一種谷胱甘肽還原酶檢測試劑盒制造技術

本發明專利技術提供了一種谷胱甘肽還原酶檢測試劑盒，屬于生化檢測技術領域，該試劑盒包括試劑1、試劑2，其中試劑1主要成分有：三羥甲基氨基甲烷緩沖液(pH7.8)，乙二胺四乙酸二鈉(EDTA

【技術實現步驟摘要】
一種谷胱甘肽還原酶檢測試劑盒


[0001]本專利技術屬于生化檢測
，具體涉及一種谷胱甘肽還原酶檢測試劑盒。

技術介紹

[0002]谷胱甘肽還原酶(GR)是人體氧化還原體系中最為重要的酶之一，是維持細胞中還原型谷胱甘肽(GSH)含量的主要黃素酶，在GR催化下，氧化型谷胱甘肽與還原型輔酶II(NADPH)反應，接著轉化為還原型谷胱甘肽，后者在放置血紅蛋白的氧化分解、維持巰基蛋白的活性、保證巰基蛋白的還原性及細胞的完整性具有重要的作用。通過測定血清中的血清谷胱甘肽還原酶含量，可用于輔助診斷：(1)早期肝臟損傷，其中早期損傷可分為生理性損傷如運動導致和病理性損傷，如急性肝炎、藥物性肝損、中毒性肝炎、肝癌、肝硬化早期等；(2)血清谷胱甘肽還原酶活性明顯升高時可用于指示原發性肝細胞癌和廣泛轉移性肝腫瘤；(3)在肝臟疾病治療過程中，GR與丙氨酸氨基轉移酶和天門冬氨酸氨基轉移酶聯合使用可以對肝臟受損狀態進行動態監測；(4)惡性黃疸的鑒別診斷指標之一。
[0003]目前，目前谷胱甘肽還原酶的診斷方法有紫外酶法、谷胱甘肽底物法等，該試劑用于生化儀可檢測血清中谷胱甘肽還原酶的含量。試劑存在分析靈敏度低、檢測結果準確度不佳。性能較好的試劑配方復雜，成本高。

