一種復(fù)合抑菌后生元制劑及其制備方法和應(yīng)用技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)公開了一種復(fù)合抑菌后生元制劑及其制備方法和應(yīng)用

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
一種復(fù)合抑菌后生元制劑及其制備方法和應(yīng)用


[0001]本專利技術(shù)屬于微生物
，具體涉及一種復(fù)合抑菌后生元制劑及其制備方法和應(yīng)用
。

技術(shù)介紹

[0002]后生元（
Postbiotics
）是指一種有益于宿主健康的無活性微生物和
/
或其成分的制劑，被認(rèn)為是繼益生菌（
Probiotic
）
、
益生元（
Prebiotics
）和合生制劑（
Synbiotics
）之后的第四代微生態(tài)產(chǎn)品
。
在水產(chǎn)領(lǐng)域中，關(guān)于后生元的研究才開始出現(xiàn)并在近兩年逐漸增多
。
[0003]近年來，凡納濱對蝦蝦苗細(xì)菌性玻化癥（
BVS
）
、
急性肝胰腺壞死綜合癥
(APHNS)
等對蝦病害的發(fā)生多與不同種屬的弧菌
、
單胞菌等致病菌密切相關(guān)，這些病發(fā)病急
、
致死率高，因此對這類致病菌的防控是養(yǎng)殖成功的關(guān)鍵環(huán)節(jié)
。
乳酸菌
、
芽孢桿菌等微生態(tài)制劑作為水產(chǎn)致病性弧菌的生物防控策略，逐漸成為抗生素替代
、
綠色養(yǎng)殖體系的重要組成部分
。
通常，益生菌可與病原體競爭粘附位點(diǎn)與營養(yǎng)資源
、
分泌抗菌物質(zhì)
、
調(diào)節(jié)機(jī)體免疫及腸道屏障功能
。
然而，傳統(tǒng)益生菌活菌制劑在應(yīng)用時會面臨菌株活性與穩(wěn)定性維持
、/>耐受水產(chǎn)飼料制粒高溫等挑戰(zhàn)
。
[0004]后生元主要是含無活性微生物和
/
或其成分，環(huán)境溫度對其影響小，并且研究表明其在抑制病原菌
、
改善消化健康和免疫功能等方面具有非常大的應(yīng)用潛力
。
針對水產(chǎn)養(yǎng)殖環(huán)境和養(yǎng)殖動物腸道改善，如何通過工藝優(yōu)化提高有效成分含量及穩(wěn)定性，并通過不同菌株之間合理配伍達(dá)到綜合的防控效果，是創(chuàng)新性產(chǎn)品開發(fā)中的難點(diǎn)
。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

