用于抑制補體組分3表達的組合物和方法技術

本文描述了用于靶向補體組分

【技術實現步驟摘要】
【國外來華專利技術】用于抑制補體組分3表達的組合物和方法
[0001]序列表
[0002]本申請與電子格式的序列表一起提交
。
該序列表以創建于
2021
年4月
20
日的名為
50694
?
093WO3_Sequence_Listing_4_18_22_ST25_FINAL
的文件的形式提供，其大小為
77,827
字節
。
電子格式的序列表中的信息通過援引以其全文并入本文
。

技術介紹

[0003]補體系統在免疫復合物的清除和對感染因子
、
外源抗原
、
被病毒感染的細胞和腫瘤細胞的免疫應答中起重要作用
。
補體由一組超過
50
種形成先天免疫系統的一部分的蛋白質組成
。
補體系統用于保護身體免受微生物感染并起到維持組織止血的作用
。
補體是緊密調節的酶促級聯，可通過以下三種途徑之一激活：經典途徑，其中抗體復合物觸發激活；替代途徑，其通過稱為“空轉
(tickover)”的過程以低水平組成性激活，并且其可通過細菌病原體或受損的組織表面擴增；或凝集素途徑，其通過在某些微生物
(
包括某些細菌
、
真菌和病毒
)
上發現的甘露糖殘基引發
。
補體途徑的不受控制的激活或不足的調節會導致全身性炎癥
、
細胞損傷和組織損害
。
因此，補體途徑與許多不同疾病的發病機制有關
。
補體途徑活性的抑制或調節已被認為是一種有前景的治療策略
。
可用于這些疾病的治療選項的數量是有限的
。
因此，開發治療與補體途徑激活或失調相關的疾病的創新策略是顯著未滿足的需求
。
[0004]無論哪種補體途徑啟動該過程，補體激活都會在級聯中的補體組分
3(C3)
處匯合
。C3
蛋白是驅動幾種關鍵生物過程的核心，這些生物過程包括：補體激活，病原體
、
免疫復合物和受損細胞的調理和去除，以及體液免疫和
T
細胞適應性免疫應答的調節
。
[0005]C3
是補體系統中不可或缺的蛋白質，其有助于啟動補體途徑級聯
。
通過經典途徑
、
替代途徑或凝集素途徑的
C3
激活導致
C3
切割成分裂產物
C3a
和
C3b。C3a
是嗜中性粒細胞
、
嗜酸性粒細胞和肥大細胞的強效過敏毒素和趨化誘導劑
。C3b
在替代途徑中參與
C3
轉化酶的形成，并在所有三種補體途徑中參與
C5
轉化酶的形成，這進而推動補體級聯進一步激活下游末端補體
。C5
切割導致形成
C5a(
也是一種強效趨化驅動劑和過敏毒素
)
和
C5b(
其與補體蛋白
C6、7、8
和9在病原體或組織表面上快速組裝成孔形成復合物
C5b
?
9)。
因此，
C3
可能是抑制或沉默的理想靶標，以便選擇性抑制補體途徑，作為用于治療與補體途徑激活或失調相關的疾病的方法
。

技術實現思路

[0006]本文描述了靶向已知在補體途徑激活中起作用的補體組分
(C3)
的寡核苷酸
(
例如，
RNAi
寡核苷酸，包括有義和反義鏈寡核苷酸
)。RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽
(
例如，其鈉鹽
)
可用于治療患有與補體途徑激活或失調相關的疾病的患者
。
[0007]在一個方面，本披露內容提供了一種用于降低補體組分
3(C3)
表達的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，該寡核苷酸包含有義鏈和反義鏈，其中該有義鏈和該反義鏈形成雙鏈體區域
。
該反義鏈包含與
SEQ ID NO:13
或
14
的
C3 mRNA
靶序列的互補區域，并且該互
補區域的長度為至少
15
個連續核苷酸
。
在一些實施例中，該有義鏈的長度為
15
至
50
個核苷酸
(
例如，長度為
15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49
和
50
個核苷酸
)。
在一些實施例中，該有義鏈的長度為
18
至
36
個核苷酸
(
例如，長度為
18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35
和
36
個核苷酸
)。
在一些實施例中，該反義鏈的長度為
15
至
30
個核苷酸
(
例如，長度為
15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29
和
30
個核苷酸
)。
在一些實施例中，該反義鏈的長度為
22
個核苷酸，并且該反義鏈和該有義鏈形成長度為至少
19
個核苷酸
、
任選地長度為至少
20
個核苷酸的雙鏈體區域
。
在一些實施例中，該有義鏈的長度為
36
個核苷酸，并且該反義鏈和該有義鏈形成長度為至少
19
個核苷酸
、
任選地長度為至少
20
個核苷酸的雙鏈體區域
。
在一些實施例中，互補區域的長度為至少
19
個連續核苷酸，任選地長度為至少
20
個核苷酸
。
[0008]在一些實施例中，該有義鏈的
3'
端包含如
S1
?
L
?
S2
所示的莖環，其中
S1
與
S2
互補，并且其中
L
形成長度為3?5個核苷酸的
S1
與
S2
之間的環
。
在一些實施例中，
L
是三環
(triloop)
或四環
(tetraloop)。
在一本文檔來自技高網...

