一株降解臭氣物質正丁酸的菌株及其應用制造技術

本發明專利技術公開了一株降解臭氣物質正丁酸的菌株及其應用，菌株號為N

【技術實現步驟摘要】
一株降解臭氣物質正丁酸的菌株及其應用


[0001]本專利技術涉及一株降解臭氣物質正丁酸的菌株及其應用，屬于微生物


技術介紹

[0002]隨著國家生態文明建設，豬場臭氣已成為社會投訴的重點。據研究報道豬場臭氣物質有500多種，臭氣組分隨著養殖模式和季節的變化而變化，正丁酸是豬場糞水產生臭氣排放的21種特征性臭氣物質之一，屬于揮發性脂肪酸，很難消除。近年來，選育高效微生物菌株降解豬場臭氣物質的研究成為養殖場臭氣物質降解的經濟可靠的方法之一，對臭氣物質正丁酸的高效降解的微生物菌株篩選尚未見報道。

技術實現思路

[0003]本專利技術所要解決的技術問題是克服現有技術的缺陷，提供一株降解臭氣物質正丁酸的菌株及其應用，將菌株N
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BA
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9與豬糞水混合培養，菌株N
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BA
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9生長效果良好，在豬糞水臭氣度6.233的狀態下，培養24小時后臭氣度降低58.22%。
[0004]為解決上述技術問題，本專利技術提供一株降解臭氣物質正丁酸的菌株，菌株號為N
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BA
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9，分類命名為皺褶假絲酵母（Candida rugose），已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏日期為2021年11 月 2日，保藏編號為CGMCC No.23709。
[0005]本專利技術提供上述的菌株在降解豬場臭氣物質正丁酸中的應用。
[0006]進一步地，將菌株N
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BA<br/>?
9與豬糞水混合培養，菌株N
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BA
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9以豬糞水中的臭氣物質正丁酸為碳源生長，將正丁酸降解。
[0007]進一步地，將菌株N
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9與豬糞水混合培養的具體方法為：將菌株N
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9以5
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10%接種量接種于新鮮豬糞水中，pH為6.5
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8.0，C/N為27
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35，25
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30℃靜置培養24
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48小時后，檢測臭氣除臭率。
[0008]進一步地，所述菌株N
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BA
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9的接種量為5%。
[0009]進一步地，所述pH為7.2，C/N為31.4。
[0010]進一步地，所述培養溫度為30℃，培養時間為24小時。
[0011]本專利技術所達到的有益效果：本專利技術提供的菌株N
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9能以豬糞水中的臭氣物質正丁酸為碳源生長，將正丁酸降解。將菌株N
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9與豬糞水混合培養，菌株N
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9生長效果良好，在豬糞水臭氣度M.OU為6.233的狀態下，培養24小時后臭氣度M.OU降低為2.604，降解率為58.22%。
附圖說明
[0012]圖1為菌株N
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9在LB培養基上劃線培養48小時生長的單菌落形態；圖2為菌株N
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9單菌落，顯微鏡（10
×
100）觀察到的菌體形態；圖3為未接種N
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9菌株豬糞水中臭氣度M.OU檢測值；圖4為接種N
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9菌株培養24小時后臭氣度M.OU檢測值。
具體實施方式
[0013]下面結合實施例對本專利技術作進一步描述。以下實施例僅用于更加清楚地說明本專利技術的技術方案，而不能以此來限制本專利技術的保護范圍。
[0014]實施例1菌株N
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9的分離、篩選與鑒定1. 菌株N
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9的分離和篩選取45ml蒸餾水于250ml三角瓶中，加入一定數量的玻璃珠，121℃滅菌20min，冷卻至室溫。稱取5g保存的土樣加入無菌水中，于30℃、180r/min的恒溫搖床中打碎混勻1
?
2h，使細菌游離，取10ml泥水混合物轉移至90ml基本培養基中，在基本培養基中加入正丁酸加入0.05g，30℃、180r/min培養富集。
[0015]取富集馴化的菌液，用無菌水稀釋成 10
?1~10
?
6 不同濃度梯度，取10
?4、10
?5、10
?6三個梯度各0.1ml的含菌水涂布于選擇性培養基平板，然后30 ℃恒溫倒置培養箱培養 2
?
5 d后，利用平板稀釋分離法進一步分離純化，純化后的菌株進行分類編號，保存在 4 ℃斜面以備用。
[0016]2. 菌株N
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9的鑒定在LB培養基上純培養后，觀察N
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9菌株單菌落和菌體形態，圖1為菌株N
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9在LB培養基上劃線培養48小時生長的單菌落形態；圖2為菌株N
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9單菌落，顯微鏡（10
×
100）觀察到的菌體形態。菌落小圓形、白色、邊緣整齊，表面光滑。菌體呈橢球形，不產芽孢。
[0017]經生理生化檢測，結果表明N
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9菌株為革蘭氏陽性菌株，水解酶、過氧化氫酶陽性，甲基紅、吲哚及氧化酶反應陰性。
[0018]經ITS1
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5.8S
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ITS2分子生物學鑒定，該菌株特征序列見序列表SEQ ID NO:1。
[0019]實施例2菌株N
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9在降解豬場臭氣物質正丁酸中的應用效果1. 豬糞水的制備將20 g新鮮豬糞與80g清潔水混合均勻，制備成含固率5%左右的新鮮豬糞水，將新鮮豬糞水放置于37℃培養箱中靜置發酵2天，獲得臭氣度M.OU為6.233的豬糞水。
[0020]2. N
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9菌懸液降解豬糞水中臭氣物質正丁酸將N
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9菌株發酵菌液5ml，接種到以上100ml的豬糞水中，豬糞水中pH為7.2，C/N為31.4，混合均勻，30℃培養箱中靜置培養24小時后，測定豬糞水的臭氣度M.OU，測定值為2.604，如圖4所示。
[0021]3. N
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9菌種對豬糞水中臭氣物質降解率的計算圖3為未接種N
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9菌株豬糞水中臭氣度M.OU檢測值，菌種N
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9對豬糞水中臭氣物質降解率為[(6.233
?
2.604)/ 6.233]×
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【技術保護點】

【技術特征摘要】
1.一株降解臭氣物質正丁酸的菌株，其特征在于，菌株號為N
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9，分類命名為皺褶假絲酵母（Candida rugose），已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏日期為2021年11 月 2日，保藏編號為CGMCC No.23709。2.權利要求1所述的菌株在降解豬場臭氣物質正丁酸中的應用。3.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，將菌株N
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BA
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9與豬糞水混合培養，菌株N
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9以豬糞水中的臭氣物質正丁酸為碳源生長，將正丁酸降解。4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，將菌株N
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【專利技術屬性】
技術研發人員：楊興明，毛勝勇，吳宓，顧向陽，李春梅，沈其榮，
申請(專利權)人：南京農業大學，
類型：發明
國別省市：