本發明專利技術涉及生物制藥技術領域，特別是涉及一株短短芽孢桿菌Bb49菌株，由該菌株制成的微生態制劑及其應用，該菌株已于2022年10月31日保藏在中國典型培養物保藏中心，其保藏編號為CCTCC NO:M 20221699；保藏地址為武漢大學。本發明專利技術的短短芽孢桿菌Bb49菌株是從枯草芽孢桿菌的發酵液中分離得到，其對金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌三種燒傷易感染致病菌抑制效果均達到79％以上，遺傳穩定，能夠用于制成抑制金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌中至少一種致病菌的產品。由于其溶血實驗為陰性，并具有利福平抗性，還能用于制成抗燒燙傷感染產品。于制成抗燒燙傷感染產品。于制成抗燒燙傷感染產品。
【技術實現步驟摘要】
短短芽孢桿菌Bb49菌株、微生態制劑及其應用
[0001]本專利技術涉及生物制藥
，特別是涉及短短芽孢桿菌Bb49菌株、微生態制劑及其應用。
技術介紹
[0002]燒傷感染是由于熱力作用引起皮膚損傷，進而導致人體抵御病原微生物的生理屏障破壞而出現的細菌、真菌和特殊病原菌感染。目前，燒傷易感染致病菌前三為金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌。其中金黃色葡萄球菌屬于革蘭氏陽性菌，銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌屬于革蘭氏陰性菌。革蘭氏陽性菌可釋放毒性強烈的特異性外毒素，選擇性地作用于機體的特定組織器官。革蘭氏陰性菌可產生內毒素，是細胞壁的組成成分，又叫脂多糖，其化學構成為磷脂多糖
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蛋白質復合物，可分為非特異性核心多糖、菌體特異性多糖和脂質A三部分，其中脂質A為毒性主要成分，是一種強烈的炎癥介質活化物質，引起傷口發炎化膿。
[0003]大量使用廣譜抗生素所導致的致病菌多種耐藥機制的產生已成為世界性感染難題之一。微生態制劑是在微生態學理論指導下，利用從機體或環境中篩選的益生菌活菌、死菌或其代謝產物制成的制劑，通過種間競爭、生物奪氧、屏障作用、酶學效果、酸堿平衡、生物降解等機制起到保持機體微生態平衡，調節失衡菌群，達到防治致病菌，提高宿主健康水平的目的。該類制劑作為新興的制劑產品，以其綠色、健康、無毒副作用、無污染等特性，在農業、畜牧、醫藥、食品等領域高速發展。目前，已有應用于燒傷感染的菌株，但其功能往往只能抑制燒傷易感染致病菌中的一種，以此類菌株制成抗燒傷感染的微生態制劑時，需要多種菌株復配以達到抗多種致病菌的功效，然而不同菌株之間復配時則不得不考慮菌株之間的抑制作用所帶來的問題。
技術實現思路
[0004]針對以上技術問題，本專利技術提供一株短短芽孢桿菌Bb49菌株，由該菌株制成的微生態制劑及其應用。該短短芽孢桿菌Bb49菌株對金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌有優異的抑制作用，且遺傳穩定，溶血實驗為陰性，并具有利福平抗性，能夠用于制成微生態制劑來發揮相應作用。
[0005]為達到上述專利技術目的，本專利技術采用了如下的技術方案：
[0006]第一方面，本專利技術提供一株短短芽孢桿菌Bb49菌株，其分類名稱為短短芽孢桿菌(Brevibacillus hrevis)，于2022年10月31日保藏在中國典型培養物保藏中心，其保藏編號為CCTCC NO:M 20221699；保藏地址為武漢大學。
[0007]本專利技術是從枯草芽孢桿菌在自然條件下培養80h的發酵液中分離得到，其對金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌三種燒傷易感染致病菌抑制效果分別可達100％、79.3％和94.8％，且遺傳穩定、適合工業化生產。
[0008]目前，人類對短短芽孢桿菌研究處于初始階段，僅有屈指可數的相關報道，且多數
屬于植物病害防治和環境污染治理方面，缺少對抑制動物、人類細菌感染的研究。相對于其他短短芽孢桿菌，本專利技術提供的短短芽孢桿菌Bb49菌株不僅對金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌三種燒傷易感染致病菌具有優異的抑制效果，還具有天然的遺傳穩定性優勢，抑菌效果始終保持穩定，且溶血實驗為陰性，具有利福平抗性，所以能夠成為一種抗燒傷感染的醫用菌株。又因該菌株可產芽孢，可度過惡劣的環境，適合工業化生產，因此Bb49菌株可作為新一代的優良微生態制劑的資源菌種，有望通過深入、充分的開發利用而產生經濟效益。
[0009]第二方面，本專利技術還提供上述短短芽孢桿菌Bb49菌株在制備抑制金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌中至少一種致病菌的產品中的應用。
