用于抑制C3基因表達的雙鏈核糖核酸及其修飾物、綴合物和用途制造技術(shù)

本公開涉及用于抑制C3基因表達的雙鏈核糖核酸及其修飾物、綴合物和用途。具體來說，本公開涉及一種用于抑制C3基因表達的雙鏈核糖核酸、雙鏈核糖核酸修飾物、雙鏈核糖核酸綴合物、藥物組合物和用途，以及用于抑制細胞內(nèi)C3基因表達的方法。本公開提供的雙鏈核糖核酸，能夠在細胞內(nèi)結(jié)合形成RNA誘導(dǎo)沉默復(fù)合物(RISC)，切割補體C3基因轉(zhuǎn)錄的mRNA，高效、特異地抑制補體C3基因的表達，用于治療補體系統(tǒng)的不適當(dāng)?shù)募せ罱閷?dǎo)的疾病，在臨床疾病治療中具有重要應(yīng)用前景。有重要應(yīng)用前景。

【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
用于抑制C3基因表達的雙鏈核糖核酸及其修飾物、綴合物和用途


[0001]本公開屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域，具體來說，本公開涉及一種用于抑制C3基因表達的雙鏈核糖核酸、雙鏈核糖核酸修飾物、雙鏈核糖核酸綴合物、藥物組合物和用途，以及用于抑制細胞內(nèi)C3基因表達的方法。

技術(shù)介紹

[0002]補體(Complement，C)是存在于人和動物血清與組織液中的一組不耐熱、經(jīng)活化后具有酶活性、可介導(dǎo)免疫應(yīng)答和炎癥反應(yīng)的蛋白質(zhì)。補體系統(tǒng)(Complement system)被激活后，介導(dǎo)一系列的細胞反應(yīng)，如細胞溶解、調(diào)理吞噬(抗原抗體結(jié)合)、炎癥反應(yīng)、清除免疫復(fù)合物等。補體系統(tǒng)主要由固有成分、調(diào)節(jié)蛋白及受體等30余種糖蛋白組成，這些蛋白質(zhì)以血液中可溶性蛋白存在或以膜相關(guān)蛋白存在。補體的激活引起依序的酶促反應(yīng)級聯(lián)(稱為補體激活途徑)，從而導(dǎo)致有效的過敏毒素C3a和C5a的形成，這些過敏毒素誘發(fā)從化學(xué)吸引到細胞凋亡范圍內(nèi)的多種生理學(xué)反應(yīng)。
[0003]已知補體激活通過三種不同途徑發(fā)生：旁路途徑、經(jīng)典途徑和凝集素途徑，涉及主要作為非活性酶原存在的蛋白質(zhì)，然后這些非活性酶原依序地切割并且激活。三條途徑起始物各異，但相互交叉并具有共同的末端通路。經(jīng)典途徑的激活始于C1q與免疫復(fù)合物的Fc段結(jié)合，依賴特異性抗體的產(chǎn)生，故在感染后期或恢復(fù)期發(fā)揮作用。旁路途徑則由細菌、真菌或病毒感染細胞等直接為自發(fā)產(chǎn)生的C3b提供反應(yīng)表面啟動激活，無需抗體存在，故在抗體產(chǎn)生前的感染早期或初次感染發(fā)揮作用。凝集素途徑也無需抗體參與即可激活補體，其激活物質(zhì)非常廣泛，主要是MBL或纖維膠原素直接識別病原微生物表面的N氨基半乳糖或甘露糖，除識別機制不同于經(jīng)典途徑外，其后續(xù)活化途徑基本相同，對經(jīng)典途徑和旁路途徑具有交叉促進作用。三條補體激活途徑在C3這一環(huán)節(jié)匯合進入共有的末端通路,形成C5轉(zhuǎn)化酶，激活C5裂解成C5a和C5b。C5b結(jié)合于細胞表面，依次與C6、C7、C8和12～15個C9分子結(jié)合形成C5b6789n，即膜攻擊復(fù)合物(MAC)，介導(dǎo)細胞溶解效應(yīng)。
