一種鹿血檢測試劑盒制造技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)涉及一種鹿血檢測試劑盒，包括底板、粘貼在底板中部的層析膜、粘貼在底板上部的吸水紙、粘貼在底板下部的樣品墊，樣品墊和層析膜之間粘貼有膠體金墊，吸水紙和膠體金墊均有部分覆蓋在層析膜上，樣品墊有部分覆蓋在膠體金墊上，膠體金墊上附著有鼠源抗鹿源特異性單克隆抗體，層析膜上包被有形成檢測線的與膠體金墊中的抗體具有不同表位的鼠源抗鹿源特異性蛋白單克隆抗體、形成質(zhì)控線的山羊抗鼠源IgG多克隆抗體，檢測線和質(zhì)控線的間距是3

【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
一種鹿血檢測試劑盒


[0001]本專利技術(shù)涉及食品檢測，尤其是一種鹿血檢測試劑盒。

技術(shù)介紹

[0002]鹿血是一種名貴中藥材，被應(yīng)用于很多藥方和保健品中，但由于藥用的鹿血主要來源于人工飼養(yǎng)的梅花鹿或馬鹿，其來源稀少，又由于在醫(yī)藥和保健上鹿血產(chǎn)品具有良好的效果，在各地的市場上，出現(xiàn)銷售假冒偽劣鹿血的現(xiàn)象，目前鹿血與其他動物血液的區(qū)別主要借助于經(jīng)驗和眼觀，這就需要經(jīng)驗的積累，由于經(jīng)驗的以及檢驗方法的主觀影響比較大，常常會出現(xiàn)無法確定其真?zhèn)位驒z驗結(jié)果不準(zhǔn)確的問題出現(xiàn)，影響人們的使用。

