用于制備血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑的水蛭提取物制備方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)涉及一種用于制備血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑的水蛭提取物制備方法，屬中藥生物制劑技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明專利技術(shù)制備方法將新鮮水蛭一步一步制作成具有良好血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制活性的3KD部位的水蛭提取物，輔助制備血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑，拓展了水蛭提取物的輔助藥用價(jià)值，為提高治療高血壓、心力衰竭、糖尿病合并高血壓、腎小球和蛋白尿的療效開辟一條新的途徑；本發(fā)明專利技術(shù)制備方法安全簡(jiǎn)單，實(shí)用價(jià)值高；彌補(bǔ)了現(xiàn)代醫(yī)療領(lǐng)域缺少通過所述水蛭提取物輔助制備相應(yīng)藥劑的不足，解決了現(xiàn)有制備方法制得的水蛭提取物難以獲得良好血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制活性的問題，從而為高血壓、心力衰竭、糖尿病合并高血壓、腎小球和蛋白尿疾病患者的治療帶來福音。帶來福音。帶來福音。

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
用于制備血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑的水蛭提取物制備方法


[0001]本專利技術(shù)涉及一種用于制備血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑的水蛭提取物制備方法，屬于中藥生物制劑


技術(shù)介紹

[0002]血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑ACEI是一類抑制血管緊張素轉(zhuǎn)化酶活性的化合物，ACEI用藥后外周血管擴(kuò)張，總外周阻力降低，血壓下降，在降壓同時(shí)不減少心、腦、腎等重要器官的血流量，不干擾交感神經(jīng)反射功能，不引起體位性低血壓，對(duì)高腎素及正常腎素高血壓的降壓效果顯著，對(duì)低腎素高血壓也有降壓效果。
[0003]ACEI通過降低血管緊張素Ⅱ和醛固酮使心臟前后負(fù)荷減輕，外周血管和冠狀血管阻力降低，增加冠脈血供，減少心肌纖維化，使心肌細(xì)胞凋亡減慢，用于治療頑固性心衰和無癥狀性心衰，以及對(duì)使用洋地黃、利尿劑和血管擴(kuò)張劑無效的心衰病人也有很好的療效。
[0004]ACEI可以通過降低系統(tǒng)血壓和腎內(nèi)血壓，改善腎小球?yàn)V過膜的通透性，減少蛋白尿的排出、抑制腎組織細(xì)胞的硬化過程，包括系膜細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和小管上皮細(xì)胞以及間質(zhì)成纖維細(xì)胞增殖，分泌趨化因子、炎癥因子和促纖維因子，從而抑制腎組織炎癥反應(yīng)和硬化，長(zhǎng)期用藥可降低蛋白尿45%。
[0005]現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，水蛭具有抗凝、抗血栓、抗腫瘤、抗炎及抗纖維化等藥理作用，不過到目前為止，還沒有水蛭提取物及其活性成分具有血管緊張素轉(zhuǎn)化酶ACE抑制活性的報(bào)道，究其原因是，通過以往的制備方法得到的水蛭提取物難以獲得良好的血管緊張素轉(zhuǎn)化酶ACE抑制活性，且水蛭臨床治療多以中藥湯劑、中成藥和丸散形式呈現(xiàn)，缺乏現(xiàn)代醫(yī)藥技術(shù)理論支持下的水蛭提取物入藥及輔助制備相應(yīng)藥劑的應(yīng)用。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