[0004]補體系統(tǒng)的不適當(dāng)?shù)募せ钍窃谠S多疾病中的增殖和/或起始病變的原因，這些疾病包括例如，陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥、非典型溶血性尿毒癥綜合征、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、慢性腎病、缺血再灌注損傷以及神經(jīng)退行性疾病。
[0005]開發(fā)C3補體抑制劑是一項有前景的治療方法，2021年5月，美國FDA批準(zhǔn)Apellis Pharmaceuticals公司的Empaveli(為合成環(huán)狀肽)上市，用于治療初治陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿(PNH)患者，這是首個且唯一個用于治療PNH的C3靶向療法。因此，開發(fā)新型補體C3抑制劑擁有巨大的臨床價值和市場前景。

技術(shù)實現(xiàn)思路

[0006]專利技術(shù)要解決的問題
[0007]鑒于現(xiàn)有技術(shù)中存在的問題，例如，需要開發(fā)更多C3補體抑制劑，用于治療補體系
統(tǒng)的不適當(dāng)?shù)募せ罱閷?dǎo)的疾病。本公開旨在提供一系列用于抑制補體C3基因表達的雙鏈核糖核酸、雙鏈核糖核酸修飾物、雙鏈核糖核酸綴合物及藥物組合物，能夠抑制C3基因表達，在臨床疾病治療中具有重要應(yīng)用前景。
[0008]用于解決問題的方案
[0009][1].一種雙鏈核糖核酸，所述雙鏈核糖核酸包括正義鏈和反義鏈，所述正義鏈與所述反義鏈互補和/或基本上反向互補形成所述雙鏈核糖核酸的雙鏈區(qū)；
[0010]其中，所述正義鏈包含與靶標(biāo)序列中至少15個連續(xù)核苷酸的差異不超過3個核苷酸的序列A，所述反義鏈包含與靶標(biāo)序列中至少15個連續(xù)核苷酸的反向互補序列的差異不超過3個核苷酸的序列B；
[0011]所述靶標(biāo)序列選自如SEQ ID NO:1
?
7任一項所示的核苷酸序列。
[0012][2].根據(jù)[1]所述的雙鏈核糖核酸，其中，所述靶標(biāo)序列選自如SEQ ID NO:8
?
34、SEQ ID NO:364任一項所示的核苷酸序列，所述正義鏈包含如SEQ ID NO:8
?
34、SEQ ID NO:364任一項所示的核苷酸序列中至少15個連續(xù)核苷酸組成的序列A，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:8
?
34、SEQ ID NO:364任一項所示的核苷酸序列中至少15個連續(xù)核苷酸組成的序列反向互補和/或基本上反向互補的序列B。
[0013][3].根據(jù)[1]或[2]所述的雙鏈核糖核酸，其中，所述正義鏈由15
?
28個核苷酸組成，優(yōu)選19
?
25個核苷酸，更優(yōu)選19
?
23個核苷酸，更優(yōu)選19、21或23個核苷酸。
[0014][4].根據(jù)[3]所述的雙鏈核糖核酸，其中，所述正義鏈的核苷酸序列為SEQ ID NO:8
?
34、SEQ ID NO:364任一項所示的核苷酸序列中的15
?
28個連續(xù)核苷酸組成的序列A，優(yōu)選19
?
25個連續(xù)核苷酸，更優(yōu)選19
?
23個連續(xù)核苷酸，更優(yōu)選19、21或23個核苷酸。
[0015][5].根據(jù)[1]?
[4]任一項所述的雙鏈核糖核酸，其中，所述反義鏈由15
?
28個核苷酸組成，優(yōu)選19
?
25個核苷酸，更優(yōu)選19
?
23個核苷酸，更優(yōu)選19、21或23個核苷酸。
[0016][6].根據(jù)[5]所述的雙鏈核糖核酸，其中，所述反義鏈的核苷酸序列是與SEQ ID NO:8
?
34、SEQ ID NO:364任一項所示的核苷酸序列中的15
?
