一種治療RB1陽性的卵巢癌的組合藥物及其應用制造技術

本發明專利技術涉及一種治療RB1陽性的卵巢癌的組合藥物及其應用。本發明專利技術通過實驗證實了RB7LP能抑制卵巢癌細胞的增殖，進一步，能促進部分RB1陽性卵巢癌細胞衰老及凋亡，同時還證實了ret抑制劑可協同Palbociclib聯合致死RB1陽性的卵巢癌，比單獨使用Palbociclib或ret抑制劑的治療效果優。本發明專利技術的組合藥物可協同作用誘導RB1陽性卵巢癌細胞凋亡、增加癌細胞抑制率，療效佳，具有很強的臨床應用價值。具有很強的臨床應用價值。具有很強的臨床應用價值。

【技術實現步驟摘要】
一種治療RB1陽性的卵巢癌的組合藥物及其應用


[0001]本專利技術涉及醫學科研
，具體地說，是一種治療RB1陽性的卵巢癌的組合藥物及其應用。

技術介紹

[0002]卵巢癌(OC)是一種婦科惡性腫瘤，據報道，它是美國女性癌癥死亡的第五大原因，在中國是第九大原因，全球排名第八。根據全球癌癥統計數據，2020年有313,959個新病例(占所有癌癥病例的3.4％)和207,252個死亡病例(占所有癌癥死亡病例的4.7％)。盡管在過去的幾十年里卵巢癌的治療取得了進步，但5年總生存率只有47％。卵巢癌的風險因素包括：子宮內膜異位、高齡、卵巢癌或乳腺癌家族史以及胚系突變。惡性上皮性卵巢癌占卵巢癌患者的90％，有五種組織學亞型:高級別漿液性癌(70％)、子宮內膜樣癌(10％)、透明細胞癌(10％)、黏液性癌(3％)和低級別漿液性癌(<5％)。越來越多的證據表明，卵巢癌是一種具有自發抗腫瘤免疫反應的免疫源性腫瘤。
[0003]RB轉錄共抑制因子1(RB1)是第一個在視網膜母細胞瘤中發現的抑癌基因。它是一種多功能蛋白，促進腫瘤免疫和調控關鍵的細胞活動，新的數據表明，RB1在免疫功能的不同方面發揮著重要的作用，RB1突變的樣本中免疫效應富集，表現為T細胞炎癥標記分數更高。
[0004]卓灝醫藥公眾號，2022
?
04
?
25，公開了RB1是卵巢癌的免疫相關預后生物標志物，研究表明，RB1是一個穩健且與免疫相關的卵巢癌預后生物標志物。RB1相關基因的富集分析及其在免疫微環境中與免疫浸潤的相關性表明，RB1可能是卵巢癌免疫治療的一個新靶點。
[0005]帕博西尼(PALBOCICLIB)是全球首個批準上市的CDK4/6激酶抑制劑，是一種實驗性、口服、靶向性CDK4/6抑制劑，能夠選擇性抑制細胞周期蛋白依賴性激酶4和6(CDK4/6)，恢復細胞周期控制，阻斷腫瘤細胞增殖。
[0006]RET是一種能在多種腫瘤中激活配體激酶、從而驅動腫瘤發展的酪氨酸激酶受體。RET的異常激活是導致非小細胞肺癌、甲狀腺髓樣癌、甲狀腺乳頭狀等多種實體腫瘤生長和增殖的關鍵驅動因子。它是一種酪氨酸激酶抑制劑，作為新型抗癌劑，能夠抑制細胞生長，顯著增加癌細胞凋亡，主要用來治療和預防突變的癌、癌轉移疾病，以RET為靶點的抗腫瘤藥物研發已成為國內外的研究熱點。本專利技術揭示了ret抑制劑結合PD一起使用可以對RB1陽性卵巢癌細胞的增殖和凋亡產生影響，通過ret抑制劑結合PD顯著抑制細胞增殖，誘導細胞凋亡。因此，ret抑制劑結合PD應用可以作為治療RB1陽性的卵巢癌的新型手段，具有潛在的臨床應用價值。
[0007]目前關于本專利技術一種治療RB1陽性的卵巢癌的組合藥物及其應用還未見報道。

