含有腺相關病毒載體的改善的藥物組合物制造技術

本發明專利技術提供了包含重組AAV和一種或多種藥學上可接受的賦形劑的組合物。與其他AAV組合物相比，該組合物具有改善的穩定性和保存期限。限。

【技術實現步驟摘要】
【國外來華專利技術】含有腺相關病毒載體的改善的藥物組合物
[0001]相關申請的交叉引用
[0002]本申請要求2020年12月18日提交的美國申請號63/127,826的優先權，其內容通過引用整體并入本文。
[0003]序列表
[0004]本申請包含序列表，該序列表以ASCII格式以電子方式提交，并且在此通過引用整體并入。所述ASCII副本創建于2021年12月1日，命名為025297_WO029_SL.txt，并且大小為19,967字節。
[0005]專利技術背景
[0006]基因療法是治療遺傳疾病的很有前景的方法。它向患者引入缺陷基因的健康拷貝，或使功能不適當的突變基因失活。基因療法研究特別感興趣的遺傳疾病是A型血友病。A型血友病，也稱為經典型血友病，是X連鎖遺傳疾病，其中血液凝固過程由于編碼因子VIII的基因缺失或有缺陷而受損。患有A型血友病的患者會出現內部出血(例如，在關節和肌肉內)或外部出血(例如，由于輕微割傷、外傷或牙科手術)。因子VIII的正常血漿水平范圍為50％至100％。輕度A型血友病的特征在于血液中因子VIII的水平為6％至49％；患者通常僅在嚴重受傷、外傷或手術后出血。中度A型血友病的特征在于血液中因子VIII的水平為1％至5％；患者在受傷后有出血事件。重度A型血友病的特征在于血液中因子VIII的水平低于1％；患者在受傷后經歷出血并且還具有頻繁的自發性出血事件，通常發生在關節和肌肉中。另請參見國家血友病基金會的網站。A型血友病通常用替代性因子VIII進行按需(在出血時)或預防性治療。一些患者會產生針對替代性因子的同種抗體(又名抑制劑)，從而導致治療無效。目前的療法很繁瑣，因為它們需要頻繁的靜脈注射，而且發展中國家的資源也有限。因此，基因療法為治療A型血友病提供了很有前景的方法。
[0007]已經探索了重組腺相關病毒(rAAV)作為基因療法中基因遞送的平臺。腺相關病毒(AAV)是小型無包膜病毒，屬于細小病毒科和依賴性細小病毒屬。該病毒包含包裝在衣殼中的單鏈DNA基因組，該衣殼由三種衣殼蛋白—病毒蛋白(VP)1、VP2和VP3組裝而成。將rAAV制劑配制成臨床使用的藥物組合物一直是一個挑戰。已經觀察到常用的rAAV配制劑會隨著時間的推移或在實驗室模擬的壓力測試中形成可見的沉淀物。如果不加以解決，這些沉淀物會對患者安全構成危險。從一些rAAV配制劑觀察到的物理穩定性問題也可能對產品在儲存、運輸和向患者施用所需的保存期限內的功效產生負面影響(參見，例如，Wright et al.,Molecular Therapy(2005)12(1):171
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8；Croyle et al.,Gene Therapy(2001)8:1281
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90)。因此，需要開發改善的rAAV載體的配制劑，使得它們在基因療法中的治療潛力能夠充分發揮。
[0008]專利技術概述
[0009]本公開提供了適用于臨床施用的穩定的rAAV載體配制劑。在一方面，本公開提供了藥物組合物，其包含rAAV載體、氯化鈉(NaCl)、氯化鉀(KCl)、磷酸氫二鈉(Na2HPO4)、磷酸二氫鉀(KH2PO4)、氯化鎂(MgCl2)、多元醇(例如蔗糖)和泊洛沙姆(例如泊洛沙姆188)，任選地，其中組合物包含不超過約0.1mM的氯化鈣并且具有約7.1至約7.5的pH。
[0010]在一些實施方案中，組合物含有約0.1至約2.0mM(例如，約0.5mM或更高、約1.3mM或更高、或約1.4mM)的氯化鎂。
[0011]在一些實施方案中，組合物含有約150至約200mM，任選地約172mM的氯化鈉。
[0012]在一些實施方案中，組合物含有約2.5至約3.0mM，任選地約2.7mM的氯化鉀。
[0013]在一些實施方案中，組合物含有約5至約10mM，任選地約8mM的磷酸氫二鈉。
[0014]在一些實施方案中，組合物含有約1.0至約2.0mM，任選地約1.5mM的磷酸二氫鉀。
[0015]在一些實施方案中，組合物含有約0.5％至約2％(w/v)，任選地約1％(w/v)的蔗糖。
[0016]在一些實施方案中，組合物含有約0.01％至約0.1％(w/v)，任選地約0.05％(w/v)的泊洛沙姆188。
[0017]在特定的實施方案中，本公開提供了藥物組合物，其包含rAAV載體、約171.81mM氯化鈉、約2.68mM氯化鉀、約8.10mM磷酸氫二鈉、約1.47mM磷酸二氫鉀、約1.40mM氯化鎂、約1.00％(w/v)蔗糖和約0.05％(w/v)泊洛沙姆188，任選地，其中組合物包含不超過約0.1mM的氯化鈣并且具有約7.1至約7.5的pH。
[0018]在其他特定的實施方案中，本公開提供了藥物組合物，其包含rAAV載體、約172mM氯化鈉、約2.68mM氯化鉀、約8.10mM磷酸氫二鈉、約1.47mM磷酸二氫鉀、約0.49mM氯化鎂、約1.00％(w/v)蔗糖和約0.05％(w/v)泊洛沙姆188，任選地，其中組合物包含不超過約0.1mM的氯化鈣并且具有約7.1至約7.5的pH。
[0019]在一些實施方案中，本專利技術組合物中的rAAV包含基因組，該基因組包含治療性蛋白質如人因子VIII多肽(例如，SEQ ID NO:1)的表達盒。在特定的實施方案中，AAV基因組包含SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:2的核苷酸131
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5,024。
[0020]在一些實施方案中，組合物含有約1.0E+12至約1.0E+14個載體基因組(vg)每mL，任選地約1.0E+13至約5.0E+13個vg每mL(例如，約1.0E+13個vg每mL)的rAAV。
[0021]在一些實施方案中，rAAV包含AAV6衣殼蛋白(例如，具有AAV6衣殼)。在一些實施方案中，AAV基因組包含來自AAV2的反向末端重復(ITR)。
[0022]在另一方面，本公開提供了包含5
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10mL、任選地6.4mL的本專利技術組合物的小瓶。小瓶可以由例如環烯烴共聚物制成，和/或可以具有原位熱塑性彈性體塞子。
[0023]在另一方面，本公開提供了治療需要治療性蛋白質的患者的方法，該方法包括向患者施用本專利技術的組合物。在一些實施方案中，本公開提供了提高有此需要的人受試者(例如，患有A型血友病的人受試者)的因子VIII的血清水平的方法，該方法包括向人受試者靜脈內施用其中rAAV編碼人因子VIII多肽的本專利技術組合物。還提供了用于此類治療方法的藥物組合物，以及組合物在制備用于此類方法的藥物中的用途。
[0024]本專利技術的其他特征、目的和優點在下面的詳細描述中是顯而易見的。然而，應當理解，詳細描述雖然指示了本專利技術的實施方案和方面，但僅以說明而非限制的方式給出。通過詳細描述，在本專利技術范圍內的各種變化和修改對于本領域技術人員來說將是顯而易見的。
[0025]附圖簡述
[0026]圖1A
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F總結了在含有SB
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【技術保護點】