28個連續(xù)核苷酸組成的序列反向互補和/或基本上反向互補的序列B，優(yōu)選19
?
25個連續(xù)核苷酸，更優(yōu)選19
?
23個連續(xù)核苷酸，更優(yōu)選19、21或23個核苷酸。
[0017][7].根據(jù)[1]?
[6]任一項所述的雙鏈核糖核酸，其中，所述雙鏈區(qū)的長度為15
?
25個核苷酸，優(yōu)選19
?
23個核苷酸，更優(yōu)選19
?
21個核苷酸，更優(yōu)選19、21或23個核苷酸。
[0018][8].根據(jù)[1]?
[7]任一項所述的雙鏈核糖核酸，其中，
[0019]所述正義鏈與所述反義鏈互補形成所述雙鏈區(qū)，且所述正義鏈的3
’
末端具有1
?
2個延伸出所述雙鏈區(qū)的突出的核苷酸，所述反義鏈的3
’
末端形成平末端；或者，
[0020]所述正義鏈與所述反義鏈互補形成所述雙鏈區(qū)，且所述反義鏈的3
’
末端具有1
?
2個延伸出所述雙鏈區(qū)的突出的核苷酸，所述正義鏈的3
’
末端形成平末端；或者，
[0021]所述正義鏈與所述反義鏈互補形成所述雙鏈區(qū)，且所述正義鏈與所述反義鏈的3
’
末端均具有1
?
2個延伸出所本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護點】

【技術(shù)特征摘要】
1.一種雙鏈核糖核酸，所述雙鏈核糖核酸包括正義鏈和反義鏈，所述正義鏈與所述反義鏈互補和/或基本上反向互補形成所述雙鏈核糖核酸的雙鏈區(qū)；其中，所述正義鏈包含與靶標(biāo)序列中至少15個連續(xù)核苷酸的差異不超過3個核苷酸的序列A，所述反義鏈包含與靶標(biāo)序列中至少15個連續(xù)核苷酸的反向互補序列的差異不超過3個核苷酸的序列B；所述靶標(biāo)序列選自如SEQ ID NO:1
?
7任一項所示的核苷酸序列。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的雙鏈核糖核酸，其中，所述靶標(biāo)序列選自如SEQ ID NO:8
?
34、SEQ ID NO:364任一項所示的核苷酸序列，所述正義鏈包含如SEQ ID NO:8
?
34、SEQ ID NO:364任一項所示的核苷酸序列中至少15個連續(xù)核苷酸組成的序列A，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:8
?
34、SEQ ID NO:364任一項所示的核苷酸序列中至少15個連續(xù)核苷酸組成的序列反向互補和/或基本上反向互補的序列B。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的雙鏈核糖核酸，其中，所述正義鏈由15
?
28個核苷酸組成，優(yōu)選19
?
25個核苷酸，更優(yōu)選19
?
23個核苷酸，更優(yōu)選19、21或23個核苷酸。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的雙鏈核糖核酸，其中，所述正義鏈的核苷酸序列為SEQ ID NO:8
?
34、SEQ ID NO:364任一項所示的核苷酸序列中的15
?
28個連續(xù)核苷酸組成的序列A，優(yōu)選19
?
25個連續(xù)核苷酸，更優(yōu)選19
?
23個連續(xù)核苷酸，更優(yōu)選19、21或23個核苷酸。5.根據(jù)權(quán)利要求1
?
4任一項所述的雙鏈核糖核酸，其中，所述反義鏈由15
?
28個核苷酸組成，優(yōu)選19
?
25個核苷酸，更優(yōu)選19
?
23個核苷酸，更優(yōu)選19、21或23個核苷酸。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的雙鏈核糖核酸，其中，所述反義鏈的核苷酸序列是與SEQ ID NO:8
?
34、SEQ ID NO:364任一項所示的核苷酸序列中的15
?
28個連續(xù)核苷酸組成的序列反向互補和/或基本上反向互補的序列B，優(yōu)選19
?
25個連續(xù)核苷酸，更優(yōu)選19
?
