一種連續式酶法制備頭孢克洛的方法技術

本發明專利技術提供了一種連續式酶法制備頭孢克洛的方法，包括如下步驟：將D

【技術實現步驟摘要】
一種連續式酶法制備頭孢克洛的方法


[0001]本專利技術涉及一種酶法制備頭孢克洛的方法，尤其是涉及一種連續式酶法制備頭孢克洛的方法。

技術介紹

[0002]頭孢克洛是一種半合成的第二代口服頭孢菌素類抗生素藥物，頭孢克洛自1979年獲FDA批準，1982年在美國成功上市以來，因其具有廣譜、高效和良好的臨床安全性，已成為目前治療細菌感染的重要藥物之一。
[0003]頭孢克洛的制備方法通常是采用7
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氨基
?3?
氯
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頭孢烯酸（7
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ACCA）與活化的D
?
苯甘氨酸通過化學縮合或酶法縮合制備得到。與化學法相比，酶法由于酶的特異性和專一性，具有合成轉化率高、對環境友好、生產成本低等優點。但是，當前酶法制備頭孢克洛通常是以罐式的間歇性生產工藝為主（生產流程圖見圖1），不能實現連續生產，且制備過程以固
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固
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液(即7
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ACCA/頭孢克洛
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酰化酶
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母液)共存反應方式為主，導致反應液粘稠，流動性差，濃度不均，局部pH偏高，副反應多、分離困難。因此，開發一種連續式的酶法合成頭孢克洛的方法，解決上述問題，對于頭孢克洛的擴大生產具有十分重要的意義。

