一種用于塘口擴培的芽孢桿菌復合制劑及其應用制造技術

本發明專利技術公開了一種用于塘口擴培的芽孢桿菌復合制劑及其應用。所述芽孢桿菌復合制劑中含有蠟樣芽孢桿菌粉、豆粕、酵母浸粉、玉米皮粉、磷酸一銨、氯化銨、硫酸錳、中性蛋白酶。所述蠟樣芽孢桿菌粉是由保藏編號為CGMCC No.10052的蠟樣芽孢桿菌J19經液體發酵、噴霧干燥制得的，其具有萌發速度快、抑制水產病原菌、耐受高鹽、分解有機質能力強的性能。所述芽孢桿菌復合制劑可快速分解養殖水體有機質，提高水體透明度，使水質更加清爽。本發明專利技術解決了大水面水產養殖中因水面面積大，直接使用芽孢產品，成本無法接受的問題，而且擴培后芽孢變為營養體，潑灑到水體后起效快，并克服了開放式好氧發酵過程中的染菌問題。式好氧發酵過程中的染菌問題。式好氧發酵過程中的染菌問題。

【技術實現步驟摘要】
一種用于塘口擴培的芽孢桿菌復合制劑及其應用


[0001]本專利技術涉及水產養殖領域，具體涉及一種用于塘口擴培的芽孢桿菌復合制劑及其應用。

技術介紹

[0002]近年來，微生態制劑在水產養殖中的應用越來越廣泛，尤其是在養殖中后期，隨著投喂量增加，殘餌糞便等不斷積累，水體透明度降低，水質變差，嚴重降低了養殖成功率。目前微生態產品一般適用于工廠化、高位池或小棚等集約化養殖場景，而在大水面養殖如大汪子、水庫等低密度養殖模式中，單位水體的產量遠低于集約化養殖，故養殖用藥需要著重考慮性價比，這就限制了微生態產品在大水面養殖中的推廣應用，因此開發一款性價比適合大水面養殖的微生態產品及使用方法，極具應用價值。目前有部分廠家或養殖戶采用芽孢桿菌擴培，但一方面選用的芽孢桿菌萌發速度慢、競爭能力差，擴培過程極易感染雜菌導致擴培失敗，另一方面僅采用紅糖作為培養基，營養成分單一，擴培菌量極低，達不到降低使用成本的目的。