23個連續(xù)核苷酸，更優(yōu)選19、21或23個核苷酸。7.根據(jù)權(quán)利要求1
?
6任一項所述的雙鏈核糖核酸，其中，所述雙鏈區(qū)的長度為15
?
25個核苷酸，優(yōu)選19
?
23個核苷酸，更優(yōu)選19
?
21個核苷酸，更優(yōu)選19、21或23個核苷酸。8.根據(jù)權(quán)利要求1
?
7任一項所述的雙鏈核糖核酸，其中，所述正義鏈與所述反義鏈互補形成所述雙鏈區(qū)，且所述正義鏈的3
’
末端具有1
?
2個延伸出所述雙鏈區(qū)的突出的核苷酸，所述反義鏈的3
’
末端形成平末端；或者，所述正義鏈與所述反義鏈互補形成所述雙鏈區(qū)，且所述反義鏈的3
’
末端具有1
?
2個延伸出所述雙鏈區(qū)的突出的核苷酸，所述正義鏈的3
’
末端形成平末端；或者，所述正義鏈與所述反義鏈互補形成所述雙鏈區(qū)，且所述正義鏈與所述反義鏈的3
’
末端均具有1
?
2個延伸出所述雙鏈區(qū)的突出的核苷酸；或者，所述正義鏈與所述反義鏈互補形成所述雙鏈區(qū)，且所述正義鏈與所述反義鏈的3
’
末端均形成平末端。9.根據(jù)權(quán)利要求1
?
8任一項所述的雙鏈核糖核酸，其中，所述正義鏈與所述反義鏈選自如下組合：1)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:35所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:131所示的核苷酸序列；2)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:36所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:132所示的核苷酸序列；
NO:152所示的核苷酸序列；23)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:57所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:153所示的核苷酸序列；24)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:58所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:154所示的核苷酸序列；25)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:59所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:155所示的核苷酸序列；26)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:60所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:156所示的核苷酸序列；27)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:61所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:157所示的核苷酸序列；28)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:62所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:158所示的核苷酸序列；29)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:63所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:159所示的核苷酸序列；30)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:64所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:160所示的核苷酸序列；31)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:65所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:161所示的核苷酸序列；32)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:66所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:162所示的核苷酸序列；33)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:67所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:163所示的核苷酸序列；34)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:68所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:164所示的核苷酸序列；35)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:69所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:165所示的核苷酸序列；36)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:70所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:166所示的核苷酸序列；37)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:71所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:167所示的核苷酸序列；38)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:72所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:168所示的核苷酸序列；39)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:73所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:169所示的核苷酸序列；40)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:74所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:170所示的核苷酸序列；41)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:75所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:171所示的核苷酸序列；
NO:191所示的核苷酸序列；62)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:96所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:192所示的核苷酸序列；63)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:97所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:193所示的核苷酸序列；64)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:98所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:194所示的核苷酸序列；65)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:99所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:195所示的核苷酸序列；66)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:100所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:196所示的核苷酸序列；67)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:101所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:197所示的核苷酸序列；68)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:102所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:198所示的核苷酸序列；69)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:103所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:199所示的核苷酸序列；70)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:104所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:200所示的核苷酸序列；71)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:105所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:201所示的核苷酸序列；72)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:106所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:202所示的核苷酸序列；73)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:107所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:203所示的核苷酸序列；74)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:108所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:204所示的核苷酸序列；75)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:109所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:205所示的核苷酸序列；76)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:110所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:206所示的核苷酸序列；77)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:111所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:207所示的核苷酸序列；78)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:112所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:208所示的核苷酸序列；79)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:113所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:209所示的核苷酸序列；80)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:114所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:210所示的核苷酸序列；
NO:350所示的核苷酸序列；123)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:333所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:351所示的核苷酸序列；124)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:334所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:352所示的核苷酸序列；125)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:335所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:353所示的核苷酸序列；126)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:336所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:354所示的核苷酸序列；127)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:337所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:355所示的核苷酸序列；128)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:338所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:356所示的核苷酸序列；129)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:339所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:357所示的核苷酸序列；130)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:340所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:358所示的核苷酸序列；131)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:341所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:359所示的核苷酸序列；132)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:342所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:360所示的核苷酸序列；133)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:343所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:361所示的核苷酸序列；134)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:344所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:362所示的核苷酸序列；135)所述正義鏈包含如SEQ ID NO:345所示的核苷酸序列，所述反義鏈包含如SEQ ID NO:363所示的核苷酸序列。10.根據(jù)權(quán)利要求1
?
