用于治療自身免疫性疾病的單倍體相合混合嵌合狀態(tài)制造技術(shù)

公開了通過誘導(dǎo)單倍體相合混合嵌合狀態(tài)治療或預(yù)防自身免疫性疾病的方法和通過誘導(dǎo)單倍體相合混合嵌合狀態(tài)的預(yù)處理方案。單倍體相合混合嵌合狀態(tài)的預(yù)處理方案。單倍體相合混合嵌合狀態(tài)的預(yù)處理方案。

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
【國(guó)外來華專利技術(shù)】用于治療自身免疫性疾病的單倍體相合混合嵌合狀態(tài)
[0001]優(yōu)先權(quán)聲明
[0002]本申請(qǐng)要求于2020年08月18日提交的美國(guó)臨時(shí)專利申請(qǐng)?zhí)?3/067,251的權(quán)益，其內(nèi)容(包括附圖)通過引用整體并入本文。
[0003]背景
[0004]單倍體相合造血細(xì)胞移植(Haplo
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HCT)已廣泛應(yīng)用于治療血液惡性腫瘤和非惡性病癥(1)。器官移植免疫耐受的單倍體相合混合嵌合狀態(tài)的誘導(dǎo)正處于臨床試驗(yàn)(NCT03292445，NCT01165762，NCT01780454，NCT02314403，NCT00801632，NCT01758042)，結(jié)果令人鼓舞(2
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5)。然而，單倍體相合混合嵌合狀態(tài)的誘導(dǎo)是否可以逆轉(zhuǎn)自身免疫仍不清楚，因?yàn)镸HC匹配或HLA匹配的混合嵌合狀態(tài)的誘導(dǎo)不能逆轉(zhuǎn)T1D小鼠或人系統(tǒng)性狼瘡的自身免疫(6
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8)。因此，需要進(jìn)一步探索單倍體相合混合嵌合狀態(tài)對(duì)患者的影響，特別是對(duì)接受移植的患者和/或患有自身免疫的患者。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

