酶。所述Legumain的Genebank登錄號是NC_000014,基因號是5641。
[0010]進一步地，所述生物標志物是指血清生物標志物。
[0011]進一步地，所述組織pH檢測試劑用于檢測組織pH水平或變化。
[0012]進一步地，所述組織pH檢測試劑用于疾病的判斷、治療方案的選擇、和/或預后評估。
[0013]進一步地，所述疾病選自腫瘤。
[0014]進一步地，所述腫瘤選自乳腺癌、胃癌、結腸癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、黑色素瘤、膠質母細胞瘤、成骨肉瘤。
[0015]進一步地，所述治療選自化療、熱療或熱化療。
[0016]進一步地，所述檢測試劑以Legumain作為檢測對象。
[0017]進一步地，所述胃癌檢測試劑中，含有Legumain作為標準品或陽性對照。
[0018]所述標準品或陽性對照，用于檢測樣本組織中的Legumain含量。
[0019]將Legumain作為生物標志物用于篩選組織pH檢測試劑，是指將Legumain作為靶標應用于組織pH檢測試劑的篩選。在一優選例中，基于所述的Legumain，篩選特異性識別Legumain的試劑，從而作為檢測樣本組織pH水平的試劑。
[0020]在一實施方式中，基于所述的Legumain，篩選特異性識別Legumain的抗體，從而作為從而作為檢測組織pH檢測試劑。
[0021]本專利技術的第二方面，提供特異性識別Legumain的試劑在制備組織pH檢測試劑中的用途。
[0022]進一步地，所述檢測試劑以Legumain作為檢測對象。
[0023]在一實施方式中，所述特異性識別Legumain的試劑選自特異性識別Legumain的抗體。
[0024]所述抗體包括單克隆抗體和多克隆抗體。
[0025]本專利技術的第二方面，提供一種組織pH檢測試劑盒，包括組織pH檢測試劑。
[0026]進一步地，所述試劑盒以Legumain作為生物標志物。
[0027]進一步地，所述生物標志物是指血清生物標志物。
[0028]進一步地，所述組織pH檢測試劑是指腫瘤組織pH檢測試劑。
[0029]進一步地，所述組織pH檢測試劑用于檢測組織pH水平或變化。
[0030]進一步地，所述組織選自腫瘤組織。
[0031]進一步地，所述檢測試劑以Legumain作為檢測對象。
[0032]在一實施方式中，所述特異性識別Legumain的試劑選自特異性識別Legumain的抗體。
[0033]所述抗體包括單克隆抗體和多克隆抗體。
[0034]在一優選例中，特異性識別Legumain的抗體包括用于檢測Legumain的第一抗體和用于檢測所述第一抗體的第二抗體。
[0035]進一步地，所述第二抗體為熒光分子標記的第二抗體。
[0036]在一優選例中，所述的試劑盒中還包括免疫熒光染色技術常用的試劑，免疫熒光染色技術常用的試劑包括：福爾馬林固定液、石蠟、二甲苯、檸檬酸鈉、封閉液中的一種或多種。
[0037]在一優選例中，所述試劑盒還包括陽性對照、陰性對照。所述陽性對照包括
Legumain。所述陰性對照包括ddH2O。
[0038]進一步地，所述組織pH檢測試劑盒用于疾病的判斷、治療方案的選擇、和/或預后評估。
[0039]進一步地，所述疾病選自腫瘤。
[0040]進一步地，所述治療選自化療、熱療或熱化療。
[0041]在本專利技術的第四方面，提供了一種檢測組織pH的方法，包括檢測樣本組織中Legumain的水平。
[0042]與現有技術相比，本專利技術具有如下有益效果：
[0043]本專利技術經過廣泛而深入的研究，首次發現，AEP可以作為全身治療/局部治療后，病理病變后組織pH升高的血清標志物，進而作為治療，疾病預后標志物。在此基礎上，本專利技術提供一種全新的用于檢測組織pH的本文檔來自技高網...
【技術保護點】
【技術特征摘要】
1.Legumain作為生物標志物在制備或篩選組織pH檢測試劑中的用途。2.根據權利要求1所述的用途，其特征在于，所述生物標志物是指血清生物標志物。3.根據權利要求1所述的用途，其特征在于，所述組織pH檢測試劑用于檢測組織pH水平或變化。4.根據權利要求1所述的用途，其特征在于，所述組織pH檢測試劑用于疾病的判斷、治療方案的選擇、和/或預后評估。5.根據權利要求4所述的用途，其特征在于，所述疾病選自腫瘤。6.特異性識別Legumain的試劑在制備組織pH...
【專利技術屬性】
技術研發人員：彭保衛，徐宇虹，
申請(專利權)人：大理大學，
類型：發明
國別省市：
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