9任一項所述的雙鏈核糖核酸，其中，所述正義鏈中每個核苷酸彼此獨立地為修飾的核苷酸或未修飾的核苷酸，和/或，所述反義鏈中每個核苷酸彼此獨立地為修飾的核苷酸或未修飾的核苷酸。11.根據(jù)權(quán)利要求1
?
10任一項所述的雙鏈核糖核酸，其中，所述正義鏈中任意相連的兩個核苷酸由磷酸二酯鍵或硫代磷酸二酯鍵連接，和/或，所述反義鏈中任意相連的兩個核苷酸由磷酸二酯鍵或硫代磷酸二酯鍵連接。12.根據(jù)權(quán)利要求1
?
11任一項所述的雙鏈核糖核酸，其中，所述正義鏈的5
’
末端核苷酸連接5
’
磷酸基團或5
’
磷酸衍生基團，和/或，所述反義鏈的5
’
末端核苷酸連接5
’
磷酸基團或5
’
磷酸衍生基團。13.根據(jù)權(quán)利要求1
?
12任一項所述的雙鏈核糖核酸，其中，所述雙鏈核糖核酸為siRNA。14.根據(jù)權(quán)利要求1
?
13任一項所述的雙鏈核糖核酸，其中，所述雙鏈核糖核酸為用于抑制C3基因表達的siRNA。
15.一種雙鏈核糖核酸修飾物，其為如權(quán)利要求1
?
14任一項所述的雙鏈核糖核酸的修飾物，所述雙鏈核糖核酸修飾物包含如下至少一種的化學(xué)修飾：(1)正義鏈中至少一個核苷酸的修飾，(2)正義鏈中至少一個位置處的磷酸二酯鍵的修飾，(3)反義鏈中至少一個核苷酸的修飾，(4)反義鏈中至少一個位置處的磷酸二酯鍵的修飾；任選地，所述雙鏈核糖核酸的正義鏈中序列A的3
’
末端連接由1
?
2個核苷酸組成的序列D，優(yōu)選由1
?
2個胸腺嘧啶脫氧核糖核苷酸組成的序列D；和/或，所述雙鏈核糖核酸的反義鏈中序列B的3
’
末端連接由1
?
2個核苷酸組成的序列E，優(yōu)選由1
?
2個胸腺嘧啶脫氧核糖核苷酸組成的序列E；和/或，所述雙鏈核糖核酸的正義鏈中序列A的3
’
末端排除1
?
2個核苷酸后形成序列A
’
；可選地，所述雙鏈核糖核酸修飾物的正義鏈和反義鏈選自如下的序列組合：所述正義鏈的核苷酸序列為序列A所示的序列，所述反義鏈的核苷酸序列為序列B所示的序列；或者，所述正義鏈的核苷酸序列為序列A所示的序列，所述反義鏈的核苷酸序列為序列B連接序列E所示的序列；或者，所述正義鏈的核苷酸序列為序列A連接序列D所示的序列，所述反義鏈的核苷酸序列為序列B所示的序列；或者，所述正義鏈的核苷酸序列為序列A連接序列D所示的序列，所述反義鏈的核苷酸序列為序列B連接序列E所示的序列；或者，所述正義鏈的核苷酸序列為序列A
’
所示的序列，所述反義鏈的核苷酸序列為序列B所示的序列；或者，所述正義鏈的核苷酸序列為序列A
’
所示的序列，所述反義鏈的核苷酸序列為序列B連接序列E所示的序列。16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的雙鏈核糖核酸修飾物，其中，所述核苷酸的修飾選自2
’?
氟代修飾，2
’?
烷氧基修飾，2
’?