【技術保護點】

【技術特征摘要】
【國外來華專利技術】1.
一種用于降低補體組分
C3(C3)
表達的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，該寡核苷酸包含有義鏈和反義鏈，其中該有義鏈和該反義鏈形成雙鏈體區域，其中該反義鏈包含與
SEQ ID NO:13
或
14
的
C3 mRNA
靶序列的互補區域，并且其中該互補區域的長度為至少
15
個連續核苷酸
。2.
如權利要求1所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該有義鏈的長度為
15
至
50
個核苷酸
。3.
如權利要求1或2所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該有義鏈的長度為
18
至
36
個核苷酸
。4.
如權利要求1?3中任一項所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該反義鏈的長度為
15
至
30
個核苷酸
。5.
如權利要求1?4中任一項所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該反義鏈的長度為
22
個核苷酸，并且其中該反義鏈和該有義鏈形成長度為至少
19
個核苷酸
、
任選地長度為至少
20
個核苷酸的雙鏈體區域
。6.
如權利要求1?5中任一項所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該有義鏈的長度為
36
個核苷酸，并且其中該反義鏈和該有義鏈形成長度為至少
19
個核苷酸
、
任選地長度為至少
20
個核苷酸的雙鏈體區域
。7.
如權利要求1?6中任一項所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該互補區域的長度為至少
19
個連續核苷酸，任選地長度為至少
20
個核苷酸
。8.
如權利要求1?7中任一項所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該有義鏈的
3'
端包含如
S1
?
L
?
S2
所示的莖環，其中
S1
與
S2
互補，并且其中
L
在
S1
與
S2
之間形成長度為3?5個核苷酸的環
。9.
如權利要求8所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中
L
是三環或四環
。10.
如權利要求9所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中
L
是四環
。11.
如權利要求
10
所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該四環包含
SEQ ID NO:8
的核酸序列
。12.
如權利要求8?
11
中任一項所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該
S1
和
S2
的長度為1?
10
個核苷酸，其中任選地，
S1
和
S2
具有相同的長度
。13.
如權利要求
12
所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中
S1
和
S2
的長度為1個核苷酸
、2
個核苷酸
、3
個核苷酸
、4
個核苷酸
、5
個核苷酸
、6
個核苷酸
、7
個核苷酸
、8
個核苷酸
、9
個核苷酸或
10
個核苷酸
。14.
如權利要求
13
所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中
S1
和
S2
的長度為6個核苷酸
。15.
如權利要求8?
14
中任一項所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該莖環區域包含與
SEQ ID NO:7
具有至少
85
％同一性的核酸序列
。16.
如權利要求
15
所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該莖環區域包含與
SEQ ID NO:7
具有至少
95
％同一性的核酸序列
。17.
如權利要求
16
所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該莖環區域包含
SEQ ID NO:7。18.
如權利要求8?
16
中任一項所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該莖
環包含相對于
SEQ ID NO:7
具有至多
1、2
或3個取代
、
插入或缺失的核酸
。19.
如權利要求1?
17
中任一項所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該反義鏈包含長度為一個或多個核苷酸的
3'
突出端序列
。20.
如權利要求
19
所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該反義鏈包含至少2個連接的核苷酸的
3'
突出端
。21.
如權利要求
20
所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該
3'
突出端序列的長度為2個核苷酸，其中任選地該
3'
突出端序列為
GG。22.
如權利要求1?
21
中任一項所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該寡核苷酸包含至少一個經修飾的核苷酸
。23.
如權利要求
22
所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該寡核苷酸包含
20
至
50
個經修飾的核苷酸
。24.
如權利要求
22
或
23
所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該寡核苷酸的所有核苷酸都被修飾