【技術特征摘要】
【國外來華專利技術】1.藥物組合物，其包含：重組腺相關病毒(rAAV)載體，氯化鈉(NaCl)氯化鉀(KCl)，磷酸氫二鈉(Na2HPO4),磷酸二氫鉀(KH2PO4),氯化鎂(MgCl2),多元醇，和泊洛沙姆，任選地，其中所述組合物包含不超過約0.1mM氯化鈣并且具有約7.1至約7.5的pH。2.權利要求1的組合物，其中所述多元醇是蔗糖。3.權利要求1或2的組合物，其中所述泊洛沙姆是泊洛沙姆188。4.權利要求1
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3中任一項的組合物，其中所述組合物含有約0.1至約2.0mM氯化鎂。5.權利要求4的組合物，其中所述組合物含有約0.5mM或更高的氯化鎂。6.權利要求4的組合物，其中所述組合物含有約1.4mM氯化鎂。7.權利要求4的組合物，其中所述組合物含有超過約1.3mM的氯化鎂。8.權利要求1
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7中任一項的組合物，其中所述組合物含有約150mM至約200mM，任選地約172mM的氯化鈉。9.權利要求1
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8中任一項的組合物，其中所述組合物含有約2.5mM至約3.0mM，任選地約2.7mM的氯化鉀。10.權利要求1
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9中任一項的組合物，其中所述組合物含有約5mM至約10mM，任選地約8mM的磷酸氫二鈉。11.權利要求1
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10中任一項的組合物，其中所述組合物含有約1.0mM至約2.0mM，任選地約1.5mM的磷酸二氫鉀。12.權利要求1
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11中任一項的組合物，其中所述組合物含有約0.5％至約2％(w/v)，任選地約1％(w/v)的蔗糖。13.權利要求1
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12中任一項的組合物，其中所述組合物含有約0.01％至約0.1％(w/v)，任選地約0.05％(w/v)的泊洛沙姆188。14.藥物組合物，其包含：重組腺相關病毒(rAAV)載體，約171.81mM氯化鈉，約2.68mM氯化鉀，約8.10mM磷酸氫二鈉，約1.47mM磷酸二氫鉀，約1.40mM氯化鎂，約1.00％(w/v)蔗糖，和約0.05％(w/v)泊洛沙姆188，任選地，其中所述組合物包含不超過約0.1mM氯化鈣并且具有約7.1至約7.5的pH。15.藥物組合物，其包含：
重組腺相關病毒(rAAV)載體，約172mM氯化鈉，約2.68mM氯化鉀，約8.10mM磷酸氫二鈉，約1.47mM磷酸二氫鉀，約0.49mM氯化鎂，約1.00％(w/v)蔗糖，和約0.05％(w/v)泊洛沙姆188，任選地，其中所述組合物包含不超過約0.1mM氯化鈣并且具有約7.1至約7.5的pH。16.權利要求1
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15中任一項的組合物，其中所述rAAV包含基因組，所述基因組包含治療性蛋白質的表達盒。17.權利要求16的組合物，其中所述治療性蛋白質是人因子VIII多肽。18.藥物組合物，其包含：重組腺相關病毒(rAAV)載體，其中所述rAAV包含基因組，所述基因組包含用于表達人因子VIII多肽的表達盒，約171.81mM氯化鈉，約2.68mM氯化鉀，約8.1...

【專利技術屬性】
技術研發人員：J，
申請(專利權)人：美國輝瑞有限公司，
類型：發明
國別省市：