[0005]在一個(gè)方面，本文所公開的是在受試者中誘導(dǎo)單倍體相合混合嵌合狀態(tài)的預(yù)處理(conditioning)方案，包括施用無輻射，非清髓性低劑量環(huán)磷酰胺(CY)，噴司他丁(PT)，和抗胸腺細(xì)胞球蛋白(ATG)，并施用來自供體的CD4
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T耗竭的造血細(xì)胞群。在一些實(shí)施例中，該供體CD4
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T耗竭的造血細(xì)胞包括供體CD4
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T耗竭的脾細(xì)胞和供體CD4
+/>T耗竭的骨髓細(xì)胞。在一些實(shí)施例中，該供體CD4
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T耗竭的造血細(xì)胞是CD4
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T耗竭的G
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CSF動(dòng)員的血單個(gè)核細(xì)胞，包括供體造血干細(xì)胞和CD8
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T細(xì)胞。在一些實(shí)施例中，該供體與受試者為單倍體相合。在一些實(shí)施例中，該供體與受試者為單倍體不匹配。在一些實(shí)施例中，該供體與受試者為不完全HLA或MHC匹配。在一些實(shí)施例中，該供體CD4
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T耗竭的造血細(xì)胞可以在施用CY，PT，和ATG的同一天，之前，或之后施用。在一些實(shí)施例中，該受試者是如人的哺乳動(dòng)物。
[0006]在另一個(gè)方面，本公開涉及通過向受試者施用無輻射，非清髓性低劑量CY，PT，和ATG，并向該受試者施用來自供體的CD4
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T耗竭的造血細(xì)胞群以在該受試者中誘導(dǎo)單倍體相合混合嵌合狀態(tài)的方法。在一些實(shí)施例中，該供體CD4
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T耗竭的造血細(xì)胞包括供體CD4
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T耗竭的脾細(xì)胞和供體CD4
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T耗竭的骨髓細(xì)胞。在一些實(shí)施例中，該供體CD4
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T耗竭的造血細(xì)胞是CD4
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T耗竭的G
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CSF動(dòng)員的血單個(gè)核細(xì)胞，包括供體造血干細(xì)胞和CD8
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T細(xì)胞。在一些實(shí)施例中，該供體與受試者為單倍體相合。在一些實(shí)施例中，該供體與受試者為單倍體不匹配。在一些實(shí)施例中，該供體與受試者為不完全HLA或MHC匹配。該供體CD4
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T耗竭的造血細(xì)胞可以在施用CY，PT，和ATG的同一天，之前，或之后施用。在一些實(shí)施例中，該受試者是如人的哺乳動(dòng)物。
[0007]在又一個(gè)方面，本公開涉及通過在受試者中誘導(dǎo)單倍體相合混合嵌合狀態(tài)來治療或預(yù)防該受試者的自身免疫性疾病發(fā)作的方法。該方法需要向該受試者施用無輻射，非清髓性低劑量CY，PT，和ATG，并向該受試者施用來自供體的CD4
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T耗竭的造血細(xì)胞群。在一些實(shí)施例中，該供體CD4
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T耗竭的造血細(xì)胞包括供體CD4
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T耗竭的脾細(xì)胞和供體CD4
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T耗竭的骨髓細(xì)胞。在一些實(shí)施例中，該供體CD4
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T耗竭的造血細(xì)胞是CD4
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T耗竭的G
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CSF動(dòng)員的血單個(gè)
核細(xì)胞，包括供體造血干細(xì)胞和CD8
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T細(xì)胞。在一些實(shí)施例中，該供體與受試者為單倍體相合。在一些實(shí)施例中，該供體與受試者為單倍體不匹配。在一些實(shí)施例中，該供體與受試者為不完全HLA或MHC匹配。該供體CD4
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T耗竭的造血細(xì)胞可以在施用CY，PT，和ATG的同一天，之前，或之后施用。在一些實(shí)施例中，該受試者是如人的哺乳動(dòng)物。在一些實(shí)施例中，該受試者患有自身免疫性疾病或患有自身免疫性疾病的風(fēng)險(xiǎn)升高，包括但不限于，多發(fā)性硬化癥，1型糖尿病，系統(tǒng)性狼瘡，硬皮病，慢性移植物抗宿主病，再生障礙性貧血，和關(guān)節(jié)炎。
[0008]附圖簡(jiǎn)要說明
[0009]圖1示出了MHC
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單倍體相合混合嵌合狀態(tài)(Haplo
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MC)的誘導(dǎo)機(jī)制。Haplo
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MC的誘導(dǎo)增強(qiáng)Tcon的胸腺陰性選擇與供體型和宿主型tTreg細(xì)胞的產(chǎn)生，導(dǎo)致中樞耐受的重建。在外周，供體型和宿主型tTreg細(xì)胞與宿主型DC如pDC相互作用并恢復(fù)其致耐受性特征如上調(diào)PD
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L1表達(dá)。DC上的PD
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L1與激活的宿主型自身反應(yīng)性T細(xì)胞上的PD
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1相互作用并增強(qiáng)T細(xì)胞向抗原特異性Treg細(xì)胞的分化。所有tTreg和pTreg細(xì)胞與致耐受性DC一起工作以維持殘余宿主型自身反應(yīng)性T細(xì)胞的耐受狀態(tài)。
[0010]圖2示出了在具有單倍體相合供體的WT NOD小鼠中實(shí)現(xiàn)了Haplo
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MC狀態(tài)。前驅(qū)糖尿病9
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12周齡的NOD小鼠用ATG+CY+PT進(jìn)行預(yù)處理，分別移植來自H
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2b/g7 F1或H
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2s/g7 F1供體的BM(50
×
106)和SPL細(xì)胞(30
×
106)，并共注射耗竭的抗CD4 mAb(500μg/小鼠)。監(jiān)測(cè)了受體的外周血中的嵌合狀態(tài)和血糖水平。圖2A示出了組合自兩個(gè)重復(fù)實(shí)驗(yàn)的每組12只小鼠的5
?
7只代表性小鼠的HCT后6周外周血中T細(xì)胞(TCRβ
+
)，B細(xì)胞(B220+)，和髓系細(xì)胞(Mac1/Gr1+)的代表性流式細(xì)胞術(shù)模式和供體型與宿主型細(xì)胞的百分比的平均值
±
SE。圖2B和2C示出了在第100天收集的來自嵌合WTNOD或只預(yù)處理的對(duì)照的脾(2B)和骨髓(2C)樣本以驗(yàn)證嵌合狀態(tài)。示出了來自兩個(gè)重復(fù)實(shí)驗(yàn)的總共12只小鼠的每組5只代表性小鼠的一個(gè)代表性流式細(xì)胞術(shù)模式和百分比的平均值
±
SE。
[0011]圖3A和3B示出了在Haplo
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MC WT NOD小鼠中沒有觀察到臨床或組織GVHD的跡象。監(jiān)測(cè)了圖4的WT NOD小鼠在HCT后100天的體重。在D100，收集了肝和肺樣本并進(jìn)行HE染色以評(píng)估GVHD組織病理學(xué)。圖3A：示出了12只小鼠的體重曲線。圖3B：示出了每組被檢查的5只小鼠的一個(gè)代表性肝本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】

【技術(shù)特征摘要】
【國(guó)外來華專利技術(shù)】1.一種治療或預(yù)防受試者自身免疫性疾病發(fā)作的方法，包括向該受試者施用無輻射，非清髓性低劑量環(huán)磷酰胺(CY)，噴司他丁(PT)，和抗胸腺細(xì)胞球蛋白(ATG)，并向該受試者施用來自供體的CD4
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T耗竭的造血細(xì)胞群。2.一種在受試者中誘導(dǎo)單倍體相合混合嵌合狀態(tài)的方法，包括向該受試者施用無輻射，非清髓性低劑量CY，PT，和ATG，并向該受試者施用來自供體的CD4
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T耗竭的造血細(xì)胞群。3.根據(jù)權(quán)利要求1或權(quán)利要求2所述的方法，其中，所述供體CD4
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T耗竭的造血細(xì)胞包括供體CD4
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T耗竭的脾細(xì)胞和供體CD4
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T耗竭的骨髓細(xì)胞。4.根據(jù)權(quán)利要求1或權(quán)利要求2所述的方法，其中，所述供體CD4
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T耗竭的造血細(xì)胞是CD4
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T耗竭的G
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CSF動(dòng)員的血單個(gè)核細(xì)胞，包括供體造血干細(xì)胞和CD8
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T細(xì)胞。5.根據(jù)權(quán)利要求1
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4中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述供體與所述受試者為單倍體相合。6.根據(jù)權(quán)利要求1
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4中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述供體與所述受試者為單倍體不匹配。7.根據(jù)權(quán)利要求1
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4中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述供體與所述受體為不完全HLA或MHC匹配。8.根據(jù)權(quán)利要求1
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7中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述受試者是哺乳動(dòng)物。9.根據(jù)權(quán)利要求1
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8中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述受試者是人。10.根據(jù)權(quán)利要求1
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【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：曾德福，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：希望之城，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：