一種尿素檢測試劑盒制造技術

本發明專利技術提供了一種尿素檢測試劑盒，屬于醫學檢驗技術領域，該試劑盒包括試劑1和試劑2以及校準品和質控品。試劑1中主要成分：緩沖液、α

【技術實現步驟摘要】
一種尿素檢測試劑盒


[0001]本專利技術屬于生物檢測領域，具體涉及一種尿素檢測試劑盒。

技術介紹

[0002]尿素是人體內氨基酸分解代謝的最終產物之一。血中尿素來源于肝臟，通過腎臟隨尿排出體外。各種腎臟類、肝臟類疾病可通過檢測血中尿素的含量來輔助診斷。
[0003]目前，血中尿素的檢測主要采用脲酶
?
谷氨酸脫氫酶法，該診斷試劑直接應用生化儀可檢測血清中尿素含量，具有快速、精準的優勢。
[0004]反應原理：尿素在脲酶的作用下產生銨離子，銨離子、α
?
酮戊二酸和還原型輔酶Ⅰ在谷氨酸脫氫酶催化下產生谷氨酸和氧化型輔酶Ⅰ，在340nm處測定還原型輔酶Ⅰ吸光度的下降速率，與樣本中尿素含量呈正比。谷氨酸脫氫酶的活性直接影響反應結果，使用過程中谷氨酸脫氫酶活性的降低會導致試劑性能下降，影響檢測結果。

技術實現思路

[0005]針對以上技術問題，本專利技術旨在提供了一種檢測性能穩定的尿素檢測試劑盒。
[0006]為了實現上述專利技術目的，本專利技術提供以下技術方案：
[0007]一種尿素檢測試劑盒，該試劑盒包括試劑1、試劑2以及校準品、質控品，其中所述試劑1主要成分有：Tris
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琥珀酸緩沖液(pH9.6),α
?
酮戊二酸，谷氨酸脫氫酶(GLDH)，谷氨酸脫氫酶(GLDH)變構激活劑，還原型輔酶I(NADH)，所述試劑2主要成分有三羥甲基氨基甲烷(Tris)緩沖液(pH7.8)，α
?
酮戊二酸，尿素酶，牛血清白蛋白(BSA)。
[0008]進一步地，所述試劑1中：Tris
?
琥珀酸緩沖液(pH9.6)濃度100
?
200mmol/L，α
?
酮戊二酸濃度5.0
?
10.0mmol/L，谷氨酸脫氫酶(GLDH)濃度0.5
?
3.0KU/L，還原型輔酶I(NADH)濃度0.1
?
0.5mmol/L。
[0009]進一步地，所述試劑1中Tris
?
琥珀酸緩沖液(pH9.6)最佳選擇濃度115mmol/L,α
?
酮戊二酸最佳選擇濃度8mmol/L，谷氨酸脫氫酶(GLDH)最佳選擇濃度0.8KU/L，還原型輔酶I(NADH)最佳選擇濃度0.35mmol/L。
[0010]進一步地，所述試劑2中：三羥甲基氨基甲烷(Tris)緩沖液(pH7.8)濃度：40
?
150mmol/L，α
?
酮戊二酸濃度：5
?
15mmol/L，尿素酶(URH)濃度：20
?
50KU/L，牛血清白蛋白(BSA)濃度：0.8
?
1.5g/L。
[0011]進一步地，所述試劑2中：三羥甲基氨基甲烷(Tris)緩沖液(pH7.8)最佳選擇濃度115mmol/L，α
?
酮戊二酸最佳選擇濃度8mmol/L，尿素酶(URH)最佳選擇濃度40KU/L，牛血清白蛋白(BSA)最佳選擇濃度1g/L。
[0012]進一步地，所述谷氨酸脫氫酶(GLDH)變構激活劑為二磷酸腺苷(ADP)、鳥嘌呤二核苷酸磷酸(GDP)中的一種或兩種。
[0013]進一步地，所述谷氨酸脫氫酶(GLDH)變構激活劑的濃度為0.1mg/L
?
5mg/L。
[0014]本試劑盒用于檢測人血清中尿素量，試劑盒2℃～8℃避光保存，有效期為18個月；
試劑開瓶后在2℃～8℃避光保存，60天內試劑的準確度和精密度優于不添加穩定劑。
[0015]本專利技術有益效果：
[0016]1.試劑1中添加谷氨酸脫氫酶激活劑，有效提高試劑的性能指標。試劑在開蓋60天內的檢測準確度和精密度性能優于對照組。
具體實施方式
[0017]下面通過實施例下面通過實施例的方式進一步說明本專利技術，但并不因此將本專利技術限制在所述的實施例范圍之中。
[0018]實施例1
[0019]本專利技術提供一種尿素檢測試劑盒，其主要成分如下：
[0020][0021]試驗條件：反應溫度37℃，檢測波長340nm，試劑樣本比R1：R2：S＝150:50:5。
[0022][0023]準確度：采用相對偏差計算，用濃度值4.57mmol/L的有證參考物質對試劑盒進行測定，重復測定3次，計算相對偏差。
[0024][0025]M
?
測試結果均值；T
?
有證參考物質標示值。
[0026]精密度：用高值、低值質控品重復測試10次，計算SD和CV值。
[0027]根據行標YY/T1201
?
2013尿素氮檢測試劑盒要求準確度相對偏差應不大于
±
15％；精密度不大于5.0％。
[0028]試劑用校準品定標后，在0、10天、20天、30天、40天、50天、60天分別測定準確度和精密度，結果如下。
[0029]準確度
[0030][0031]精密度
[0032][0033][0034]試驗結果表明：試劑在開蓋60天時間內，實施例1的準確度優于對照組，60天實施例1準確度偏差為1.09％、對照組偏差為5.18％，數據均在行標要求范圍，但對照組偏差大于實施例1。60天實施例1精密度測值分別為1.53％、1.34％。對照組精密度測值分別為5.60％、3.76％。對照組大于實施例1，且對照組測低值質控CV值超出行標規定值。
[0035]實施例2
[0036]本專利技術提供一種尿素檢測試劑盒，其主要成分如下：
[0037][0038]試驗條件同實施例1，試劑用校準品定標后，在0、10天、20天、30天、40天、50天、60天分別測定實施例2和不添加ADP的對照組的準確度和精密度。試驗結果：準確度和精密度隨開蓋時間增長而增大。準確度：數據均在行標要求范圍，60天時實施例2準確度偏差為1.03％、對照組偏差為5.37％，實施例2準確度、精密度均優于對照組。精密度：60天實施例1精密度測值分別為1.47％、1.45％。對照組精密度測值分別為5.76％、3.94％，對照組大于實施例2，且對照組測低值質控CV值超出行標值。
[0039]實施例3
[0040]本專利技術提供一種尿素檢測試劑盒，其主要成分如下：
[0041][0042][0043]試驗條件同實施例1，試劑用校準品定標后，在0、10天、20天、30天、40天、50天、60天分別測定實施例3和不添加GDP的對照組的準確度和精密度。試驗結果：準確度和精密度隨開蓋時間增長而增大。準確度：數據均在行標范圍，60天時實施例2準確度偏差為1.23％、對照組偏差為5.17％，實施例3準確度、精密度均優于對照組。精密度：60天實施例1精密度測值分別為1.52％、1.37％。對照組精密度測值分別為5.61％、3.69％。對照組大于本文檔來自技高網...

