一種六價鉻離子吸附富集多肽及其載體的制備方法與應用技術

本發明專利技術公開了一種六價鉻離子吸附富集多肽及其載體的制備方法與應用。所述載體通過以下方法制備而成:200mg的γ

【技術實現步驟摘要】
一種六價鉻離子吸附富集多肽及其載體的制備方法與應用


[0001]本專利技術涉及生物工程領域，特別涉及一種六價鉻離子吸附富集多肽及其載體的制備方法與應用。

技術介紹

[0002]鉻是一種自然存在的金屬元素，存在于巖石、土壤、火山塵埃和氣體中，也存在于動植物中。這種元素最常見的形式是金屬形式的鉻(0)，三價鉻Cr(III)和六價鉻Cr(VI)。六價鉻是一種已知的毒素，誘變劑和致癌物。三價鉻在50多年前就被確認為哺乳動物體內必需的微量元素，是正常葡萄糖代謝所必需的。事實上，人類缺乏鉻會導致與II型糖尿病和心血管疾病相關的癥狀。金屬氧陰離子鉻酸鹽(CrO
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)是一種廣泛存在的環境污染物，因為它廣泛應用于工業和國防領域，如制革、電鍍、油漆顏料制造、不銹鋼焊接和核武器生產。Cr(VI)是高溶性和毒性的，它可以通過消化道、呼吸道、皮膚和粘膜侵入人體，長期接觸會導致突變和致癌。例如Cr(VI)暴露在培養細胞中導致一系列基因組損傷，包括DNA單鏈和雙鏈斷裂、氨基酸和蛋白質與DNA的結合、DNA鏈間交聯和Cr
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DNA加合物。Cr毒性還與各種體內非特異性還原劑(如谷胱甘肽、NADH、NADPH和半胱氨酸)或細胞單電子還原酶在細胞內將Cr(VI)部分還原為不穩定的中間Cr(V)過程中產生的活性氧中間體有關。
[0003]傳統的六價鉻檢測方法需要通過強酸，高溫消解或者萃取的方法來提取六價鉻再進行儀器檢測。基于上述情況，本專利技術提出了一種六價鉻離子吸附富集及制備方法。
專利技術內容
[0004]本專利技術的目的在于克服現有技術的缺點與不足，提供一種六價鉻離子吸附富集多肽。
[0005]本專利技術的另一目的在于，提供一種六價鉻離子吸附富集多肽載體。
[0006]本專利技術的再一目的在于，提供一種六價鉻離子吸附富集多肽載體的制備方法。
[0007]本專利技術的再一目的在于，提供上述多肽和多肽載體的應用。
[0008]本專利技術的目的通過下述技術方案實現：
[0009]一種六價鉻離子吸附富集多肽，為以下多肽的至少一種：
[0010]Cbp
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1，其氨基酸序列為NHIYGRTTPEWR；
[0011]Cbp
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2，其氨基酸序列為YSDSTSAMRGLM；
[0012]Cbp
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3，其氨基酸序列為LGVANPLRSATD；
[0013]Cbp
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4，其氨基酸序列為IYRSDTSCKMCE；
[0014]Cbp
?
5，其氨基酸序列為GFFQVPGQHVNK；
[0015]Cbp
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6，其氨基酸序列為DYKTHGFPALRH；
[0016]Cbp
?
7，其氨基酸序列為HFVKTPARWAWG；
[0017]Cbp
?
8，其氨基酸序列為FIGLPVITEIPF；
[0018]Cbp
?
9，其氨基酸序列為YGNAHIARLLVP。
[0019]優選的，所述的六價鉻離子吸附富集多肽為Cbp
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1、Cbp
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4、Cbp
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6和Cbp
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7中的至少一種。
[0020]優選的，所述的六價鉻離子吸附富集多肽為Cbp
?
6和Cbp
?
7中的至少一種。
[0021]一種六價鉻離子吸附富集多肽載體的制備方法，包括如下步驟：
[0022](1)將γ
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Fe2O3納米粒子分散在水中，加入殼聚糖混勻，然后加入戊二醛，攪拌，干燥得到nano載體；
[0023](2)將六價鉻離子吸附富集多肽溶于溶液中，取步驟(1)制備得到的nano載體加入，攪拌，過濾，洗滌，干燥，得到六價鉻離子吸附富集多肽載體。
[0024]步驟(1)所述的γ
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Fe2O3納米粒子與殼聚糖的質量比為1：2～8；優選為1:4。
[0025]步驟(1)所述的水的量以能溶解溶質為準。
[0026]步驟(1)所述的戊二醛與γ
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Fe2O3納米粒子的比為1mL:30～100mg；優選為1mL：50mg。
[0027]步驟(1)所述的攪拌的條件為40～50℃下攪拌2～4h；優選為45℃下攪拌3h。
[0028]步驟(2)所述的六價鉻離子吸附富集多肽與nano載體的質量比為1:5～20；優選為1:10。
[0029]步驟(2)所述的溶液為磷酸鹽溶液。
[0030]步驟(2)所述的攪拌的條件為800～900rpm攪拌6～8h。
[0031]上述制備方法制備得到的六價鉻離子吸附富集多肽載體。
[0032]上述六價鉻離子吸附富集多肽及其載體在制備六價鉻吸附劑中的應用。
[0033]上述六價鉻離子吸附富集多肽及其載體在吸附六價鉻中的應用。
[0034]本專利技術相對于現有技術具有如下的優點及效果：
[0035]1、本專利技術所述的六價鉻離子吸附富集多肽制備簡單，且能夠快速吸附溶液中的六價鉻離子。
[0036]2、通過將多肽負載在磁性核心上，可以實現快速收回和分離水體中六價鉻離子的目的。
[0037]3、由于實現了載體負載，因此可以重復多次使用該載體，能選擇性地高度吸附六價鉻，再經過稀硝酸洗脫從而有效從液體中富集六價鉻。
附圖說明
[0038]圖1九條多肽和原始肽庫對六價鉻離子的親和力。
[0039]圖2四條對六價鉻的親和力較高的多肽對不同金屬離子的親和力。
[0040]圖3實施例2中各個吸附劑的單位吸附量。
[0041]圖4實施例2中各個吸附劑的脫出量。
[0042]圖5實施例2中各個吸附劑的脫出率。
具體實施方式
[0043]下面結合實施例及附圖對本專利技術作進一步詳細的描述，但本專利技術的實施方式不限于此。
[0044]下面實施方案中若未注明具體試驗條件，則通常按照常規試驗條件或按照試劑公
司所建議的試驗條件。所使用的材料、試劑等，若無特殊說明，均為從商業途徑得到的試劑和材料。
[0045]實施例1篩選對六價鉻特異性結合多肽序列
[0046](1)金屬絡合樹脂的制備。在Ni
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NTA Sefinose(Bio Basic Inc公司，加拿大)，樹脂上用六價鉻離子取代預負載的鎳離子，制備了六價鉻離子固定樹脂。具體地說，為了從Ni
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NTA
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Sefinose樹脂上剝離Ni(II)，首先用足夠的EDTA溶液(0.5mol/L，pH 8.0)洗滌樹脂珠，直到樹脂從藍色變為無色。然后用檸檬酸鹽緩沖液(pH 4.4)漂洗三次，并在4℃下儲存以備將來使用，該不含金屬的樹脂標記為M
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樹脂。為制備六價鉻固定本文檔來自技高網...