。25.
如權利要求
22
?
24
中任一項所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該經修飾的核苷酸包含
2'
?
修飾
。26.
如權利要求
25
所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該
2'
?
修飾是選自
2'
?
氨基乙基
、2'
?
氟
、2'
?
O
?
甲基
、2'
?
O
?
甲氧基乙基和
2'
?
脫氧
?
2'
?
氟
?
β
?
d
?
阿拉伯核酸的修飾
。27.
如權利要求
26
所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該
2'
?
修飾是
2'
?
氟或
2'
?
O
?
甲基，其中任選地該
2'
?
氟修飾是
2'
?
氟脫氧核糖核苷和
/
或該
2'
?
O
?
甲基修飾是
2'
?
O
?
甲基核糖核苷
。28.
如權利要求
27
所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該
RNAi
寡核苷酸包含
40
至
50
個
2'
?
O
?
甲基修飾，其中任選地該
RNAi
寡核苷酸包含
40
至
50
個
2'
?
O
?
甲基核糖核苷
。29.
如權利要求
28
所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該有義鏈的核苷酸1?
7、11
?
27
和
31
?
36
中的至少一個核苷酸以及該反義鏈的核苷酸
1、6、8、9、11
?
13
和
15
?
22
中的一個或多個或所有核苷酸用
2'
?
O
?
甲基諸如
2'
?
O
?
甲基核糖核苷修飾
。30.
如權利要求
29
所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該有義鏈的核苷酸1?
7、11
?
27
和
31
?
36
中的
10
至
30
個核苷酸以及該反義鏈的核苷酸
1、6、8、9、11
?
13
和
15
?
22
中的一個或多個或所有核苷酸用
2'
?
O
?
甲基諸如
2'
?
O
?
甲基核糖核苷修飾
。31.
如權利要求
29
所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該有義鏈的核苷酸1?
7、12
?
27
和
31
?
36
中的所有核苷酸以及該反義鏈的核苷酸
1、6、8、9、11
?
13
和
15
?
22
中的一個或多個或所有核苷酸用
2'
?
O
?
甲基諸如
2'
?
O
?
甲基核糖核苷修飾
。32.
如權利要求
29
所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該有義鏈的核苷酸
1、2、4
?
7、11、14
?
16、18
?
27
和
31
?
36
中的所有核苷酸以及該反義鏈的核苷酸
1、6、9、11、13、15、17、18
和
20
?
22
中的一個或多個或所有核苷酸用
2'
?
O
?
甲基諸如
2'
?
O
?
甲基核糖核苷修飾
。33.
如權利要求
28
?
32
中任一項所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該寡核苷酸包含5至
15
個
2'
?
氟修飾，諸如用
2'
?
氟脫氧核糖核苷修飾
。
34.
如權利要求
28
所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該有義鏈的核苷酸
3、8、9、10、11、12、13
和
17
中的至少一個核苷酸以及該反義鏈的核苷酸
2、3、4、5、7、8、10、12、14、16
和
19
中的一個或多個或所有核苷酸用
2'
?
氟諸如
2'
?
氟脫氧核糖核苷修飾
。35.
如權利要求
34
所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該有義鏈的核苷酸
3、8、9、10、11、12、13
和
17
中的2至4個核苷酸以及該反義鏈的核苷酸
2、3、4、5、7、8、10、12、14、16
和
19
中的一個或多個或所有核苷酸用
2'
?
氟諸如
2'
?
氟脫氧核糖核苷修飾
。36.
如權利要求
34
所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該有義鏈的核苷酸
8、9、10
和
11
中的所有核苷酸以及該反義鏈的核苷酸
2、3、4、5、7、10
和
14
中的一個或多個或所有核苷酸用
2'
?
氟諸如
2'
?
氟脫氧核糖核苷修飾
。37.
如權利要求
34
所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該有義鏈的核苷酸
3、8
?
10、12、13
和
17
中的所有核苷酸以及該反義鏈的核苷酸2?
5、7、8、10、12、14、16
和
19
中的一個或多個或所有核苷酸用
2'
?
氟諸如
2'
?
氟脫氧核糖核苷修飾
。38.
如權利要求1?
37
中任一項所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該寡核苷酸包含至少一個經修飾的核苷酸間鍵合
。39.
如權利要求
38
所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該至少一個經修飾的核苷酸間鍵合為硫代磷酸酯鍵合
。40.
如權利要求
39
所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該
RNAi
寡核苷酸在該有義鏈的核苷酸1與2之間以及該反義鏈的核苷酸1與2之間
、2
與3之間
、20
與
21
之間和
21
與
22
之間具有硫代磷酸酯鍵合
。41.
如權利要求1?
40
中任一項所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該有義鏈與該反義鏈之間不存在核苷酸間鍵合