技術(shù)實現(xiàn)思路

[0003]針對現(xiàn)有的不足，本專利技術(shù)提供一種鹿血檢測試劑盒。
[0004]本專利技術(shù)解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是：一種鹿血檢測試劑盒，包括表面帶有粘性的PVC底板、粘貼在底板中部的由NC膜制成的層析膜、粘貼在底板上部的吸水紙、粘貼在底板下部的樣品墊，所述樣品墊和層析膜之間粘貼有膠體金墊，所述吸水紙和膠體金墊均有部分覆蓋在層析膜上，所述樣品墊有部分覆蓋在膠體金墊上，所述膠體金墊上附著有濃度為5
?
20μg/ml的鼠源抗鹿源特異性單克隆抗體，所述層析膜上包被有形成檢測線的與膠體金墊中的抗體具有不同表位的濃度為0.5
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2mg/ml的鼠源抗鹿源特異性蛋白單克隆抗體、形成質(zhì)控線的濃度為0.5
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2mg/ml的山羊抗鼠源IgG多克隆抗體，所述檢測線和質(zhì)控線的間距是3
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5mm。
[0005]作為優(yōu)選，所述檢測線和質(zhì)控線的劃線寬度是0.8
±
0.1mm,包被的抗體的量均是1μl/cm。
[0006]作為優(yōu)選，所述膠體金墊通過如下方法制得：
[0007]S1a，制取膠體金溶液，以碳酸鉀溶液調(diào)節(jié)其pH值為7.4；
[0008]S1b，加入鼠源抗鹿源特異性單克隆抗體，攪拌、靜置，在攪拌的同時滴加BSA；
[0009]S1c，將前述步驟制得的金標(biāo)抗體低溫離心，去除大顆粒和上清液中的未標(biāo)記蛋白，用稀釋液復(fù)溶制得金標(biāo)單克隆抗體溶液；
[0010]S1d，用噴金儀將金標(biāo)單克隆抗體溶液噴在聚酯薄膜上，干燥即得膠體金墊，且每4x5mm面積的膠體金墊噴涂的膠體金溶液的量為450ng。
[0011]作為優(yōu)選，所述檢測線靠近樣膠體金墊一側(cè)，所述質(zhì)控線靠近吸水紙一側(cè)。
[0012]作為優(yōu)選，所述層析膜通過如下方法制得：將純化過后的鼠源抗鹿源特異性蛋白單克隆抗體、山羊抗鼠源IgG多克隆抗體，用緩沖液分別稀釋成濃度為0.5
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2mg/ml的包被液，之后將包被液分別加入劃膜儀加樣槽中，以給定的劃線寬度在NC膜上進(jìn)行包被形成層析膜，包被完畢將層析膜在指定溫濕度下放置至少15小時。
[0013]作為優(yōu)選，所述樣品墊是經(jīng)過20
?
100mM、pH值為7.6
?
8.2的磷酸鹽緩沖液或Tris
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HCl緩沖液處理過的玻璃纖維棉材質(zhì)。
[0014]作為優(yōu)選，所述吸水紙和膠體金墊覆蓋在層析膜上的長度是1
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2mm，所述樣品墊覆蓋在膠體金墊上的長度也是1
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2mm。
[0015]本專利技術(shù)的有益效果在于：該專利技術(shù)采用免疫學(xué)競爭法和膠體金的標(biāo)記技術(shù)，能快速精確的檢測鹿血的真假，檢測靈敏度高、特異性強，在NC膜上分別預(yù)包被鼠源抗鹿源特異性蛋白單克隆抗體作為檢測線、山羊抗鼠源IgG多克隆抗體作為質(zhì)控線，樣本中的蛋白預(yù)先和膠體金墊中的偶聯(lián)膠體金顆粒抗體相結(jié)合，再和NC膜上預(yù)包被的抗體結(jié)合，如樣品中含有目的蛋白則相應(yīng)的T線會顯色，如無目的蛋白則相應(yīng)的T線不顯色，能精確的檢測鹿血是否摻假，檢測方便易于操作，檢測結(jié)果也更準(zhǔn)確，更有說服力。
具體實施方式
[0016]為了更清楚地說明本專利技術(shù)實施例的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點，下面將結(jié)合實施例對本專利技術(shù)作進(jìn)一步說明，進(jìn)行清楚、完整的描述，顯然，所描述的實施例是本專利技術(shù)的部分實施例，而不是全部實施例。基于本專利技術(shù)的實施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有付出創(chuàng)造性勞動的前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本專利技術(shù)的保護(hù)范圍。
[0017]本專利技術(shù)實施例，一種鹿血檢測試劑盒，包括表面帶有粘性的PVC底板、粘貼在底板中部的由NC膜制成的層析膜、粘貼在底板上部的吸水紙、粘貼在底板下部的樣品墊，所述樣品墊和層析膜之間粘貼有膠體金墊，所述吸水紙和膠體金墊均有部分覆蓋在層析膜上，所述樣品墊有部分覆蓋在膠體金墊上,即在底板的中間粘貼層析膜，然后在層析膜上表面的兩端對應(yīng)搭接，也就是部分覆蓋粘貼膠體金墊和吸水紙，最后再在膠體金墊遠(yuǎn)離層析膜一端的上表面搭接樣品墊，吸水紙和膠體金墊覆蓋在層析膜上的長度是1
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2mm，所樣品墊覆蓋在膠體金墊上的長度也是1
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2mm，即吸水紙和膠體金墊搭接在層析膜上的長度，以及樣品墊搭接在膠體金墊上的長度都是1
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2mm，既保證了兩者之間的連接又不會影響到檢測溶液在其上的遷移，樣品墊是經(jīng)過20
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100mM、pH值為7.6
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8.2的磷酸鹽緩沖液或Tris
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HCl緩沖液處理過的玻璃纖維棉材質(zhì)，所述膠體金墊上附著有濃度為5
?
20μg/ml的鼠源抗鹿源特異性單克隆抗體，膠體金墊通過如下方法制得：S1a，制取膠體金溶液，以碳酸鉀溶液調(diào)節(jié)其pH值為7.4；S1b，加入鼠源抗鹿源特異性單克隆抗體，攪拌、靜置，在攪拌的同時滴加BSA；S1c，將前述步驟制得的金標(biāo)抗體低溫離心，去除大顆粒和上清液中的未標(biāo)記蛋白，用稀釋液復(fù)溶制得膠體金標(biāo)記單克隆抗體的溶液；S1d，用噴金儀將金標(biāo)單克隆抗體溶液噴在聚酯薄膜上，干燥即得膠體金墊，且每4x5mm面積的膠體金墊噴涂的膠體金溶液的量為450ng，即取制備好的膠體金溶液100ml加入燒杯中，并以0.2M的碳酸鉀溶液調(diào)節(jié)其pH為7.4，然后加入0.5mg鼠源抗鹿源特異性單克隆抗體，磁力攪拌30min，然后靜置30min，其中在攪拌過程中逐滴加入2ml的5％的BSA，之后將混合有鼠源抗鹿源特異性單克隆抗體的溶液在1000rpm下低溫離心30min，除去大的顆粒，接著再12000rpm下離心1h，離心完畢，就除去上層清液中未被標(biāo)記的蛋白，沉淀就用稀釋液稀釋至原體積的1/10，也就是復(fù)溶后就得膠體金標(biāo)記單克隆抗體的溶液，最后將該抗體溶液利用噴金儀噴涂的聚酯薄膜上，形成膠體金墊；所述層析膜上包被有形成檢測線的與膠體金墊中的抗體具有不同表位的濃度為0.5
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2mg/ml的鼠源抗鹿源特異性蛋白單克隆抗體、形成質(zhì)控線的濃度為0.5
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2mg/ml的山羊抗鼠源IgG多克隆抗體，所述檢測線和質(zhì)控線的間距是3
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5mm，檢測線和質(zhì)控線的劃線寬度是0.8mm,包被的抗體的量均是1μl/cm，檢測線是靠近樣膠體金墊一側(cè)，質(zhì)控線是靠近吸水紙一側(cè)，就形成一個方便使
用的能快捷檢測的檢測試條，層析膜則通過如下本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點】