[0006]本專利技術(shù)的目的在于，針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種用于制備血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑的水蛭提取物制備方法，通過本專利技術(shù)制備方法得到一種分子量在3KD以下的水蛭提取物，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)其具有良好的血管緊張素轉(zhuǎn)化酶ACE抑制活性，制備方法安全簡(jiǎn)單，實(shí)用價(jià)值高；拓展水蛭提取物的輔助藥用價(jià)值，為提高治療高血壓、心力衰竭、糖尿病合并高血壓、腎小球和蛋白尿患者的療效開辟一條新的途徑；以解決現(xiàn)有制備方法制得的水蛭提取物難以獲得血管緊張素轉(zhuǎn)化酶ACE抑制活性的問題。
[0007]本專利技術(shù)是通過如下的技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)上述目的的：一種用于制備血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑的水蛭提取物制備方法，其特征在于：它是通過如下步驟實(shí)現(xiàn)的：將新鮮水蛭進(jìn)行低溫干燥，將干燥后的水蛭用水提取得到粗提物，所述用水提取是將水蛭用10
?
20倍量純水浸提，提取溫度優(yōu)選0
?
4℃，提取時(shí)間優(yōu)選60
?
120分鐘，提取次數(shù)優(yōu)選2
?
4次，將提取得到的粗提物用水溶解，再將粗提物用孔徑為3KD超濾膜過濾并收集濾液，對(duì)所述濾液進(jìn)行低溫干燥，即得到水蛭３KD部位的水蛭提取物，所述水蛭３KD部位的水蛭提取物的濃度為20
?
50
μ
g/ml，優(yōu)選50
μ
g/ml；所述新鮮水蛭優(yōu)選為活水蛭或活
水蛭凍品。
[0008]所述的３KD部位的水蛭提取物具有良好的血管緊張素轉(zhuǎn)化酶ACE抑制活性。
[0009]所述的將粗提物用水溶解是將粗提物用2
?
10倍量純水溶解。
[0010]所述的低溫干燥為真空冷凍干燥。
[0011]本專利技術(shù)與現(xiàn)有技術(shù)相比的有益效果在于：該用于制備血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑的水蛭提取物制備方法，通過將新鮮水蛭一步一步制作成為具有良好血管緊張素轉(zhuǎn)化酶ACE抑制活性的水蛭3KD部位的水蛭提取物，輔助制備血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑，拓展了水蛭提取物的輔助藥用價(jià)值，為提高治療高血壓、心力衰竭、糖尿病合并高血壓、腎小球和蛋白尿的療效開辟一條新的途徑；本專利技術(shù)制備方法安全簡(jiǎn)單，實(shí)用價(jià)值高；有效彌補(bǔ)了現(xiàn)代醫(yī)療領(lǐng)域缺乏通過所述水蛭提取物輔助制備相應(yīng)藥劑的不足，拓展了所述水蛭提取物的輔助藥用價(jià)值，解決了現(xiàn)有制備方法制得的水蛭提取物難以獲得血管緊張素轉(zhuǎn)化酶ACE抑制活性的問題，從而為高血壓、心力衰竭、糖尿病合并高血壓、腎小球和蛋白尿疾病患者的治療帶來福音。
附圖說明
[0012]圖1為本專利技術(shù)制備方法制得的水蛭3KD部位的水蛭提取物的高效液相色譜檢測(cè)HPLC（250 nm）檢測(cè)圖。
具體實(shí)施方式
[0013]本專利技術(shù)的設(shè)計(jì)思路是：血管緊張素轉(zhuǎn)化酶ACE（angiotensin converting enzyme）是一種外肽酶，主要功能是催化血管緊張素I轉(zhuǎn)化為血管緊張素Ⅱ，后者是強(qiáng)烈的血管收縮劑和腎上腺皮質(zhì)類醛固酮釋放的激活劑；血管緊張素轉(zhuǎn)化酶ACE因這兩種功能而成為治療高血壓、心力衰竭、糖尿病合并高血壓等疾病的理想靶點(diǎn)。血管緊張素Ⅱ是在血管緊張素轉(zhuǎn)化酶ACE的作用下形成的，腎缺血時(shí)刺激腎小球入球動(dòng)脈上的球旁細(xì)胞分泌腎素，腎素對(duì)肝臟合成的血管緊張素原起作用，形成血管緊張素Ⅰ，在血管緊張素轉(zhuǎn)化酶ACE的作用下形成血管緊張素