。42.
如權利要求1?
41
中任一項所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該反義鏈的
5'
?
核苷酸的糖的
4'
?
碳包含磷酸酯類似物
。43.
如權利要求1?
41
中任一項所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該
RNAi
寡核苷酸在該反義鏈的
5'
端的第一位置處包含尿苷
。44.
如權利要求
43
所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該尿苷包含磷酸酯類似物
。45.
如權利要求
42
?
44
中任一項所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該磷酸酯類似物為
4'
?
O
?
單甲基膦酸酯
。46.
如權利要求
44
所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中包含該磷酸酯類似物的該尿苷包括以下結構：
47.
如權利要求1?
46
中任一項所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該寡核苷酸的至少一個核苷酸與一個或多個靶向配體綴合
。48.
如權利要求
47
所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中每個靶向配體包含碳水化合物
、
氨基糖
、
膽固醇
、
多肽或脂質
。49.
如權利要求
47
或
48
所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中每個靶向配體包含
N
?
乙酰半乳糖胺
(GalNAc)
部分
。50.
如權利要求
49
所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該
GalNAc
部分為一價
GalNAc
部分
、
二價
GalNAc
部分
、
三價
GalNAc
部分或四價
GalNAc
部分
。51.
如權利要求8?
50
中任一項所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該
RNAi
寡核苷酸包含與該有義鏈綴合的一至五個
2'
?
O
?
N
?
乙酰半乳糖胺
(GalNAc)
部分
。52.
如權利要求
51
所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該莖環的
L
的至多4個核苷酸與一價
GalNAc
部分綴合
。53.
如權利要求
52
所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中在該有義鏈上的核苷酸位置
28
?
30
處的這些核苷酸中的一個或多個與一價
GalNAc
部分綴合
。54.
如權利要求
53
所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中在該有義鏈上的位置
28
?
30
處的這些核苷酸中的每一個與一價
GalNAc
部分綴合
。55.
如權利要求
54
所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中在該有義鏈上的位置
28
?
30
處的這些核苷酸包括以下結構：其中：
Z
表示鍵
、
點擊化學手柄或長度為1至
20
個且包括端值的連續共價鍵合原子的接頭，其選自由以下各項組成的組：取代和未取代的亞烷基
、
取代和未取代的亞烯基
、
取代和未取代的亞炔基
、
取代和未取代的雜亞烷基
、
取代和未取代的雜亞烯基
、
取代和未取代的雜亞炔基以及它們的組合；并且
X
為
O、S
或
N。56.
如權利要求
55
所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中
Z
為縮醛接頭
。57.
如權利要求
55
或
56
中任一項所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中
X
為
O。58.
如權利要求
54
所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中在該有義鏈上的位置
28
?
30
處的這些核苷酸包括以下結構：
59.
如權利要求1?
58
中任一項所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，該有義鏈包含
SEQ ID NO:1
或
SEQ ID NO:4
的核苷酸序列
。60.
如權利要求1?
59
中任一項所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該反義鏈包含
SEQ ID NO:3
或
SEQ ID NO:6
的核苷酸序列
。61.
如權利要求1?
60
中任一項所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該有義鏈和反義鏈包含選自由以下各項組成的組的核苷酸序列：
(a)
分別為
SEQ ID NO:1
和3，以及
(b)
分別為
SEQ ID NO:4
和
6。62.
如權利要求1?
60
中任一項所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該有義鏈包含如
SEQ ID NO:1
中所示的核苷酸序列，并且該反義鏈包含如
SEQ ID NO:3
中所示的核苷酸序列
。63.
如權利要求1?
60
中任一項所述的
RNAi
寡核苷酸或其藥學上可接受的鹽，其中該有義鏈包含如
SEQ ID NO:4
中所示的核苷酸序列，并且該反義鏈包含如
SEQ ID NO:6
中所示的核苷酸...

【專利技術屬性】
技術研發人員：梅麗莎，
申請(專利權)人：阿斯利康愛爾蘭有限公司，
類型：發明
國別省市：