【技術(shù)特征摘要】
1.一種鹿血檢測試劑盒，其特征在于：包括表面帶有粘性的PVC底板、粘貼在底板中部的由NC膜制成的層析膜、粘貼在底板上部的吸水紙、粘貼在底板下部的樣品墊，所述樣品墊和層析膜之間粘貼有膠體金墊，所述吸水紙和膠體金墊均有部分覆蓋在層析膜上，所述樣品墊有部分覆蓋在膠體金墊上，所述膠體金墊上附著有濃度為5
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20μg/ml的鼠源抗鹿源特異性單克隆抗體，所述層析膜上包被有形成檢測線的與膠體金墊中的抗體具有不同表位的濃度為0.5
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2mg/ml的鼠源抗鹿源特異性蛋白單克隆抗體、形成質(zhì)控線的濃度為0.5
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2mg/ml的山羊抗鼠源IgG多克隆抗體，所述檢測線和質(zhì)控線的間距是3
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5mm。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述鹿血檢測試劑盒，其特征在于:所述檢測線和質(zhì)控線的劃線寬度是0.8
±
0.1mm,包被的抗體的量均是1μl/cm。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述鹿血檢測試劑盒，其特征在于:所述膠體金墊通過如下方法制得：S1a，制取膠體金溶液，以碳酸鉀溶液調(diào)節(jié)其pH值為7.4；S1b，加入鼠源抗鹿源特異性單克隆抗體，攪拌、靜置，在攪拌的同時滴加BSA；S1c，將前述步驟制得的金標(biāo)抗體低溫離心，去除大顆粒和上清液中的...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：詹愛軍，單君憶，
申請(專利權(quán))人：揚州千代科技有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：