【技術保護點】

【技術特征摘要】
1.一種尿素檢測試劑盒，其特征在于，該試劑盒包括試劑1、試劑2以及校準品、質控品，試劑1主要成分有：Tris
?
琥珀酸緩沖液(pH9.6)，α
?
酮戊二酸，谷氨酸脫氫酶(GLDH)，谷氨酸脫氫酶(GLDH)變構激活劑，還原型輔酶I(NADH)，所述試劑2主要成分有三羥甲基氨基甲烷(Tris)緩沖液(pH7.8)，α
?
酮戊二酸，尿素酶(URH)，牛血清白蛋白(BSA)。2.如權利要求1所述的一種尿素檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑1中：Tris
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琥珀酸緩沖液(pH9.6)濃度100
?
200mmol/L，α
?
酮戊二酸濃度5.0
?
10.0mmol/L，谷氨酸脫氫酶(GLDH)濃度0.5
?
3.0KU/L，還原型輔酶I(NADH)濃度0.1
?
0.5mmol/L。3.如權利要求1或2所述的一種尿素檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑1中:Tris
?
琥珀酸緩沖液(pH9.6)最佳選擇濃度115mmol/L，α
?
酮戊二酸最佳選擇濃度8mmol/L，谷氨酸脫氫酶(...

【專利技術屬性】
技術研發人員：請求不公布姓名，
申請(專利權)人：江蘇邁源生物科技有限公司，
類型：發明
國別省市：