技術實現思路

[0003]為了解決和克服現有技術中的問題和不足，本專利技術提供了一種用于塘口擴培的芽孢桿菌復合制劑及其應用。采用本專利技術的芽孢桿菌復合制劑可達到分解養殖水體有機質、提高水體透明度、凈化水體的目的，其應用成本低，且效果顯著。
[0004]為實現上述專利技術目的，本專利技術通過下述技術方案予以實現：
[0005]本專利技術提供了一種用于塘口擴培的芽孢桿菌復合制劑，所述芽孢桿菌復合制劑中含有蠟樣芽孢桿菌粉、豆粕、酵母浸粉、玉米皮粉、磷酸一銨、氯化銨、硫酸錳、中性蛋白酶。
[0006]進一步的，所述芽孢桿菌復合制劑的配方及其配比為：按重量份數計，蠟樣芽孢桿菌粉5
?
15份、豆粕35
?
40份、酵母浸粉5
?
10份、玉米皮粉5
?
10份、磷酸二氫銨2
?
5份、氯化銨2
?
5份、硫酸錳0.2
?
0.5份、中性蛋白酶0.002
?
0.005份，余量為葡萄糖。
[0007]進一步的，所述芽孢桿菌復合制劑的配方及其配比為：按重量份數計，蠟樣芽孢桿菌粉10份、豆粕37份、酵母浸粉10份、玉米皮粉10份、磷酸二氫銨3份、氯化銨3份、硫酸錳0.4份、中性蛋白酶0.004份、余量為葡萄糖。
[0008]進一步的，所述蠟樣芽孢桿菌粉是由保藏編號為CGMCC No.10052的蠟樣芽孢桿菌J19經液體發酵、噴霧干燥制得的，其菌量不低于5.0
×
10
10
CFU/g。
[0009]進一步的，所述蠟樣芽孢桿菌J19萌發速度快、萌發率高，耐受0～50
‰
的鹽度，并能夠抑制水產病原菌和分解有機質。
[0010]進一步的，所述中性蛋白酶的酶活力不低于5萬U/g。
[0011]本專利技術還提供了所述的芽孢桿菌復合制劑在改善養殖池塘水質中的應用。
[0012]進一步的，所述芽孢桿菌復合制劑的使用方法為：將所述芽孢桿菌復合制劑經養殖池塘擴培得到擴培液，將擴培液以1L/畝
·
米
?
2L/畝
·
米的用量潑灑于養殖水體中，使用
1d
?
7d。
[0013]進一步的，所述芽孢桿菌復合制劑的養殖池塘擴培步驟為：
[0014](1)將帶蓋塑料桶及充氣泵消毒洗凈；
[0015](2)將水加到步驟(1)的消毒塑料桶中，日光下暴曬至溫度25℃
?
37℃，同時用充氣泵去除余氯；
[0016](3)將所述芽孢桿菌復合制劑稀釋后緩慢添加至步驟(2)的塑料桶充氣位置，混合均勻后，蓋上桶蓋；全程曝氣培養，直至鏡檢發現芽孢桿菌布滿視野，獲得擴培液。
[0017]進一步的，所述芽孢桿菌復合制劑稀釋的倍數為50
?
60倍。
[0018]進一步的，所述芽孢桿菌復合制劑能夠快速分解養殖水體有機質，提高水體透明度，進而改善養殖池塘水質。
[0019]與現有技術相比，本專利技術的優點和技術效果是：
[0020]本專利技術的蠟樣芽孢桿菌J19同時具有萌發速度快、抑制水產病原菌的特性，擴培過程可快速成為優勢菌，有效減少雜菌污染，提高擴培成功率，同時專用培養基經過科學配比，極適合該菌的生長，擴培周期短(16
?
20h)，菌株特性結合擴培條件控制，克服了開放式好氧發酵過程中的染菌問題。
[0021]此外，本專利技術解決了大水面水產養殖中因水面面積大，直接芽孢產品成本無法接受的問題，擴培后降低了畝使用成本，而且擴培后芽孢萌發為營養體，潑灑到水體后起效快，可快速分解養殖水體有機質，提高水體透明度，達到凈水的目的。
附圖說明
[0022]圖1為蠟樣芽孢桿菌J19培養2h染色鏡檢；
[0023]圖2為蠟樣芽孢桿菌J19對副溶血弧菌和溶藻弧菌的抑菌圈；
[0024]圖3為蠟樣芽孢桿菌J19在不同鹽度下生長曲線；
[0025]圖4為蠟樣芽孢桿菌J19的產蛋白酶水解圈；
[0026]圖5為蠟樣芽孢桿菌復合制劑養殖現場擴培操作圖；
[0027]圖6為蠟樣芽孢桿菌復合制劑擴培17h鏡檢；
[0028]圖7為使用蠟樣芽孢桿菌復合制劑擴培液后水體透明度變化；
[0029]圖8為使用蠟樣芽孢桿菌復合制劑擴培液后水體外觀變化。
具體實施方式
[0030]結合以下具體實例對本專利技術的技術方案作進一步詳細的說明。
[0031]蠟樣芽孢桿菌J19的保藏單位：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)；地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所；保藏日期：2014年11月25日；蠟樣芽孢桿菌Bacillus cereus的保藏編號為CGMCC No.10052。
[0032]實施例1：蠟樣芽孢桿菌J19的菌株特性評估
[0033]1、蠟樣芽孢桿菌J19萌發情況
[0034]取蠟樣芽孢桿菌J19菌粉(菌量5.0
×
10
10
CFU/g)及同等含量的普通蠟樣芽孢桿菌菌粉1.00g加入滅菌的盛有100ml LB液體培養基的250mL錐形瓶中，置于30℃，200r/min搖床上培養2h后取樣。采用結晶紫染色鏡檢，同時將培養液75℃水浴20min，采用營養瓊脂進
行平板涂布計數芽孢含量以推算芽孢萌發率。
[0035]試驗結果表明(圖1)，蠟樣芽孢桿菌J19培養2h鏡檢視野中大部分為營養體形態，少部分為芽孢形態，而普通蠟樣芽孢桿菌視野中僅有芽孢一種形態，與初始添加量相比，蠟樣芽孢桿菌J19的2h發酵液計數芽孢含量32.5％，即萌發率67.5％，而普通蠟樣芽孢桿菌萌發率僅為3.4％。說明蠟樣芽孢桿菌J19萌發速度明顯比普通蠟樣芽孢桿菌快，在擴培過程中可迅速占位，縮減雜菌生存空間。
[0036]2、蠟樣芽孢桿菌J19抑菌效果評估...

【技術保護點】

【技術特征摘要】
1.一種用于塘口擴培的芽孢桿菌復合制劑，其特征在于：所述芽孢桿菌復合制劑中含有蠟樣芽孢桿菌粉、豆粕、酵母浸粉、玉米皮粉、磷酸一銨、氯化銨、硫酸錳、中性蛋白酶。2.根據權利要求1所述的芽孢桿菌復合制劑，其特征在于：所述芽孢桿菌復合制劑的配方及其配比為：按重量份數計，蠟樣芽孢桿菌粉5
?
15份、豆粕35
?
40份、酵母浸粉5
?
10份、玉米皮粉5
?
10份、磷酸二氫銨2
?
5份、氯化銨2
?
5份、硫酸錳0.2
?
0.5份、中性蛋白酶0.002
?
0.005份，余量為葡萄糖。3.根據權利要求1所述的芽孢桿菌復合制劑，其特征在于：所述蠟樣芽孢桿菌粉是由保藏編號為CGMCC No.10052的蠟樣芽孢桿菌J19經液體發酵、噴霧干燥制得的，其菌量不低于5.0
×
10
10
CFU/g。4.根據權利要求3所述的芽孢桿菌復合制劑，其特征在于：所述蠟樣芽孢桿菌J19萌發速度快、萌發率高，耐受0～50
‰
的鹽度，并能夠抑制水產病原菌和分解有機質。5.根據權利要求1...

【專利技術屬性】
技術研發人員：劉寶同，梁晶晶，郭衍林，張婷婷，孟凡奎，李培根，梁奕，張宗國，
申請(專利權)人：青島根源生物技術集團有限公司，
類型：發明
國別省市：