技術實現思路

[0008]本專利技術的目的是針對現有技術中的不足，本專利技術的第一方面，提供一種RB7LP/
Palbociclib在制備治療卵巢癌藥物中的應用，所述卵巢癌為RB1陽性的卵巢癌。
[0009]優選地，所述的RB7LP/Palbociclib抑制RB1陽性卵巢癌細胞增殖。
[0010]優選地，所述的RB7LP/Palbociclib可促進部分RB1陽性卵巢癌細胞衰老及凋亡。
[0011]本專利技術的第二方面，提供一種治療RB1陽性的卵巢癌的組合藥物，所述組合藥物包括ret抑制劑和RB7LP/Palbociclib。
[0012]本專利技術的第三方面，提供如上所述的組合藥物在制備治療RB1陽性的的卵巢癌藥物中的應用。
[0013]本專利技術的第四方面，提供一種具有協同增效作用的抗卵巢癌藥物制劑，包括如上所述的組合藥物和藥學上可接受的載體。
[0014]本專利技術優點在于：
[0015]1.本實驗使用的方法為細胞水平的篩選，具有可視化、動態、多參數綜合評價等突出優勢。利用完整的細胞，通過細胞活力檢測、基因編輯、報告基因、高內涵成像等技術尋找潛在的藥物作用靶點，發掘有潛力的活性分子。
[0016]2.本專利技術通過實驗證實了ret抑制劑可協同Palbociclib聯合致死RB1突變的卵巢癌，比單獨使用Palbociclib或ret抑制劑的治療效果優，本專利技術的組合藥物可協同作用誘導RB1陽性卵巢癌細胞凋亡、增加癌細胞抑制率，療效佳，具有很強的臨床應用價值。
附圖說明
[0017]附圖1為RB7LP抑制卵巢癌細胞的增殖。
[0018]附圖2為RB7LP促進RB1陽性的卵巢癌細胞發生部分衰老及凋亡。
[0019]附圖3為Palbociclib模擬RB7LP在RB1陽性的卵巢癌細胞中的作用。
[0020]附圖4為Palbociclib協同RET抑制劑致死RB1陽性的卵巢癌細胞。
具體實施方式
[0021]下面結合具體實施方式，進一步闡述本專利技術。應理解，這些實施例僅用于說明本專利技術而不用于限制本專利技術的范圍。此外應理解，在閱讀了本專利技術記載的內容之后，本領域技術人員可以對本專利技術作各種改動或修改，這些等價形式同樣落于本申請所附權利要求書所限定的范圍。
[0022]實施例1細胞實驗
[0023]1.實驗材料
[0024]卵巢癌細胞株購自美國ATCC細胞庫；高糖DMEM培養基、RPMI
?
1640培養基、胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)、青鏈霉素、二甲基亞砜、MTT粉購自Gibco公司；胰酶
?
EDTA消化液購自Sigma公司；RNA提取試劑TRIzol、逆轉錄試劑盒、SYBR熒光定量試劑購自Invit
?
rogen公司；RB7LP、pENTR
?
GFP、pTRE3G
?
puro
?
DEST載體購自Addgene公司；其他轉染試劑購自Life Technologies公司；其他常用試劑購自生工生物工程(上海)股份有限公司；酶標儀購自Bio
?
rad公司；實時定量PCR儀購自ABI公司；流式細胞儀購自BD公司；超凈工作臺購自蘇州蘇泰凈化設備工程有限公司。化合物庫夠自MCE公司。AnnexinV
?
AlexaFluor凋亡試劑盒購自賽默飛公司。
[0025]2.實驗方法
[0026]2.1細胞培養
[0027]SKOV3置于培養皿中培養,培養液包括10％胎牛血清,90％RPMI
?
1640培養基(含100U/mL青霉素,100μg/mL鏈霉素)，37℃、5％CO2培養箱培養。隔天換液，每2
?
3天傳代。
[0028]2.2慢病毒制備
[0029]293T細胞3gpTRE3G
?
puro
?
RB7LP
?
GFP和包裝質粒(3μgpCMV
?
VSVG和3μgpCMV
?
dR8.91)進行轉導。在1本文檔來自技高網...

【技術保護點】

【技術特征摘要】
1.RB7LP/Palbociclib在制備治療卵巢癌藥物中的應用，其特征在于，所述卵巢癌為RB1陽性的卵巢癌。2.根據權利要求1的應用，其特征在于，所述的RB7LP/Palbociclib抑制RB1陽性卵巢癌細胞增殖。3.根據權利要求1的應用，其特征在于，所述的RB7LP/Palbociclib可促進部分RB1陽性卵巢癌細...

【專利技術屬性】
技術研發人員：王育，盛金丹，吳美璇，顧思佳，
申請(專利權)人：上海市第一婦嬰保健院，
類型：發明
國別省市：