一種Glepaglutide的制備方法技術

本發明專利技術公開了一種Glepaglutide的制備方法，涉及藥物多肽制備技術領域，包括：Rink Amide Linker和固相載體偶聯得到Rink Amide MBHA Resin；按照Glepaglutide的序列，脫除每個氨基酸或片段的Fmoc保護基，逐個偶聯氨基酸或片段，其中His1?

【技術實現步驟摘要】
一種Glepaglutide的制備方法


[0001]本專利技術屬于藥物多肽制備
，具體涉及一種Glepaglutide的制備方法。

技術介紹

[0002]短腸綜合征(short bowel syndromle)是指廣泛小腸切除(包括部分結腸切除)術后，殘留的功能性腸管不能維持病人營養需要的吸收不良綜合征。臨床以嚴重腹瀉、體重減輕、進行性營養不良和水、電解質代謝紊亂為特征，影響機體發育，致死率較高。目前主要采用營養支持和小腸移植治療方法，但療效不能肯定，病人生存質量仍取決于剩余的小腸長度及其功能狀態。
[0003]Glepaglutide是一種長效人胰高血糖素樣多肽
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2（GLP
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2）類似物，可以通過自動注射器進行皮下注射治療，能減少短腸綜合征患者對腸外營養支持的依賴。EASE 1研究共招募了108名SBS患者，Glepaglutide組患者每周接受兩次治療共持續24周。研究結果顯示，Glepaglutide組患者達到初步評價終點，與基線期相比腸外營養支持用量顯著下降，減少了5.13升。并且，Glepaglutide組有66%的患者出現具有臨床意義的改善，腸外營養支持用量減少20%以上。這其中有9名患者不再使用腸外營養支持。Glepaglutide的中文名為人胰高血糖素樣肽
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1，CAS號為914009
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86
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2，分子量為4316.08，Glepaglutide具有以下的結構：H
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His1?
Gly2?
Glu3?
Gly4?
Thr5?
Phe6?
Ser7?
Ser8?
Glu9?
Leu
10
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Ala
11
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Thr
12
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Ile
13
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Leu
14
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Asp
15
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Ala
16
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Leu
17
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Ala
18
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Ala
19
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Arg
20
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Asp
21
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Phe
22
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Ile
23
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Ala
24
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Trp
25
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Leu
26
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Ile
27
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Ala
28
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Thr
29
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Lys
30
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Ile
31
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Thr
32
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Asp
33
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Lys
34
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Lys
35
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Lys
36
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Lys
37
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Lys
38
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Lys
39
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NH2。
[0004]由于 Glepaglutide序列中疏水氨基酸較多，當肽序延長時易形成折疊，導致樹脂收縮嚴重，會出現偶聯困難的問題，導致成本提高，操作步驟繁瑣，廢液過量，不利于工業化生產的問題，本專利技術提供了片段和逐步合成相結合制備Glepaglutide的方法，目的是解決現有合成過程中所存在的雜質多。該方法能有效減少D
?
His消旋雜質、+Gly雜質，提高Glepaglutide的純度及收率，該方法提高了粗肽純度，極大降低了物料成本和純化成本，利于進行工業化放大生產。

技術實現思路

[0005]本專利技術的目的在于提供一種Glepaglutide的制備方法，該合成方法所得的樹脂收率、粗品純度、粗品收率和純化收率都高于逐個偶聯的所得的粗品，大大增加了Glepaglutide產品的質量和純化收率，具有廣泛的實用價值和應用前景。
[0006]本專利技術為實現上述目的所采取的技術方案為：一種Glepaglutide的制備方法，包括以下步驟：步驟1：Rink Amide Linker和固相載體偶聯得到Rink Amide MBHA Resin；步驟2：按照Glepaglutide的序列，脫除每個氨基酸或片段的Fmoc保護基，逐個偶聯氨基酸，反應終點用茚三酮檢測液檢測，其中His1?
Gly4采用Boc
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His(Trt)
?
Gly
?
Glu(OtBu)
?
Gly
?
OH片段，Thr5?
Phe6采用Fmoc
?
Thr(tBu)
?
Phe
?
OH片段，Ala
11
?
Thr
12
和Ala
28
?
Thr
29
采用Fmoc
?
Ala
?
Thr(tBu)
?
OH片段，得到Glepaglutide肽樹脂。本專利技術采用特殊保護氨基酸和片段Boc
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His(Trt)
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Gly
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Glu(OtBu)
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Gly
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OH、Fmoc
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Thr(tBu)
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Phe
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OH和Fmoc
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Ala
?
Thr(tBu)
?
OH多肽片段來解決純度較低和偶聯難度較大的問題，Arg20采用過量投料來解決偶聯難度大的問題。通過偶聯制備獲得Glepaglutide，該偶聯合成方法、粗品收率和純化收率明顯提升；且本專利技術提供的該合成方法所得的樹脂收率、粗品純度、粗品收率和純化收率都高于逐個偶聯的所得的粗品，大大增加了產品的質量和純化收率，具有廣泛的實用價值和應用前景。本專利技術公開的Glepaglutide合成方法能夠縮短生產周期，大幅度提高粗品純度，提高產品收率，具有巨大的應用前景。
[0007]步驟3：取肽樹脂經裂解得到Glepaglutide粗品，再經純化、凍干后得到Glepaglutide精品。
[0008]需要說明的是，Glepaglutide的制備方法中，固相載體包括MBHA Resin樹脂。
[0009]需要說明的是，Glepaglutide的制備方法中，MBHA Resin的取代度范圍為0.40mmol/g~0.62mmol/g，優先選擇取代度為0.58mmol/g~0.62mmol/g的MBHA Resin。
[0010]需要說明的是，步驟1中偶聯所用縮合試劑為DIC、HOBT和DIEA，溶劑為DMF。
...

【技術保護點】

【技術特征摘要】
1.一種Glepaglutide的合成方法，包括以下步驟：步驟1：Rink Amide Linker和固相載體偶聯得到Rink Amide MBHA Resin；步驟2：按照Glepaglutide的序列，脫除每個氨基酸或片段的Fmoc保護基，逐個偶聯氨基酸或片段，其中His1?
Gly4采用Boc
?
His(Trt)
?
Gly
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Glu(OtBu)
?
Gly
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OH片段，Thr5?
Phe6采用Fmoc
?
Thr(tBu)
?
Phe
?
OH片段，Ala
11
?
Thr
12
和Ala
28
?
Thr
29
采用Fmoc
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Ala
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Thr(tBu)
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OH片段，得到Glepaglutide肽樹脂；步驟3：取肽樹脂經裂解得到Glepaglutide粗品，再經純化、凍干后得到Glepaglutide精品。2.根據權利要求1所述的Glepaglutide的合成方法，其特征在于：所述步驟1中固相載體包括MBHA Resin樹脂。3.根據權利要求2所述的Glepaglutide的合成方法，其特征在于：所述MBHA Resin的取代度為0.40 mmol/g ~0.62mmol/g。4.根據權利要求1所述的Glepagluti...

【專利技術屬性】
技術研發人員：趙佳，石海芳，李雪豪，羅瑞昌，紀東亮，
申請(專利權)人：杭州信海醫藥科技有限公司，
類型：發明
國別省市：