【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于醫用材料，尤其涉及一種載藥介孔聚多巴胺摻雜的gelma支架的制備方法及應用。
技術介紹
1、理想的骨組織工程支架應該具有良好的生物相容性、理想的機械性能以及與缺損部位相匹配的三維多孔立體結構。但是目前為止能夠滿足所有要求的骨組織工程材料屈指可數。現有的骨組織工程支架通常可分為兩大類，其一是通過化學反應和提純等方式形成的聚合物類，其二是來源于自然界植物或是有機生物自身提煉形成的。相比于前者，后者由于其自身的結構特點與細胞外基質較為相似，具有與機體組織相近的理化性質，往往具備有更佳的生物相容性。甲基丙烯酰胺基明膠(gelma)水凝膠支架作為新興的骨組織工程材料。相比于聚合物支架，gelma水凝膠支架的合成原料來源于有機生物自身，因此其自身的結構特點與細胞外基質較為相似，具有較高的仿生性以及理想的生物相容性。近年來隨著3d打印技術的快速發展，該技術已經逐漸在骨組織工程中得以應用。3d打印技術不僅可以通過數字化可控的打印設備打印高表面積、高孔隙率和高機械強度的三維立體支架，還可以構建與缺損部位完美匹配的高精度和高可塑性的材料模型，使其更適合骨修復細胞的粘附和生長，促進組織形成過程中的營養物質交換，從而加速骨缺損部位的修復。
2、另一方面，在骨缺損修復過程中伴隨的血管網絡重建在一定程度上決定了愈合過程中是否伴有感染和骨壞死等并發癥的發生。尤其針對大面積缺損的骨組織而言，其大多缺乏完整的血管網絡，導致支架材料植入后難以與周圍骨組織整合，大大阻礙了骨愈合過程。因此血管化問題仍是制約骨組織工程支架應用于臨床的重要原因。
技術實現思路
1、本專利技術實施例的目的在于提供一種載藥介孔聚多巴胺摻雜的gelma支架的制備方法及應用，旨在解決上述
技術介紹
中提出的問題。
2、本專利技術實施例是這樣實現的，一種載藥介孔聚多巴胺摻雜的gelma支架的制備方法，包括以下步驟：
3、步驟1、制備gelma水凝膠前體；
4、步驟2、制備mpda@rd?nps；
5、步驟3、gelma/ha/mpda@rd的制備：
6、步驟3.1、稱取500mggelma水凝膠前體置于4ml試管中，放置于55℃水浴箱中，待其充分溶解后得到質量分數為10％的gelma溶液；加入150mg?ha后以200rpm轉速攪拌十分鐘；稱取3mg?mpda@rd?nps以及1mgl?ap光引發劑加入上述體系溶液中，攪拌5分鐘；
7、步驟3.2、將步驟3.1制備的液體裝入3d打印料筒中，放置于4℃冰箱冷藏30分鐘，利用3d打印機器將其打印成支架，然后在405nm紫外光照射30s使其交聯得到gelma/ha/mpda@rd水凝膠。
8、進一步的技術方案，所述步驟1包括以下具體步驟：
9、步驟1.1、將5g?a型豬皮明膠分次加入到50ml二磷酸鹽緩沖鹽水(pbs)中；將該體系置于50℃水浴中，以400rpm轉速連續攪拌約至完全溶解，得到濃度為10％(w/v)的gelma水凝膠前體溶液；
10、步驟1.2、將gelma水凝膠前體溶液繼續在50℃環境中以400rpm轉速攪拌，同時以0.5ml/min的速率逐滴加入1.5-3ml甲基丙烯酸；持續反應3h后，加入naoh溶液或粉末，直至將ph調節為7.2；
11、步驟1.3、將gelma水凝膠前體溶液倒入到300ml的溫和pbs溶液中，且pbs溶液的溫度為50℃，混合均勻后，將液體轉移到14000kd透析膜上，保持其在50℃蒸餾水水浴環境中透析3-7天；在此期間，前兩天每2小時更換一次蒸餾水，后期換水頻率可降低至3-4次/日，直至平衡；
