一種靈芝菌絲體與藥用菌菌絲體共發(fā)酵液的制備方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)公開了一種靈芝菌絲體與藥用菌菌絲體共發(fā)酵液的制備方法，通過靈芝菌絲體和藥用真菌菌絲體共同發(fā)酵，其發(fā)酵液的抗氧化活性顯著提高(增加1倍多)，同時發(fā)酵液還能夠產(chǎn)生具有令人愉悅的天然果香；該雙菌發(fā)酵方法具有工藝簡單、效率高、時間短、成本低等諸多優(yōu)點，易于規(guī)模生產(chǎn)，可廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)藥及日化領(lǐng)域，具有極大的開發(fā)價值。具有極大的開發(fā)價值。具有極大的開發(fā)價值。

【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
一種靈芝菌絲體與藥用菌菌絲體共發(fā)酵液的制備方法


[0001]本專利技術(shù)屬于藥用真菌深層發(fā)酵的生產(chǎn)
，可應(yīng)用食品、藥品以及化妝品領(lǐng)域，具體涉及一種靈芝菌絲體與藥用菌菌絲體共發(fā)酵液的制備方法。

技術(shù)介紹

[0002]靈芝又稱瑞草、仙草是我國中醫(yī)藥寶藏中的珍品,，靈芝是一種珍貴的藥食兼用大型真菌，其孢子、菌絲和子實體均可利用，藥用歷史悠久。《神農(nóng)本草經(jīng)》中記載：靈芝，扶正氣，久服，益壽延年，認(rèn)為靈芝是祛病延年、滋補強壯、扶正固本的珍貴藥品，可用于多種疾病的治療。目前，已經(jīng)從靈芝中分離到400余種化合物，其中多糖類、核苷類、三萜類被認(rèn)為是靈芝主要的生物活性物質(zhì)，具有抗腫瘤、抗病毒、抗衰老、抗氧化、消炎抗菌、保肝護肝、免疫調(diào)節(jié)等功能，且?guī)缀鯚o毒副作用，已在醫(yī)藥健康和化妝品領(lǐng)域廣泛應(yīng)用。
[0003]由于人工栽培靈芝的生長周期長(大于2～3個月)，受環(huán)境影響大，產(chǎn)量低、品質(zhì)不穩(wěn)定，生產(chǎn)成本高，極大地影響了靈芝及其生物活性物質(zhì)在健康產(chǎn)業(yè)中的發(fā)展。近年來隨著生物發(fā)酵技術(shù)的廣泛應(yīng)用，靈芝菌絲體液體深層發(fā)酵培養(yǎng)技術(shù)的研究與開發(fā)越來越受到業(yè)界重視，也取得了長足的發(fā)展。但在研制和生產(chǎn)實際中，人們發(fā)現(xiàn)很多重要的生化過程僅僅依靠單株菌種難以能完成或只能進行微弱的反應(yīng)，只有依靠2種或多種微生物菌種共同培養(yǎng)發(fā)酵才能實現(xiàn)，即為混菌培養(yǎng)或混菌發(fā)酵。目前微生物混菌發(fā)酵在代謝產(chǎn)物的生產(chǎn)中已有應(yīng)用，如氨基酸、有機酸、維生素等的生產(chǎn)。近年來采用米曲霉、納豆芽孢桿菌2株菌種混菌發(fā)酵制作納豆，可釀出不僅具有較高納豆激酶活性和氨基酸含量，而且還具有中國傳統(tǒng)豆豉香味的納豆。
[0004]基于此，本專利技術(shù)旨在提供一種靈芝菌絲體與藥用菌菌絲體共發(fā)酵液的制備方法，通過兩種藥用真菌的共同培養(yǎng)發(fā)酵及協(xié)同作用完成其生理生化發(fā)酵過程，提高其藥理活性成分及含量，甚至產(chǎn)生新的功效組分。靈芝等雙菌共培養(yǎng)發(fā)酵技術(shù)，可縮短活性成分的制備時間，有效降低生產(chǎn)成本，進一步促進靈芝等我國珍稀藥用真菌在功能食品、醫(yī)藥、化妝品以及個人護理用品中的開發(fā)和應(yīng)用。

