用于在增殖性疾病中使用的靶向制造技術

本發明專利技術提供了靶向

【技術實現步驟摘要】
【國外來華專利技術】用于在增殖性疾病中使用的靶向CD20和CD22的抗原結合分子


[0001]本專利技術涉及生物技術的產品和方法，特別涉及靶向
CD20
和
CD22
的抗原結合分子
、
其制備及其用途
。

技術介紹

[0002]可用于免疫腫瘤學的雙特異性分子可以是抗原結合多肽如抗體，例如
IgG
樣抗體，即全長雙特異性抗體，或不是全長抗原結合分子的非
IgG
樣雙特異性抗體
。
全長雙特異性抗體典型地保留具有兩個
Fab
臂和一個
Fc
區的傳統單克隆抗體
(mAb)
結構，不同的是兩個
Fab
位點結合不同抗原
。
非全長雙特異性抗體可以缺乏整個
Fc
區
。
這些包括化學連接的
Fab、
僅由
Fab
區組成
、
以及各種類型的二價和三價單鏈可變片段
(scFv)。
還存在模擬兩種抗體的可變結構域的融合蛋白
。
這種形式的一個實例是雙特異性
T
細胞接合器
(Yang,Fa
；
Wen,Weihong
；
Qin,Weijun(2016).“Bispecific Antibodies as a Development Platform for New Concepts and Treatment Strategies[
雙特異性抗體作為新概念和治療策略的開發平臺
]”.International Journal of Molecular Sciences[
國際分子科學雜志
].18(1):48)。
[0003]示例性雙特異性抗體衍生分子如分子是由兩個柔性連接的抗體衍生的結合結構域制備的重組蛋白質構建體
。
分子的一個結合結構域對靶細胞上選擇的腫瘤相關表面抗原是特異性的；第二結合結構域對
CD3(T
細胞上的
T
細胞受體復合物的亞基
)
具有特異性
。
通過其特定設計，抗原結合分子獨特地適合于將
T
細胞與靶細胞瞬時連接，并且同時強有力地激活
T
細胞對靶細胞的固有溶細胞潛力
。
以
AMG 103
和
AMG 110
開發進入臨床的第一代分子
(
參見
WO 99/54440
和
WO 2005/040220)
的重要進一步開發是提供在
CD3
ε
鏈的
N
?
末端結合背景獨立表位
(context independent epitope)
的雙特異性抗原結合分子
(WO 2008/119567)。
與該選擇的表位結合的分子不僅顯示出對人和獼猴，或普通狨
(Callithrix jacchus)、
棉冠獠狨
(Saguinus oedipus)
或松鼠猴
(Saimiri sciureus)CD3
ε
鏈的跨物種特異性，而且由于識別該特異性表位
(
而不是先前描述的雙特異性
T
細胞接合分子中
CD3
結合物的表位
)
而未展示出與對于前一代
T
細胞接合抗體所觀察到的程度相同的
T
細胞的非特異性激活
。T
細胞激活的這種減少與患者中較少或減少的
T
細胞再分布相關，后者被鑒定為副作用的風險，例如，在帕索妥昔單抗
(pasotuximab)
中
。
[0004]如
WO 2008/119567
中所述的基于抗體的分子的特征在于從體內快速清除；因此，雖然它們能夠快速到達身體的大部分部位，但它們的體內應用可能受到其在體內的持久性短的限制
。
另一方面，它們在體內的濃度可以在短時間內進行調整和微調
。
因為這種小的單鏈分子的體內半衰期短，所以使用通過連續靜脈內輸注的長期施用來實現治療作用
。
然而，可獲得具有更有利的藥代動力學特性
(
包括如
WO 2017/134140
中所述的更長的半衰期
)
的雙特異性抗原結合分子
。
增加的半衰期典型地在免疫球蛋白
、
尤其相對于特別是小尺寸的抗體片段或構建體的體內應用中是有用的，例如為求患者依從性
。
[0005]基于抗體的免疫腫瘤學的一個挑戰性持續問題是腫瘤逃逸
。
當免疫系統
(
即使在通過一些基于抗體的免疫療法觸發或指導的情況下
)
沒有足夠的能力根除腫瘤時，發生這樣的腫瘤逃逸，這些腫瘤攜帶累積的遺傳改變和表觀遺傳改變，并且使用幾種機制贏得免疫編輯過程
(Keshavarz
?
Fathi,Mahsa
；
Rezaei,Nima(2019)“Vaccines for Cancer Immunotherapy[
用于癌癥免疫療法的疫苗
]”)。
通常，已知四種干擾有效抗腫瘤免疫應答的機制：
(1)
缺陷型腫瘤抗原加工或呈遞，
(2)
激活機制的缺乏，
(3)
抑制機制和免疫抑制狀態，以及
(4)
抗性腫瘤細胞
。
尤其是對于第一種機制，腫瘤抗原由于遺傳不穩定性
、
腫瘤突變和從免疫系統逃逸，可能以新形式存在
。
表位陰性腫瘤細胞保持隱藏并且因此對免疫排斥有抗性
。
它們是在消除表位陽性腫瘤細胞后開發的，類似于達爾文的自然選擇理論
。
因此，當這樣的腫瘤細胞由于腫瘤逃逸而不再表達各自的抗原時，針對腫瘤細胞上抗原的基于抗體的免疫療法變得無效
。
所述抗原丟失在本文中理解為腫瘤逃逸的驅動力，并且因此可以互換使用
。
因此，需要提供改善的基于抗體的免疫腫瘤學，其解決了抗原丟失的問題以有效預防腫瘤逃逸
。
[0006]此外，盡管到目前為止，基于抗體的免疫療法在臨床前和臨床上取得了成功，但仍存在明顯的局限性，包括個體與癌癥類型之間的差異性應答
。
劑量限制性毒性可能是基于抗體的免疫療法功效的限制因素，因此并非所有患者都在可用的安全劑量下對治療產生應答
。
因此，還需要減少基于抗體的免疫療法的劑量限制性毒性以使得這樣的療法可用于更多的患有多樣化增殖性疾病的患者<本文檔來自技高網...