取代的烷氧基修飾，2
’?
烷基修飾，2
’?
取代的烷基修飾，2
’?
脫氧修飾，核苷酸衍生物修飾或其中任意兩種以上的組合。17.根據(jù)權(quán)利要求15或16所述的雙鏈核糖核酸修飾物，其中，所述核苷酸的修飾選自2
’?
F修飾、2
’?
O
?
CH3修飾、2
’?
O
?
CH2?
CH2?
O
?
CH3修飾、2
’?
O
?
CH2?
CH＝CH2修飾、2
’?
CH2?
CH2?
CH＝CH2修飾、2
’?
脫氧修飾，核苷酸衍生物修飾或其中任意兩種以上的組合。18.根據(jù)權(quán)利要求16或17所述的雙鏈核糖核酸修飾物，其中，所述核苷酸衍生物修飾中的核苷酸衍生物選自異核苷酸、LNA、ENA、cET、UNA或GNA。19.根據(jù)權(quán)利要求15
?
18任一項所述的雙鏈核糖核酸修飾物，其中，沿5
’
末端向3
’
末端方向，所述正義鏈中第7位、第9位、第10位和第11位的核糖核苷酸為2
’?
F修飾的核糖核苷酸，所述正義鏈中其余位置的核糖核苷酸為2
’?
O
?
CH3修飾的核糖核苷酸。20.根據(jù)權(quán)利要求15
?
19任一項所述的雙鏈核糖核酸修飾物，其中，沿5
’
末端向3
’
末端方向，所述正義鏈包含位于如下所示位置處的硫代磷酸二酯鍵：所述正義鏈5
’
末端起始的第1個核苷酸與第2個核苷酸之間；所述正義鏈5
’
末端起始的第2個核苷酸與第3個核苷酸之間；
所述正義鏈3
’
末端起始的第1個核苷酸與第2個核苷酸之間；所述正義鏈3
’
末端起始的第2個核苷酸與第3個核苷酸之間；或者，所述正義鏈包含位于如下所示位置處的硫代磷酸二酯鍵：所述正義鏈5
’
末端起始的第1個核苷酸與第2個核苷酸之間；所述正義鏈5
’
末端起始的第2個核苷酸與第3個核苷酸之間。21.根據(jù)權(quán)利要求15
?
20任一項所述的雙鏈核糖核酸修飾物，其中，沿5
’
末端向3
’
末端方向，所述反義鏈中任意奇數(shù)位置處的核糖核苷酸為2
’?
O
?
CH3修飾的核糖核苷酸，所述反義鏈中任意偶數(shù)位置處的核糖核苷酸為2
’?
F修飾的核糖核苷酸；或者，沿5
’
末端向3
’
末端方向，所述反義鏈中第2位、第6位、第14位和第16位的核糖核苷酸為2
’?
F修飾的核糖核苷酸，所述反義鏈中其余位置的核糖核苷酸為2
’?
O
?
CH3修飾的核糖核苷酸；或者，沿5
’
末端向3
’
末端方向，所述反義鏈中第2位、第6位、第8位、第9位、第14位和第16位的核糖核苷酸為2
’?
F修飾的核糖核苷酸，所述反義鏈中其余位置的核糖核苷酸為2
’?
O
?
CH3修飾的核糖核苷酸；或者，沿5
’
末端向3
’
末端方向，所述反義鏈中第2位、第14位和第16位的核糖核苷酸為2
’?
F修飾的核糖核苷酸，所述反義鏈中第6位的核糖核苷酸為核苷酸衍生物GNA修飾的核糖核苷酸，所述反義鏈中其余位置的核糖核苷酸為2
’?
O
?
CH3修飾的核糖核苷酸；或者，沿5
’
末端向3
’
末端方向，所述反義鏈中第2位、第6位、第14位和第16位的核糖核苷酸為2
’?
F修飾的核糖核苷酸，所述反義鏈中第7位的核糖核苷酸為核苷酸衍生物GNA修飾的核糖核苷酸，所述反義鏈中其余位置的核糖核苷酸為2
’?