技術實現思路

[0004]本專利技術的目的在于提供一種連續式酶法制備頭孢克洛的方法，以解決現有間歇式生產工藝存在的反應液粘稠，流動性差，濃度不均，局部pH偏高，副反應多、分離困難等問題。
[0005]為實現上述目的，本專利技術的技術方案為：一種連續式酶法制備頭孢克洛的方法，包括如下步驟：將D
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苯甘氨酸甲酯溶液與7
?
ACCA溶液混合均勻，調節混合液pH值為7.0~7.3，維持20~25℃；將混合液連續通過青霉素酰化酶柱進行縮合反應，得縮合液；調節縮合液pH值為1.0~1.5，并將其連續通過活性炭柱和氧化鋁柱，再經微濾，得頭孢克洛溶液；將頭孢克洛溶液進行納濾濃縮，得到濃度為100~200mg/mL的濃縮液；濃縮液再經脫色、過濾、結晶、過濾、洗滌、干燥，即得頭孢克洛產品。
[0006]所述D
?
苯甘氨酸甲酯溶液的溶劑為甲醇，溶液濃度為：1.48
?
1.54g/L。
[0007]所述7
?
ACCA溶液的溶劑為水，溶液濃度為：1g/L。
[0008]D
?
苯甘氨酸甲酯與7
?
ACCA的質量比為74
?
77 : 100。
[0009]所述混合液在青霉素酰化酶柱中的停留時間為3~15min；所述縮合液在活性炭柱和氧化鋁柱中的停留時間合計為5~15min。
[0010]結晶時的物料pH值3.4~4.0。結晶后經過濾所得母液返回活性炭柱和氧化鋁柱進行循環。
[0011]本專利技術方法制備的頭孢克洛產品粒度：D（90）50
?
100μm，產品堆密度：≥0.50g/ml ，雜質E≤0.5%。
[0012]本專利技術采用低濃度酰化酶柱式反應解決了現有間歇式生產工藝以固
?
固
?
液共存反應方式導致的反應液粘稠，流動性差，濃度不均，局部pH偏高，副反應多、分離困難等問題，通過將結晶液濃度提高，保證收率。同時，本專利技術方法實現了連續反應，減少了物料在高pH值時的時間，避免了頭孢克洛溶解的過程，減少降解。
[0013]另外，本專利技術頭孢克洛母液直接套用，替代了酶解克洛或者形成復鹽回收克洛的方式，避免了反復結晶、反復合成的問題，提高了收率和穩定性。
附圖說明
[0014]圖1為罐式間歇性生產工藝流程示意圖。
[0015]圖2為本申請的連續性生產工藝流程示意圖。
具體實施方式
[0016]下面結合具體實施例對本專利技術的技術方案進行清楚、完整地描述。
[0017]在以下各實施例中，未詳細描述的各種過程和方法是本領域中公知的常規方法，所用試劑未標明來源和規格的均為市售分析純或色譜純。
[0018]實施例1一種連續式酶法制備頭孢克洛的方法，包括如下步驟：（1）D
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苯甘氨酸甲酯溶液的配制74gD
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苯甘氨酸甲酯溶解于50L甲醇溶液中，攪拌均勻，維持20~25℃。
[0019]（2）7
?
ACCA溶液的配制100g7
?
ACCA溶解于100L水中，攪拌均勻，維持20~25℃。
[0020]（3）將上述兩種溶液混合攪拌均勻，得混合液，并調節混合液pH值為7.0~7.3，維持20~25℃。
[0021]（4）將上述混合液連續通過青霉素酰化酶柱，停留時間3~15min，進行縮合反應，得到縮合液。
[0022]（5）調節縮合液pH值為1.0~1.5，連續經過活性炭柱和氧化鋁柱，保留時間5~15min，再經過0.45微米濾芯過濾，得到頭孢克洛溶液。
[0023]（6）將上述頭孢克洛溶液進行納濾濃縮，至濃度為100mg/mL，得到濃縮液。
[0024]（7）濃縮液經活性炭柱脫色過濾，得到脫色液。
[0025]（8）脫色液連續進入結晶罐，調節pH值3.4~4.0，進行結晶。
[0026]（9）過濾、洗滌、干燥，得到頭孢克洛原料藥，母液進入活性炭柱和氧化鋁柱進行循環。
[0027]所得頭孢克洛產品純度99.8%以上，摩爾收率84.8%以上，最大未知單雜0.2%以下。
[0028]實施例2一種連續式酶法制備頭孢克洛的方法，包括如下步驟：（1）D
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苯甘氨酸甲酯溶液的配制77gD
?
苯甘氨酸甲酯溶解于50L甲醇溶液中，攪拌均勻，維持20~25℃。
[0029]（2）7
?
ACCA溶液的配制100g7
?
ACCA溶解于100L水中，攪拌均勻，維持20~25℃。
[0030]（3）將上述兩種溶液混合攪拌均勻，得混合液，并調節混合液pH值為7.0~7.3，維持20~25℃。
[0031]（4）將上述混合液連續通過青霉素酰化酶柱，停留時間3~15min，進行縮合反應，得到縮合液。
[0032]（5）調節縮合液pH值為1.0~1.5，連續經過活性炭柱和氧化鋁柱，保留時間5~15min，經過0.45微米濾芯過濾，得到頭孢克洛溶液。
[0033]（6）將上述頭孢克洛溶液進行納濾濃縮，至濃度為200mg/mL，得到濃縮液。
[0034]（7）濃縮液經活性炭柱脫色過濾，得到脫色液。
[0035]（8）脫色液連續進入結晶罐，調節pH值3.4~4.0，進行結晶。
[0036]（9）過濾、洗滌、干燥，得到頭孢克洛原料藥，母液進入活性炭柱和氧化鋁柱進行循環。
[0037]所得頭孢克洛產品純度99.8%以上，摩爾收率9本文檔來自技高網...

【技術保護點】

【技術特征摘要】
1.一種連續式酶法制備頭孢克洛的方法，其特征是，包括如下步驟：將D
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苯甘氨酸甲酯溶液與7
?
ACCA溶液混合均勻，調節混合液pH值為7.0~7.3，維持20~25℃；將混合液連續通過青霉素酰化酶柱進行縮合反應，得縮合液；調節縮合液pH值為1.0~1.5，并將其連續通過活性炭柱、氧化鋁柱，再經微濾，得頭孢克洛溶液；將頭孢克洛溶液進行納濾濃縮，得到濃度為100~220mg/mL的濃縮液；濃縮液再經脫色、過濾、結晶、過濾、洗滌、干燥，即得頭孢克洛產品。2.根據權利要求1所述的連續式酶法制備頭孢克洛的方法，其特征是，所述D
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苯甘氨酸甲酯溶液的溶劑為甲醇，溶液濃度為：1.48
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1.54g/L。3.根據權利要求1所述的連續式酶法制備頭孢克洛的方法，其特征是，所述7
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ACCA溶液的溶劑為水，溶液濃度為：1g/L。4.根據權利要求1所...

【專利技術屬性】
技術研發人員：張民，劉榮亮，王玉軍，王利杰，柳國寧，呂動晨，楊夢德，劉云坡，楊宏碩，賈玉捷，谷海澤，馬亞松，
申請(專利權)人：華北制藥河北華民藥業有限責任公司，
類型：發明
國別省市：