[0005]本專利技術(shù)提供了一種復(fù)合抑菌后生元制劑及其制備方法和應(yīng)用
。
本專利技術(shù)利用枯草芽孢桿菌（
Bacillus subtilis
）
BSXE
?
1601
菌株在特定的發(fā)酵工藝條件下，定向調(diào)控代謝途徑生產(chǎn)得到高活性的代謝產(chǎn)物，其通過直接殺滅
/
抑制病原菌
、
調(diào)控宿主腸道菌群平衡，利用凝結(jié)芽孢桿菌（
Bacillus coagulans
）
E21
滅活菌體來協(xié)同提高宿主免疫抗病力和腸道屏障功能等多種機(jī)制，有效地防控了水產(chǎn)養(yǎng)殖動物弧菌
、
單胞菌等致病菌引起的疾病發(fā)生或爆發(fā)
。
[0006]為了實(shí)現(xiàn)上述專利技術(shù)目的，本專利技術(shù)采用以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)：本專利技術(shù)提供了一種復(fù)合抑菌后生元制劑，按體積百分?jǐn)?shù)計，所述復(fù)合抑菌后生元制劑包括
70%~80%
的枯草芽孢桿菌代謝產(chǎn)物和
20%~30%
的凝結(jié)芽孢桿菌滅活菌體
。
[0007]進(jìn)一步的，所述枯草芽孢桿菌選自保藏編號為
CGMCC NO.15949
的枯草芽孢桿菌
BSXE
?
1601
；所述枯草芽孢桿菌代謝產(chǎn)物包括異香豆素類
、
大豆異黃酮類
、
環(huán)脂肽類
、
萜烯類
、
豐源素
、
表面活性素
、
伊枯草菌素
、
芽孢桿菌溶素以及枯草桿菌蛋白酶
。
[0008]進(jìn)一步的，所述凝結(jié)芽孢桿菌選自保藏編號為
CGMCC No.13044
的凝結(jié)芽孢桿菌
E21。
[0009]本專利技術(shù)還提供了所述的復(fù)合抑菌后生元制劑的制備方法，其包括以下步驟：
（1）將活化的凝結(jié)芽孢桿菌進(jìn)行發(fā)酵，得到的凝結(jié)芽孢桿菌發(fā)酵液經(jīng)高溫滅活
、
干燥，得到凝結(jié)芽孢桿菌滅活菌體；（2）將枯草芽孢桿菌進(jìn)行活化培養(yǎng)，對得到的枯草芽孢桿菌種子液進(jìn)行發(fā)酵，然后再對得到的一級種子液進(jìn)行二級發(fā)酵，得到發(fā)酵液；（3）在所述發(fā)酵液加入附著性載體后進(jìn)行干燥，得到含有枯草芽孢桿菌代謝產(chǎn)物的噴干粉劑；（4）將所述步驟（1）的凝結(jié)芽孢桿菌滅活菌體和步驟（3）中的含有枯草芽孢桿菌代謝產(chǎn)物的噴干粉劑混合均勻，得到復(fù)合抑菌后生元制劑
。
[0010]進(jìn)一步的，所述凝結(jié)芽孢桿菌的發(fā)酵培養(yǎng)基配方為：麩皮
20~60g/L、
酵母粉
10~30g/L、
玉米漿干粉
10~30g/L、
氯化鈉
2~5g/L、
磷酸氫二鉀
0.5~1g/L。
[0011]優(yōu)選的，所述凝結(jié)芽孢桿菌的發(fā)酵培養(yǎng)基配方為：麩皮
40g/L、
酵母粉
15g/L、
玉米漿干粉為
15g/L、
氯化鈉
2g/L、
磷酸氫二鉀
1g/L。
[0012]進(jìn)一步的，所述凝結(jié)芽孢桿菌的的培養(yǎng)條件為：初始
pH 7.0、
溫度
40
±
1℃、
發(fā)酵罐轉(zhuǎn)速
200 r/min、
通風(fēng)量
1:0.85、
培養(yǎng)時間為
22 h。
[0013]本專利技術(shù)還提供了所述的復(fù)合抑菌后生元制劑在制備水產(chǎn)病原菌抑制劑中的應(yīng)用
。
[0014]進(jìn)一步的，所述水產(chǎn)病原菌包括塔式弧菌
、
美人魚發(fā)光桿菌
、
新喀里多尼亞弧菌
、
歐文斯氏弧菌
。
[0015]本專利技術(shù)還提供了所述的復(fù)合抑菌后生元制劑在對蝦養(yǎng)殖中的應(yīng)用
。
[0016]進(jìn)一步的，所述復(fù)合抑菌后生元制劑能夠作為飼料添加劑混入對蝦日糧中，也能夠通過潑灑到養(yǎng)殖水體中使用
。
[0017]進(jìn)一步的，所述復(fù)合抑菌后生元制劑作為飼料添加劑的用量為對蝦日糧重量的
0.25
‰
~5.00
‰
；所述復(fù)合抑菌后生元制劑潑灑的用量為
100 g/
畝
?
米
~200g/
畝
?
米
。
[0018]本專利技術(shù)與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下優(yōu)點(diǎn)和有益效果：
1、
本專利技術(shù)利用枯草芽孢桿菌
BSXE
?
1601
在特定的發(fā)酵工藝條件下經(jīng)過培養(yǎng)發(fā)酵，最后再以瞬時噴霧干燥后處理技術(shù)消除潛在的酶解反應(yīng)
、
水解反應(yīng)等影響因素，形成抑菌活性高
、
穩(wěn)定性和耐熱性特征良好的枯草芽孢桿菌代謝產(chǎn)物粉末制劑
。
所述枯草芽孢桿菌代謝產(chǎn)物主要含有3本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】

【技術(shù)特征摘要】
1.
一種復(fù)合抑菌后生元制劑，其特征在于，按體積百分?jǐn)?shù)計，所述復(fù)合抑菌后生元制劑包括
70%~80%
的枯草芽孢桿菌代謝產(chǎn)物和
20%~30%
的凝結(jié)芽孢桿菌滅活菌體
。2.
根據(jù)權(quán)利要求1所述的復(fù)合抑菌后生元制劑，其特征在于，所述枯草芽孢桿菌選自保藏編號為
CGMCC NO.15949
的枯草芽孢桿菌
BSXE
?
1601
；所述枯草芽孢桿菌代謝產(chǎn)物包括異香豆素類
、
大豆異黃酮類
、
環(huán)脂肽類
、
萜烯類
、
豐源素
、
表面活性素
、
伊枯草菌素
、
芽孢桿菌溶素以及枯草桿菌蛋白酶
。3.
根據(jù)權(quán)利要求1所述的復(fù)合抑菌后生元制劑，其特征在于，所述凝結(jié)芽孢桿菌選自保藏編號為
CGMCC No.13044
的凝結(jié)芽孢桿菌
E21。4.
權(quán)利要求1?3任一項(xiàng)所述的復(fù)合抑菌后生元制劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：（1）將活化的凝結(jié)芽孢桿菌進(jìn)行發(fā)酵，得到的凝結(jié)芽孢桿菌發(fā)酵液經(jīng)滅活
、
干燥，得到凝結(jié)芽孢桿菌滅活菌體；（2）將枯草芽孢桿菌進(jìn)行活化培養(yǎng)，對得到的枯草芽孢桿菌種子液進(jìn)行發(fā)酵，然后再對得到的一級種子液進(jìn)行二級發(fā)酵，得到發(fā)酵液；（3）在所述發(fā)酵液加入附著性載體后進(jìn)行干燥，得到含有枯草芽孢桿菌代謝產(chǎn)物的噴干粉劑；（4）將所述步驟（1...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：張洪玲，閆舟，劉寶同，田相利，梁晶晶，李明霞，孟凡奎，王金龍，張宗國，
申請(專利權(quán))人：青島根源生物技術(shù)集團(tuán)有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：