技術(shù)實現(xiàn)思路

[0005]本專利技術(shù)的目的在于提供一種靈芝菌絲體與藥用菌菌絲體共發(fā)酵液的制備方法，通過該方法使得靈芝菌絲體與藥用菌菌絲體之間相互促進發(fā)酵，可顯著提高其發(fā)酵液的生物活性。
[0006]為了實現(xiàn)上述的目的，本專利技術(shù)提供如下技術(shù)方案：
[0007]本專利技術(shù)靈芝菌絲體與藥用菌菌絲體共發(fā)酵液的制備方法，包括如下步驟：
[0008]步驟1：靈芝菌絲體的培養(yǎng)
[0009]1a、菌種活化：將靈芝母種接種于PDA固體培養(yǎng)基上，28℃恒溫靜置培養(yǎng)6
?
8d；
[0010]1b、種子液發(fā)酵培養(yǎng)：用接種鏟從1a活化后的靈芝菌固體培養(yǎng)基上切取2
?
3塊0.5
×
0.5cm2的菌塊，接入100mL靈芝菌種子液培養(yǎng)基中，于28℃、120r/min條件下，恒溫?fù)u床培
養(yǎng)6
?
8d；
[0011]本專利技術(shù)選用的靈芝母種為赤芝。
[0012]步驟2：藥用菌菌菌絲體的培養(yǎng)
[0013]2a、菌種活化：將藥用菌母種接種于PDA固體培養(yǎng)基上，28℃恒溫靜置培養(yǎng)10
?
15d；
[0014]2b、種子液發(fā)酵培養(yǎng)：用接種鏟從2a活化后的藥用菌固體培養(yǎng)基上切取1塊1
×
1cm2的菌塊，接種到500mL的藥用菌菌絲體液態(tài)培養(yǎng)基中，在28℃的恒溫箱中靜置培養(yǎng)12d；
[0015]所述藥用菌菌種購于中國農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心，為假蜜環(huán)菌Armillariella tabescens(Scop.exFr.)Sing，其菌種庫編號為ACCC51415。
[0016]步驟3：共發(fā)酵培養(yǎng)
[0017]將1b獲得的種子液加到步驟2b獲得的種子液中，于28
?
30℃、120r/min條件下，恒溫?fù)u床培養(yǎng)14d；發(fā)酵結(jié)束后，收集發(fā)酵液，于8000rpm離心5
?
10min，收集上清液，真空冷凍干燥后得到發(fā)酵液粉末。
[0018]優(yōu)選地，步驟1b中，靈芝菌種子液培養(yǎng)基的構(gòu)成為：葡萄糖30g/L，酵母粉3g/L，磷酸二氫鉀1.5g/L，無水硫酸鎂0.75g/L，維生素B10.03 g/L。
[0019]優(yōu)選地，步驟2b中，藥用菌菌絲體液態(tài)培養(yǎng)基的構(gòu)成為：葡萄糖25g/L，土豆150g/L。具體制備過程如下：150g土豆去皮切碎，煮沸30min，6層紗布過濾，加入25g葡萄糖，加水至1000mL，121℃滅菌20min制得葡萄糖
?
土豆培養(yǎng)基。
[0020]優(yōu)選地，步驟3中，以接種量2
?
5％將1b獲得的種子液加到步驟2b獲得的種子液中。
[0021]本專利技術(shù)獲得的發(fā)酵液或者發(fā)酵液粉末可以用于制備抗氧化制劑，以應(yīng)用于食品、藥品以及化妝品領(lǐng)域。
[0022]本專利技術(shù)的有益效果體現(xiàn)在：
[0023]1、提供一種靈芝菌絲體和藥用菌菌絲體共同發(fā)酵的方法，使其發(fā)酵液的抗氧化活性提高了1倍多，使其發(fā)酵液具有天然香味。在食品、藥品以及化妝品領(lǐng)域具有顯著的應(yīng)用價值。
[0024]2、采用液體深層發(fā)酵技術(shù)，其具有發(fā)酵周期短、生產(chǎn)工藝簡單、成本低等特點，具有顯著的開發(fā)應(yīng)用前景。
附圖說明
[0025]圖1為試驗例1的DPPH自由基清除活性圖。
[0026]圖2為靈芝菌種ITSrDNA種屬鑒定報告。
具體實施方式
[0027]下面結(jié)合實施例對本專利技術(shù)作進一步說明。以下實施例將有助于本領(lǐng)域的技術(shù)人員進一步理解本專利技術(shù)，但不以任何形式限制本專利技術(shù)。應(yīng)當(dāng)指出的是，對本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本專利技術(shù)構(gòu)思的前提下，還可以做出若干變形和改進。這些都屬于本專利技術(shù)的保護范圍。
[0028]菌種來源：
[0029]本專利技術(shù)所用的靈芝菌種(Ganoderma Sichuanense)來自安徽省合肥立新菌種場(靈芝菌種ITSrDNA種屬鑒定報告見圖2)。
[0030]本專利技術(shù)所用的藥用菌菌種購于中國農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心，為假蜜環(huán)菌Armillariella tabescens(Scop.exFr.)Sing，其菌種庫編號為ACCC51415。
[0031]下述實施例所用靈芝菌絲體和藥用菌菌絲體按照如下步驟進行預(yù)處理：
[0032]發(fā)酵過程首先將菌種活化，使其保持更高的活力，然后將菌純化，并擴培。具體過程如下：
[0033]靈芝菌種活化：將靈芝母種接種于PDA固體培養(yǎng)基上，28℃恒溫靜置培養(yǎng)6
?
8d。
[0034]藥用菌菌種活化：將藥用菌母種接種于PDA固體培養(yǎng)基上，28℃恒溫靜置培養(yǎng)10
?
15d。
[0035]實施例1：
[0036]一種靈芝菌絲體和藥用菌菌絲體共同發(fā)酵的方法，包括如下步驟：
[0037]步驟1：靈芝菌絲體種子液：用接種鏟從上述預(yù)處理的靈芝菌固體培養(yǎng)本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護點】