12、步驟1.4、透析結束后，使用孔隙直徑為0.22um的濾器對gelma水凝膠前體溶液進行抽濾；
13、步驟1.5、將抽濾后的gelma水凝膠前體溶液分次吸出并轉移到大皿中，進行為期2天的冷凍干燥，最終得到白色多孔泡沫樣的gelma水凝膠前體。
14、進一步的技術方案，所述步驟2包括以下具體步驟：
15、步驟2.1、將65ml蒸餾水、60ml無水乙醇、0.36g聚氧乙烯聚氧丙烯和412ul均三甲苯放置于燒杯中，將該體系溶液放置于4℃水浴超聲30分鐘，待其形成乳白色水溶液后，放入90mg三羥甲基氨基甲烷鹽酸；常溫攪拌10分鐘后，向該體系加入60mg的鹽酸多巴胺粉末；
16、步驟2.2、室溫下，500rpm轉速攪拌24小時后，收集液體于50ml離心管中；以14000rpm轉速進行20分鐘離心；棄掉液體，收集底部mpda?nps初產物；用蒸餾水對mpda?np初產物以12000rpm轉速離心清洗3次，凍干后稱量計算產率；
17、步驟2.3、取2mg?mpda?nps于2ml蒸餾水中，加入2mgrd；常溫下，將該體系以500rpm轉速攪拌24小時，24小時后，收集液體并以10000rpm轉速離心10分鐘，收集離心管底部的mpda@rd?nps，凍干后稱量計算產率。
18、本專利技術實施例的另一目的在于，一種載藥介孔聚多巴胺摻雜的gelma支架的應用，將所述載藥介孔聚多巴胺摻雜的gelma支架應用于骨缺損修復相關的臨床治療中。
19、本專利技術實施例提供的一種載藥介孔聚多巴胺摻雜的gelma支架的制備方法，本方法首次將rd誘導血管網絡構建的功能應用于骨組織工程，通過將rd與介孔mpda相結合，構建mpda@rd藥物遞送平臺，制備的gelma/ha/mpda@rd三維支架不僅具備了優異的機械性能和生物相容性，為骨再生創造了可靠的三維空間。并可在808nm近紅外光作用下實現了對rd的可控釋放，同時介孔聚多巴胺理作為理想的光敏劑，能夠將808nm近紅外光能量轉化為熱能，產生的溫和熱刺激具有促進骨再生在效果。這將是rd首次應用于骨組織工程生物材料中，實現骨修復過程的主動誘導血管網絡構建。
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1.一種載藥介孔聚多巴胺摻雜的GELMA支架的制備方法，其特征在于，一種載藥介孔聚多巴胺摻雜的GELMA支架的制備方法，包括以下步驟：
2.根據權利要求1所述的載藥介孔聚多巴胺摻雜的GELMA支架的制備方法，其特征在于，所述步驟1包括以下具體步驟：
3.根據權利要求1所述的載藥介孔聚多巴胺摻雜的GELMA支架的制備方法，其特征在于，所述步驟2包括以下具體步驟：
4.一種載藥介孔聚多巴胺摻雜的GELMA支架的應用，基于上述權利要求1-3任一項所述的載藥介孔聚多巴胺摻雜的GELMA支架的制備方法所制備的載藥介孔聚多巴胺摻雜的GELMA支架，其特征在于，將所述載藥介孔聚多巴胺摻雜的GELMA支架應用于骨缺損修復相關的臨床治療中。
【技術特征摘要】
1.一種載藥介孔聚多巴胺摻雜的gelma支架的制備方法，其特征在于，一種載藥介孔聚多巴胺摻雜的gelma支架的制備方法，包括以下步驟：
2.根據權利要求1所述的載藥介孔聚多巴胺摻雜的gelma支架的制備方法，其特征在于，所述步驟1包括以下具體步驟：
3.根據權利要求1所述的載藥介孔聚多巴胺摻雜的gelma支架...
【專利技術屬性】
技術研發人員：周延民，游佳倩，孫曉琳，周菁，陳思宇，
申請(專利權)人：吉林大學，
類型：發明
國別省市：
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