O
?
CH3修飾的核糖核苷酸。22.根據(jù)權(quán)利要求15
?
21任一項所述的雙鏈核糖核酸修飾物，其中，沿5
’
末端向3
’
末端方向，所述反義鏈的5
’
末端的核苷酸連接5
’
磷酸基團或5
’
磷酸衍生基團。23.根據(jù)權(quán)利要求15
?
22任一項所述的雙鏈核糖核酸修飾物，其中，所述反義鏈包含位于如下所示位置處的硫代磷酸二酯鍵：所述反義鏈5
’
末端起始的第1個核苷酸與第2個核苷酸之間；所述反義鏈5
’
末端起始的第2個核苷酸與第3個核苷酸之間；所述反義鏈3
’
末端起始的第1個核苷酸與第2個核苷酸之間；所述反義鏈3
’
末端起始的第2個核苷酸與第3個核苷酸之間。24.根據(jù)權(quán)利要求15
?
23任一項所述的雙鏈核糖核酸修飾物，其中，所述雙鏈核糖核酸修飾物的正義鏈具有如(a1)
?
(a5)任一項所示的結(jié)構(gòu)：(a1)5
’?
mN1?
(s)
?
mN2?
(s)
?
mN3?
mN4?
mN5?
mN6?
N7f
?
mN8?
N9f
?
N
10
f
?
N
11
f
?
mN
12
?
mN
13
?
mN
14
?
mN
15
?
mN
16
?
mN
17
?
mN
18
?
mN
19
?
(s)
?
T
?
(s)
?
T
?3’
，(a2)5
’?
mN1?
(s)
?
mN2?
(s)
?
mN3?
mN4?
mN5?
mN6?
N7f
?
mN8?
N9f
?
N
10
f
?
N
11
f
?
mN
12
?
mN
13
?
mN
14
?
mN
15
?
mN
16
?
mN
17
?
mN
18
?
mN
19
?
(s)
?
mN
20
?
(s)
?
mN
21
?3’
，(a3)5
’?
mN1?
(s)
?
mN2?
(s)
?
mN3?
mN4?
mN5?
mN6?
N7f
?
mN8?
N9f
?
N
10
f
?
N
11
f
?
mN
12
?
mN
13
?
mN
14
?
mN
15
?
mN
16
?
mN
17
?
mN
18
?
mN
19
?
mN
20
?
mN
21
?
(s)
?
mN
22
?
(s)
?
mN
23
?3’
，(a4)5
’?
mN1?
(s)
?
mN2?
(s)
?
mN3?
mN4?
mN5?
mN6?
N7f
?
mN8?
N9f
?
N
10
f
?
N
11
f
?
mN
12
?
mN
13
?
mN
14
?
mN
15
?
mN
16
?
mN
17
?
mN
18
?
mN
19
?3’
，
(a5)5
’?
mN1?
(s)
?
mN2?
(s)
?
mN3?
mN4?
mN5?
mN6?
N7f
?
mN8?
N9f
?
N
10
f
?
N
11
f
?
mN
12
?
mN
13
?
mN
14
?
mN
15
?
mN
16
?
mN
17
?
mN
18
?
mN
19
?
mN
20
?
mN
21
?3’
；其中，N1?
N
23
彼此獨立地選自堿基為A、U、C或G的核糖核苷酸，大寫字母T表示堿基為胸腺嘧啶的脫氧核糖核苷酸，小寫字母m表示該字母m右側(cè)相鄰的一個核糖核苷酸為2
’?
O
?
CH3修飾的核糖核苷酸，小寫字母f表示該字母f左側(cè)相鄰的一個核糖核苷酸為2
’?
F修飾的核糖核苷酸，
?
(s)
?
表示前后相鄰的兩個核苷酸以硫代磷酸二酯鍵連接。25.根據(jù)權(quán)利要求15
?
24任一項所述的雙鏈核糖核酸修飾物，其中，所述雙鏈核糖核酸修飾物的反義鏈具有如(b1)
?
(b
15
)任一項所示的結(jié)構(gòu)：(b1)5
’?