【技術保護點】

【技術特征摘要】
【國外來華專利技術】1.
一種靶向
CD20
和
CD22
的抗原結合分子，其包含至少三個結合結構域，其中
(i.)
第一結合結構域包含與
CD20
免疫特異性地結合的互補位，其中該第一結合結構域包含：含有選自以下的
CDR
?
H1、CDR
?
H2
和
CDR
?
H3
的
VH
區，以及含有選自以下的
CDR
?
L1、CDR
?
L2
和
CDR
?
L3
的
VL
區：
a)SEQ ID NO:58
?
60
的
CDR H1
?3，和
SEQ ID NO:61
?
63
的
CDR L1
?3，
b)SEQ ID NO:71
?
73
的
CDR H1
?3，和
SEQ ID NO:74
?
76
的
CDR L1
?3，
c)SEQ ID NO:84
?
86
的
CDR H1
?3，和
SEQ ID NO:87
?
89
的
CDR L1
?3，以及
d)SEQ ID NO:97
?
99
的
CDR H1
?3，和
SEQ ID NO:100
?
102
的
CDR L1
?3；
(ii.)
第二結合結構域包含與
CD22
免疫特異性地結合的互補位，其中該第一結合結構域包含：含有選自以下的
CDR
?
H1、CDR
?
H2
和
CDR
?
H3
的
VH
區，以及含有選自以下的
CDR
?
L1、CDR
?
L2
和
CDR
?
L3
的
VL
區：
a)SEQ ID NO:138
?
140
的
CDR H1
?3，和
SEQ ID NO:141
?
143
的
CDR L1
?3，
b)SEQ ID NO:151
?
153
的
CDR H1
?3，和
SEQ ID NO:154
?
156
的
CDR L1
?3，
c)SEQ ID NO:164
?
166
的
CDR H1
?3，和
SEQ ID NO:167
?
169
的
CDR L1
?3，
d)SEQ ID NO:177
?
179
的
CDR H1
?3，和
SEQ ID NO:180
?
182
的
CDR L1
?3，
e)SEQ ID NO:190
?
192
的
CDR H1
?3，和
SEQ ID NO:193
?
195
的
CDR L1
?3，
f)SEQ ID NO:203
?
205
的
CDR H1
?3，和
SEQ ID NO:206
?
208
的
CDR L1
?3，
g)SEQ ID NO:125
?
127
的
CDR H1
?3，和
SEQ ID NO:128
?
130
的
CDR L1
?3，
h)SEQ ID NO:216
?
218
的
CDR H1
?3，和
SEQ ID NO:219
?
221
的
CDR L1
?3，以及
i)SEQ ID NO:379
?
381
的
CDR H1
?3，和
SEQ ID NO:382
?
384
的
CDR L1
?3；并且
(iii.)
第三結合結構域包含與人和
/
或獼猴
CD3
ε
鏈的細胞外表位免疫特異性地結合的互補位，其中該第一結合結構域
、
第二結合結構域和第三結合結構域按氨基至羧基順序排列，并且其中該第一結合結構域和該第二結合結構域通過肽接頭連接，該肽接頭具有5至
24
個
、
優選地
18
個氨基酸的長度
。2.
如權利要求1所述的靶向
CD20
和
CD22
的抗原結合分子，其中該抗原結合分子包含第四結構域，該第四結構域包含兩個多肽單體，每個多肽單體包含鉸鏈
、CH2
結構域和
CH3
結構域，其中所述兩個多肽單體經由肽接頭彼此融合，其中所述第四結構域優選地按氨基至羧基順序包含：鉸鏈
?
CH2
?
CH3
?
接頭
?
鉸鏈
?
CH2
?
CH3
和
/
或其中優選地，該第四結構域的所述多肽單體中的每一個具有與選自由以下組成的組的序列具有至少
90
％同一性的氨基酸序列：
SEQ ID NO:17
?
24
，其中優選地，所述多肽單體中的每一個具有選自
SEQ ID NO:17
?
24
的氨基酸序列，和
/
或其中優選地，該
CH2
結構域包含結構域內半胱氨酸二硫橋，和
/
或其中該第一結合結構域
、