[0010]經實驗驗證，短短芽孢桿菌Bb49菌株的菌懸液對金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌的抑制率分別可達100％、79.3％和94.8％，故可用于制備抑制金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌中至少一種致病菌的產品。
[0011]第三方面，本專利技術還提供上述短短芽孢桿菌Bb49菌株在制備抗燒燙傷感染產品中的應用。
[0012]燒傷易感染致病菌前三為金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌，本專利技術提供的短短芽孢桿菌Bb49菌株對上述三種致病菌均有優異的抑制作用，可單獨用于制備抗燒燙傷感染產品。
[0013]第四方面，本專利技術還提供上述短短芽孢桿菌Bb49菌株的菌懸液。
[0014]結合第四方面，所述菌懸液的制備方法優選包括以下步驟：將活化的短短芽孢桿菌Bb49菌株接至LB液體培養基中，36～38℃，180～220r/min搖床培養12～16h，得到所述菌懸液。
[0015]優選地，所述菌懸液的制備方法還包括在完成搖床培養后調整活菌數至107～108cfu.ml
?1。
[0016]第五方面，本專利技術還提供上述短短芽孢桿菌Bb49菌株的菌懸液在制備抑制金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌中至少一種致病菌的產品中的應用。
[0017]第六方面，本專利技術還提供上述短短芽孢桿菌Bb49菌株的菌懸液在制備抗燒燙傷感染產品中的應用。
[0018]第七方面，本專利技術還提供一種微生態制劑，所述微生態制劑中含有上述短短芽孢桿菌Bb49菌株的活菌株或菌懸液。
[0019]本專利技術具備如下有益效果：該短短芽孢桿菌Bb49菌株對金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌三種燒傷易感染致病菌具有優異的抑制效果，并具有天然的遺傳穩定性優勢，抑菌效果始終保持穩定，且溶血實驗為陰性，具有利福平抗性，可作為新一代的優良微生態制劑的資源菌種，其活菌株或菌懸液可以用于制備抑制金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌中至少一種致病菌的產品，或用于制備抗燒燙傷感染產品。
附圖說明
[0020]圖1為本專利技術實施例1中Bb49菌株對三種致病菌的抑菌效果；
[0021]圖2為本專利技術實施例1中Bb49菌株對三種致病菌的抑菌活性穩定性；
[0022]圖3為本專利技術實施例1中Bb49菌株的革蘭氏染色圖；
[0023]圖4為本專利技術實施例1中Bb49菌株的16S rRNA片段的PCR擴增結果；
[0024]圖5為本專利技術實施例1中Bb49菌株的16S rRNA序列在Gen Bank數據庫比對結果。
具體實施方式
[0025]為了使本專利技術的目的、技術方案及優點更加清楚明白，以下結合具體實施例，對本專利技術進行進一步詳細說明。應當理解，此處所描述的具體實施例僅僅用以解釋本專利技術，并不用于限定本專利技術。
[0026]以下實施例中采用的枯草芽孢桿菌為實驗室自行保存的具有抗燒傷作用醫用級枯草芽孢桿菌(編號316)。
[0027]以下實施例中采用的培養基的配置方法如下：
[0028]LB液體培養基：酵母提取物5g，胰蛋白胨10g，氯化鈉10g，加蒸餾水至950mL，用氫氧化鈉調節pH至7.0，121℃滅菌20min。
[0029]LB固體培養基：酵母提取物5g，胰蛋白胨10g，氯化鈉10g，加蒸餾水至900mL，用氫氧化鈉調節pH＝7.本文檔來自技高網...
【技術保護點】
【技術特征摘要】
1.一株短短芽孢桿菌Bb49菌株，其特征在于，其分類名稱為短短芽孢桿菌(Brevibacillus hrevis)，于2022年10月31日保藏在中國典型培養物保藏中心，其保藏編號為CCTCC NO:M 20221699；保藏地址為武漢大學。2.權利要求1所述的短短芽孢桿菌Bb49菌株在制備抑制金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌中至少一種致病菌的產品中的應用。3.權利要求1所述的短短芽孢桿菌Bb49菌株在制備抗燒燙傷感染產品中的應用。4.權利要求1所述的短短芽孢桿菌Bb49菌株的菌懸液。5.根據權利要求4所述的菌懸液，其特征在于，所述菌懸液的制備方法包括以下步驟：將活...
【專利技術屬性】
技術研發人員：趙利維，岳旭良，張金秀，呂建華，王立安，
申請(專利權)人：河北中醫學院，
類型：發明
國別省市：
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