【技術(shù)特征摘要】
1.一種靈芝菌絲體與藥用菌菌絲體共發(fā)酵液的制備方法，其特征在于：將靈芝菌絲體與藥用菌菌絲體共同培養(yǎng)發(fā)酵，通過靈芝菌絲體與藥用菌菌絲體之間相互協(xié)同促進發(fā)酵，顯著提高其發(fā)酵液的生物活性；所述藥用菌菌種購于中國農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心，為假蜜環(huán)菌Armillariella tabescens(Scop.exFr.)Sing，菌種庫編號為ACCC51415。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于包括如下步驟：步驟1：靈芝菌絲體的培養(yǎng)1a、菌種活化：將靈芝母種接種于PDA固體培養(yǎng)基上，28℃恒溫靜置培養(yǎng)6
?
8d；1b、種子液發(fā)酵培養(yǎng)：用接種鏟從1a活化后的靈芝菌固體培養(yǎng)基上切取2
?
3塊0.5
×
0.5cm2的菌塊，接入100mL靈芝菌種子液培養(yǎng)基中，于28℃、120r/min條件下，恒溫?fù)u床培養(yǎng)6
?
8d；步驟2：藥用菌菌菌絲體的培養(yǎng)2a、菌種活化：將藥用菌母種接種于PDA固體培養(yǎng)基上，28℃恒溫靜置培養(yǎng)10
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15d；2b、種子液發(fā)酵培養(yǎng)：用接種鏟從2a活化后的藥用菌固體培養(yǎng)基上切取1塊1
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【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：陳彥，閆冬梅，章俊強，朱石磊，胡洪青，黃宇哲，陳潔琳，鄧海蘭，李勇，郝允博，陳詩婷，陳浩，閆超，
申請(專利權(quán))人：安徽大學(xué)綠色產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新研究院，
類型：發(fā)明
國別省市：