第二結合結構域
、
第三結合結構域和第四結合結構域按氨基至羧基順序排列
。3.
如前述權利要求中任一項所述的靶向
CD20
和
CD22
的抗原結合分子，其中該抗原結合分子是單鏈抗原結合分子，優選地是靶向
CD20
和
CD22
的
scFv
抗原結合分子
。4.
如前述權利要求中任一項所述的靶向
CD20
和
CD22
的抗原結合分子，其中該第一結合
結構域與該第二結合結構域之間的肽接頭選自具有
5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、
或
24
個氨基酸，優選地
5、6、7、8、9、10、11
或
12
個氨基酸，更優選地6個氨基酸的長度
。5.
如前述權利要求中任一項所述的靶向
CD20
和
CD22
的抗原結合分子，其中該第一結合結構域與該第二結合結構域之間的肽接頭選自由以下組成的組：
S(G4S)
n
、(G4S)
n
、G
4n
、
和
G
5n
，其中
n
等于
1、2、3
或4，優選地
n
等于1或2，更優選地
SG4S。6.
如前述權利要求中任一項所述的靶向
CD20
和
CD22
的抗原結合分子，其中該第一結合結構域和該第二結合結構域各自包含：含有選自以下的
CDR
?
H1、CDR
?
H2
和
CDR
?
H3
的
VH
區，以及含有選自以下的
CDR
?
L1、CDR
?
L2
和
CDR
?
L3
的
VL
區：
a)
該第一結合結構域的
SEQ ID NO:58
?
60
的
CDR H1
?3和
SEQ ID NO:61
?
63
的
CDR L1
?3，以及該第二結合結構域的
SEQ ID NO:138
?
140
的
CDR H1
?3和
SEQ ID NO:141
?
143
的
CDR L1
?3；
b)
該第一結合結構域的
SEQ ID NO:58
?
60
的
CDR H1
?3和
SEQ ID NO:61
?
63
的
CDR L1
?3，以及該第二結合結構域的
SEQ ID NO:151
?
153
的
CDR H1
?3和
SEQ ID NO:154
?
156
的
CDR L1
?3；
c)
該第一結合結構域的
SEQ ID NO:58
?
60
的
CDR H1
?3和
SEQ ID NO:61
?
63
的
CDR L1
?3，以及該第二結合結構域的
SEQ ID NO:164
?
166
的
CDR H1
?3和
SEQ ID NO:167
?
169
的
CDR L1
?3；
d)
該第一結合結構域的
SEQ ID NO:58
?
60
的
CDR H1
?3和
SEQ ID NO:61
?
63
的
CDR L1
?3，以及該第二結合結構域的
SEQ ID NO:177
?
179
的
CDR H1
?3和
SEQ ID NO:180
?
182
的
CDR L1
?3，
e)
該第一結合結構域的
SEQ ID NO:58
?
60
的
CDR H1
?3和
SEQ ID NO:61
?
63
的
CDR L1
?3，以及該第二結合結構域的
SEQ ID NO:190
?
192
的
CDR H1
?3和
SEQ ID NO:193
?
195
的
CDR L1
?3；
f)
該第一結合結構域的
SEQ ID NO:58
?
60
的
CDR H1
?3和
SEQ ID NO:61
?
63
的
CDR L1
?3，以及該第二結合結構域的
SEQ ID NO:203
?
205
的
CDR H1
?3和
SEQ ID NO:206
?
208
的
CDR L1
?3；
g)
該第一結合結構域的
SEQ ID NO:58
?
60
的
CDR H1
?3和
SEQ ID NO:61
?
63
的
CDR L1
?3，以及該第二結合結構域的
SEQ ID NO:125
?
127
的
CDR H1
?3和
SEQ ID NO:128
?
130
的
CDR L1
?3，
h)
該第一結合結...

【專利技術屬性】
技術研發人員：M，
申請(專利權)人：安進研發慕尼黑股份有限公司，
類型：發明
國別省市：