技術實現思路

[0004]為了解決現有技術存在的不足，本專利技術提供了一種谷胱甘肽還原酶檢測試劑盒，該試劑盒靈敏度高，可在生化儀上快速檢測血清中谷胱甘肽還原酶的含量。
[0005]本專利技術技術方案如下：一種谷胱甘肽還原酶檢測試劑盒，該試劑盒包括試劑1、試劑2，其中試劑1主要成分有：三羥甲基氨基甲烷緩沖液(pH7.8)，乙二胺四乙酸二鈉(EDTA
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2NA)，氧化型谷胱甘肽(GSSG)，試劑2主要成分有還原型輔酶II(NADPH)、三羥甲基氨基甲烷緩沖液(pH 9.2)，在試劑1中添加鎂離子。
[0006]進一步地，所述試劑1中：三羥甲基氨基甲烷緩沖液(pH7.8)濃度：50
?
500mmol/L，乙二胺四乙酸二鈉(EDTA
?
2NA)濃度：0.1
?
2mmol/L，氧化型谷胱甘肽(GSSG)濃度：0.5
?
10mmol/L。
[0007]進一步地，所述試劑1中：三羥甲基氨基甲烷緩沖液(pH7.8)濃度：100mmol/L，乙二胺四乙酸二鈉(EDTA
?
2NA)濃度：0.5mmol/L，氧化型谷胱甘肽(GSSG)濃度：2.2mmol/L。
[0008]進一步地，所述試劑2中：還原型輔酶II濃度：0.1
?
10mmol/L、三羥甲基氨基甲烷緩沖液(pH 9.2)濃度：50
?
500mmol/L。
[0009]進一步地，所述試劑2中：還原型輔酶II濃度為0.6mmol/L、三羥甲基氨基甲烷緩沖液(pH 9.2)濃度：100mmol/L。
[0010]進一步地，所述試劑1中鎂離子可以由MgCl2或MgSO4中的一種或兩種提供。
[0011]進一步地，所述MgCl2濃度：0.5
?
10mmol/L。
[0012]進一步地，所述MgSO4濃度：0.5
?
10mmol/L。
[0013]進一步地，該試劑可用于檢測人體血清中的谷胱甘肽還原酶的含量，輔助診斷早期急性肝炎，試劑與樣本比例：試劑1：試劑2：樣本＝150:50:5。
[0014]本專利技術具有如下有益效果：
[0015]本專利技術試劑盒中R1加入鎂離子，可以促進試劑反應體系的進行，試劑開瓶后在2℃～8℃避光保存，有效期30天。試劑的分析靈敏度、準確度優于不添加鎂離子的對照組。并且試劑配方簡單，成本低。
具體實施方式
[0016]下面通過實施例的方式進一步說明本專利技術，但并不因此將本專利技術限制在所述的實施例范圍之中。
[0017]實施例1
[0018]本專利技術提供一種谷胱甘肽還原酶檢測試劑盒，其主要成分如下：
[0019][0020]實施例2
[0021]本專利技術提供一種谷胱甘肽還原酶檢測試劑盒，其主要成分如下：
[0022][0023]對比實施例
[0024]該試劑組分與上述兩個實施例中試劑組分相同，不添加鎂離子。
[0025][0026]檢測方法：生化儀AU680，檢測波長340nm。
[0027]實驗方法：試劑配置好后，在0、10天、20天、30天、60天分別定標后進行測定。分析靈敏度：測定濃度為109.03U/L的活性樣本，將其吸光度改變換算成100U/L濃度下其吸光度變化(
△
A/min)比較其結果。準確度：測定濃度為68.04U/L的企業參考物質，重復測定3次，平均值為(M)，參考物質標示值(T)，相對偏差(B)，B＝(M
?
T)/T
×
100％。檢測結果見表1。
[0028]表1開瓶分析靈敏度和準確度變化
[0029][0030][0031]從實施例1、2與對比實施例數據，可以看出加入鎂離子后試劑的分析靈敏度得到了明顯的提高，同時準確度也有了一定的提高。
[0032]以上所述僅為本專利技術的較佳實施例，并不用以限制本專利技術，凡在本專利技術的精神和原則之內，所作的任何修改、等同替換、改進等，均應包含在本專利技術的保護范圍之內。
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【技術保護點】

【技術特征摘要】
1.一種谷胱甘肽還原酶檢測試劑盒，其特征在于，該試劑盒包括試劑1、試劑2，其中試劑1主要成分有：三羥甲基氨基甲烷緩沖液(pH7.8)，乙二胺四乙酸二鈉(EDTA
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2NA)，氧化型谷胱甘肽(GSSG)，試劑2主要成分有還原型輔酶II(NADPH)、三羥甲基氨基甲烷緩沖液(pH 9.2)，在試劑1中添加鎂離子。2.如權利要求1所述的一種谷胱甘肽還原酶檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑1中：三羥甲基氨基甲烷緩沖液(pH7.8)濃度：50
?
500mmol/L，乙二胺四乙酸二鈉(EDTA
?
2NA)濃度：0.1
?
2mmol/L，氧化型谷胱甘肽(GSSG)濃度：0.5
?
10mmol/L。3.如權利要求1或2所述的一種谷胱甘肽還原酶檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑1中：三羥甲基氨基甲烷緩沖液(pH7.8)濃度：100mmol/L，乙二胺四乙酸二鈉(EDTA
?
2NA)濃度：0.5mmol/L，氧化型谷胱甘肽(GSSG)濃度：2.2mmol/L。4.如權利要求1所述...

【專利技術屬性】
技術研發人員：孟廣宇，請求不公布姓名，張婷，
申請(專利權)人：江蘇邁源生物科技有限公司，
類型：發明
國別省市：