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【技術實現步驟摘要】
CGAWVWENQV SWYWEKETTD LRIKEKLFLE AFKALGGKGP YTLQGLLGCE LGPDNTSVPT AKFALNGEEF MNFDLKQGTW GGDWPEALAI SQRWQQQDKA ANKELTFLLF SCPHRLREHL ERGRGNLEWK EPPSMRLKAR PSSPGFSVLT CSAFSFYPPE LQLRFLRNGL AAGTGQGDFG PNSDGSFHAS SSLTVKSGDE HHYCCIVQHA GLAQPLRVEL ESPAKSSVLV VGIVIGVLLL TAAAVGGALL WRRMRSGLPA PWISLRGDDT GVLLPTPGEA QDADLKDVNV IPATA)
;或由
SEQ ID NO:1
所示的氨基酸序列衍生的,且與
SEQ ID NO:1
所示的氨基酸序列具有相同功能的氨基酸序列
。
[0008]優選地,所述制劑為過敏性疾病患者尿液
IgG
受體
FcRn
大亞基
p51
及其多肽片段檢測試劑盒
。
[0009]優選地,所述試劑盒包括抗原抗體反應的免疫方法及其試劑盒如能夠特異性結合
IgG
受體
FcRn
大亞基
p51
及其多肽片段的適配體抗體或抗體片段中的一種或多種
。
[0010]優選地,所述檢測方法包括直接檢測
IgG
受體
FcRn
大亞基 >p51
及其多肽片段的質譜等方法及其相關試劑盒
。
[0011]優選地,所述檢測方法包括直接檢測
IgG
受體
FcRn
大亞基
p51
及其多肽片段的相關核酸檢測等方法及其相關試劑盒
。
[0012]優選地,所述試劑盒還包括選自下組的成分:固相載體,稀釋液,對照品,標準品,質控品,檢測抗體,第二抗體
、
第二抗體稀釋液,發光試劑,洗滌液
、
顯色液
、
終止液中的任意一種或幾種的組合
。
[0013]優選地,所述標準品包括
IgG
受體
FcRn
大亞基
p51
標準品
、
人源化標簽抗體標準品;較佳地,所述質控品包括:
IgG
受體
FcRn
大亞基
p51
質控品
、
人源化標簽抗體質控品;較佳地,所述固相載體包括:微粒
、
微球
、
玻片
、
試紙條
、
塑料珠
、
液相芯片
、
微孔板或親和膜等以及同等功能的其他載體
。
[0014]優選地,所述固相載體的材質為聚氯乙烯
、
聚苯乙烯
、
聚丙酰胺
、
纖維素中的任意一種及具有類似功能的載體
。
[0015]專利技術人首先收集了健康人
、
過敏性疾病患者的尿液標本,
2000g
離心
10min
后,吸取上清,采用
Bradford
法測定提取的蛋白濃度,酶解后使用
C18
脫鹽柱對樣本進行脫鹽
。
調整
DDA
建庫樣本質譜色譜條件,質譜分析及建庫采用
skyline
軟件處理,調整
PRM
采集質譜參數設置并完成
PRM
肽段積分定量,通過定量值校正
/
計算絕對定量值
、
差異分析及目標蛋白全局聚類分析對數據進行處理
。
將過敏性疾病組和正常對照組在質譜中得到的數據進行定量計算,最終獲得差異蛋白
IgG
受體
FcRn
大亞基
p51。
[0016]本專利技術通過研究證實與健康人相比,
IgG
受體
FcRn
大亞基
p51
及其多肽片段在過敏性疾病患者的尿液中呈高表達,與臨床診斷有較好的一致性
。
從而提出檢測尿液
IgG
受體
FcRn
大亞基
p51
及其多肽片段可用于過敏性疾病的診斷
、
鑒別診斷
、
病情程度判斷
、
治療效果評價
、
監測
、
預后評估及機理研究等制劑的應用
。
[0017]本專利技術發揮尿液標本獲取無創
、
可大規模重復取樣
、
保存方便的優勢,利用尿液標本檢測尿液
IgG
受體
FcRn
大亞基
p51
及其多肽片段
。
[0018]為讓本專利技術的上述和其它目的
、
特征和優點能更明顯易懂,下文特舉較佳實施例,并配合附圖,作詳細說明如下
。
附圖說明
[0019]圖1是尿液
IgG
受體
FcRn
大亞基
p51
及其多肽片段在過敏性疾病組及健康對照組中含量圖
。
具體實施方式
[0020]實施例1尿液標本的收集與處理選取過敏性疾病患者作為過敏性疾病組,選取同期健康體檢者作為正常對照組
。
收集各組研究對象入院后的新鮮晨尿樣本
30ml
,不能正常排尿者收集其早晨導尿管中尿液,置于干燥
、
潔凈的容器內
。
將收集的尿液標本
2000g
離心
5min
后,吸取上清,每管
2ml
分裝,留取
10ul
采用
Bradford
法進行蛋白定量,對其酶解除鹽與分餾分后凍干待上機
。
[0021]實施例2質譜分析和搜庫流程調整
DDA
建庫樣本質譜色譜條件,采用
skyline
軟件建庫,針對每個目標蛋白挑選獨有肽段,導出獨有肽段離子對列表,
PRM
靶向采集獨有肽段,調整
PRM
采集質譜參數設置,對
PRM
肽段積分定量
。
[0022]實施例3差異多肽數據分析對數據進行定量校正,計算絕對定量值,針對不同比較組,分析計算每種比較方式的
FC
值和
P
值,按照
FC
>
1.2
或
FC
<
1/1.2
,
P
<
0.05
的篩選規則,篩選差異蛋白,對目標蛋白進行全本文檔來自技高網...
【技術保護點】
【技術特征摘要】
1.
尿液
IgG
受體
FcRn
大亞基
p51
及其多肽片段在制備用于過敏性疾病診斷
、
鑒別診斷
、
病情程度判斷
、
治療效果評價
、
監測
、
預后評估及機理研究等制劑的應用
。2.
根據權利要求1所述的應用,其特征在于,所述尿液
IgG
受體
FcRn
大亞基
p51
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:1
所示;或由
SEQ ID NO:1
所示的氨基酸序列衍生的,且與
SEQ ID NO:1
所示的氨基酸序列具有相同功能的氨基酸序列
。3.
根據權利要求1所述的應用,其特征在于,所述制劑為過敏性疾病患者尿液
IgG
受體
FcRn
大亞基
p51
及其多肽片段檢測試劑盒
。4.
根據權利要求3所述的應用,其特征在于,所述試劑盒包括抗原抗體反應的免疫方法及其試劑盒如能夠特異性結合
IgG
受體
FcRn
大亞基
p51
及其多肽片段的適配體抗體或抗體片段中的一種或多種
。5.
根據權利要求3所述的應用,其特征在于,所述檢測方法包括直接檢測
IgG
受體
FcRn
大亞基
p51
及其多肽片段的質譜等方法及...
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