P1mN1?
(s)
?
N2f
?
(s)
?
mN3?
N4f
?
mN5?
N6f
?
mN7?
N8f
?
mN9?
N
10
f
?
mN
11
?
N
12
f
?
mN
13
?
N
14
f
?
m N
15
?
N
16
f
?
mN
17
?
N
18
f
?
mN
19
?
(s)
?
T
?
(s)
?
T
?3’
，(b2)5
’?
P1mN1?
(s)
?
N2f
?
(s)
?
mN3?
N4f
?
mN5?
N6f
?
mN7?
N8f
?
mN9?
N
10
f
?
mN
11
?
N
12
f
?
mN
13
?
N
14
f
?
m N
15
?
N
16
f
?
mN
17
?
N
18
f
?
mN
19
?
(s)
?
N
20
f
?
(s)
?
mN
21
?3’
，(b3)5
’?
P1mN1?
(s)
?
N2f
?
(s)
?
mN3?
N4f
?
mN5?
N6f
?
mN7?
N8f
?
mN9?
N
10
f
?
mN
11
?
N
12
f
?
mN
13
?
N
14
f
?
m N
15
?
N
16
f
?
mN
17
?
N
18
f
?
mN
19
?
N
20
f
?
mN
21
?
(s)
?
N
22
f
?
(s)
?
mN
23
?3’
，(b4)5
’?
P1mN1?
(s)
?
N2f
?
(s)
?
mN3?
mN4?
mN5?
N6f
?
mN7?
mN8?
mN9?
mN
10
?
mN
11
?
mN
12
?
mN
13
?
N
14
f
?
mN
15
?
N
16
f
?
mN
17
?
mN
18
?
mN
19
?
(s)
?
T
?
(s)
?
T
?3’
，(b5)5
’?
P1mN1?
(s)
?
N2f
?
(s)
?
mN3?
mN4?
mN5?
N6f
?
mN7?
mN8?
mN9?
mN
10
?
mN
11
?
mN
12
?
mN
13
?
N
14
f
?
mN
15
?
N
16
f
?
mN
17
?
mN
18
?
mN
19
?
(s)
?
mN
20
?
(s)
?
mN
21
?3’
，(b6)5
’?
P1mN1?
(s)
?
N2f
?
(s)
?
mN3?
mN4?
mN5?
N6f
?
mN7?
mN8?
mN9?
mN
10
?
mN
11
?
mN
12
?
mN
13
?
N
14
f
?
mN
15
?
N
16
f
?
mN
17
?
mN
18
?
mN
19
?
mN
20
?
mN
21
?
(s)
?
mN
22
?
(s)
?
mN
23
?3’
，(b7)5
’?
P1mN1?
(s)
?
N2f
?
(s)
?
mN3?
mN4?
mN5?
N6f
?
mN7?
N8f
?
N9f
?
mN
10
?
mN
11
?
mN
12
?
mN
13
?
N
14
f
?
mN
15
?
N
16
f
?
mN
17
?
mN
18
?
mN
19
?
(s)
?
T
?
(s)
?
T
?3’
，(b8)5
’?
P1mN1?
(s)
?
N2f
?
(s)
?
mN3?
mN4?
mN5?
N6f
?
mN7?
N8f
?
N9f
?
mN
10
?
mN
11
?
mN
12
?
mN
13
?
N
14
f
?
mN
15
?
N
16
f
?
mN
17
?
mN
18
?
mN
19
?
(s)
?
mN
20
?
(s)
?
mN
21
?3’
，(b9)5
’?
P1mN1?
(s)
?
N2f
?
(s)
?
mN3?
mN4?
mN5?
N6f
?
mN7?
N8f
?
N9f
?
mN
10
?
mN
11
?
mN
12
?
mN
13
?
N
14
f
?
mN
15
?
N
16
f
?
mN
17
?
mN
18
?
mN
19
?

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：王書成，黃河，劉薇，王巖，林國良，汪小君，榮梅，
申請(專利權(quán))人：北京福元醫(yī)藥股份有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：