具有高產β－環糊精能力的環糊精葡萄糖基轉移酶的突變體及突變方法技術

具有高產β－環糊精能力的環糊精葡萄糖基轉移酶的突變體及突變方法，屬于基因工程和酶工程領域。本發明專利技術利用蛋白質工程的定點突變方法提高一種環糊精葡萄糖基轉移酶（簡稱ＣＧＴ酶）產β－環糊精能力，提供了提高來源于Ｐｅａｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ　ｍａｃｅｒａｎｓ　ＪＦＢ０５－０１（ＣＣＴＣＣ　ＮＯ：Ｍ　２０８０６３）的ＣＧＴ酶產β－環糊精能力的突變方案，將ＣＧＴ酶的４７位的Ｌｙｓ分別替換成Ａｒｇ，Ｈｉｓ及Ｔｈｒ，獲得的三種突變體酶Ｋ４７Ｒ，Ｋ４７Ｈ，Ｋ４７Ｔ，它們的β－環糊精生產能力較野生型ＣＧＴ酶有所提高；其中，突變體酶Ｋ４７Ｔ尤為顯著。這些突變體酶比野生型ＣＧＴ酶更利于β－環糊精的工業化生產。

【技術實現步驟摘要】

【技術保護點】
來源于軟化類芽孢桿菌（Ｐｅａｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ　ｍａｃｅｒａｎｓ）ＪＦＢ　０５－０１的環糊精葡萄糖基轉移酶，簡稱ＣＧＴ酶，的三種突變體酶Ｋ４７Ｒ，Ｋ４７Ｈ及Ｋ４７Ｔ，其特征是：將ＣＧＴ酶基因中第４７位的賴氨酸Ｌｙｓ分別變成了精氨酸Ａｒｇ，組氨酸Ｈｉｓ或蘇氨酸Ｔｈｒ，分別命名為Ｋ４７Ｒ，Ｋ４７Ｈ及Ｋ４７Ｔ，它們相比于野生型ＣＧＴ酶具有更高的產β－環糊精能力。

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發人員：吳敬，陳堅，李兆豐，張佳瑜，
申請(專利權)人：江南大學，
類型：發明
國別省市：32[中國|江蘇]