【技術保護點】

【技術特征摘要】
1.一種六價鉻離子吸附富集多肽，其特征在于為以下多肽的至少一種：Cbp
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1，其氨基酸序列為NHIYGRTTPEWR；Cbp
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2，其氨基酸序列為YSDSTSAMRGLM；Cbp
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3，其氨基酸序列為LGVANPLRSATD；Cbp
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4，其氨基酸序列為IYRSDTSCKMCE；Cbp
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5，其氨基酸序列為GFFQVPGQHVNK；Cbp
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6，其氨基酸序列為DYKTHGFPALRH；Cbp
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7，其氨基酸序列為HFVKTPARWAWG；Cbp
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8，其氨基酸序列為FIGLPVITEIPF；Cbp
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9，其氨基酸序列為YGNAHIARLLVP。2.根據權利要求1所述的六價鉻離子吸附富集多肽，其特征在于：所述的六價鉻離子吸附富集多肽為Cbp
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1、Cbp
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4、Cbp
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6和Cbp
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7中的至少一種。3.一種六價鉻離子吸附富集多肽載體的制備方法，其特征在于包括如下步驟：(1)將γ
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Fe2O...

【專利技術屬性】
技術研發人員：林影，鄭穗平，江士波，
申請(專利權)人：華南理工大學，
類型：發明
國別省市：