?Ⅱ
，血管緊張素Ⅱ有強(qiáng)烈的收縮血管作用，其收縮血管作用是腎上腺素的10～20倍；血管緊張素Ⅱ還可使腎上腺皮質(zhì)球狀帶分泌醛固酮，促使水、鈉潴留，最終產(chǎn)生高血壓。
[0014]而血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑ACEI (angiotensin converting enzyme inhibitors)是一類抑制血管緊張素轉(zhuǎn)化酶活性的化合物；ACEI用藥后，外周血管擴(kuò)張，總外周阻力降低，血壓下降，在降壓同時(shí)不減少心、腦、腎等重要器官的血流量，不干擾交感神經(jīng)反射功能，不引起體位性低血壓，對(duì)高腎素及正常腎素高血壓的降壓效果顯著，對(duì)低腎素高血壓也有降壓效果，長(zhǎng)期應(yīng)用可使左心室肥厚退縮，一般用藥15min見效，1～2h達(dá)高峰。
[0015]引起心衰的原因很多，主要是腎素
?
血管緊張素
?
醛固酮系統(tǒng)被激活，使血管收縮，心肌正性肌力作用增強(qiáng)，促交感神經(jīng)末梢釋放去甲腎上腺素，促醛固酮和血管加壓素分泌增加，促腎上腺產(chǎn)生去氧皮質(zhì)酮，促緩激肽釋放降解，使潴鈉排鉀，水、鈉潴留，這些結(jié)果使心肌肥厚伴心肌細(xì)胞凋亡，血管收縮，循環(huán)血容量增加而使心衰發(fā)生并逐漸加重；ACEI用藥后，通過降低血管緊張素Ⅱ和醛固酮，使心臟前后負(fù)荷減輕，使外周血管和冠狀血管阻力降低，增加冠脈血供，使心肌纖維化減少，心肌細(xì)胞凋亡減慢；ACEI用于治
療頑固性心衰和無癥狀性心衰，對(duì)使用洋地黃、利尿劑和血管擴(kuò)張劑無效的心衰病人也有很好的療效。
[0016]影響腎小球疾病預(yù)后的一個(gè)獨(dú)立因素是蛋白尿，長(zhǎng)期大量蛋白尿除造成低蛋白血癥外，還能造成腎小球和腎小管的毒性和炎癥反應(yīng)；長(zhǎng)期高血壓和腎小球內(nèi)壓增高均可損傷腎功能，是影響各種腎小球疾病預(yù)后的一個(gè)重要因素，降低系統(tǒng)血壓和腎小球內(nèi)壓可以有效緩解腎臟疾病的發(fā)展；ACEI用藥后，通過降低系統(tǒng)血壓和腎小球內(nèi)血壓，改善腎小球?yàn)V過膜的通透性，減少蛋白尿的排出、抑制腎組織細(xì)胞的硬化過程，（包括系膜細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和小管上皮細(xì)胞以及間質(zhì)成纖維細(xì)胞增殖），分泌趨化因子、炎癥本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】

【技術(shù)特征摘要】
1.一種用于制備血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑的水蛭提取物制備方法，其特征在于：它是通過如下步驟實(shí)現(xiàn)的：將新鮮水蛭進(jìn)行低溫干燥，將干燥后的水蛭用水提取得到粗提物，所述用水提取是將水蛭用10
?
20倍量純水浸提，提取溫度優(yōu)選0
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4℃，提取時(shí)間優(yōu)選60
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120分鐘，提取次數(shù)優(yōu)選2
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4次，將提取得到的粗提物用水溶解，再將粗提物用孔徑為3KD超濾膜過濾并收集濾液，對(duì)所述濾液進(jìn)行低溫干燥，即得到水蛭３KD部位的水蛭提取物，所述水蛭３KD部位的水蛭提取物的濃度為20
?
50

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：丁釗，龔元，龔煊，佘瑤瑤，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：武漢宜芝林醫(yī)藥技術(shù)開發(fā)有限公司，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：