【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)屬于植物生物，具體涉及藥用植物瓜蔞叢生芽的誘導(dǎo)、繼代及生根的培養(yǎng)方法，是可增加有效出苗率，提高移栽成活率的方法。
技術(shù)介紹
1、瓜蔞（ trichosanthes?kirilowii?maxim.），俗名吊瓜、栝樓、藥瓜、瓜樓等，為葫蘆科（cucurbitaceae）栝樓屬（ trichosanthes?l.）植物，多年生草質(zhì)藤本。果實、種子、根分別作栝樓、栝樓籽和天花粉入藥。瓜蔞主治：清熱滌痰，寬胸散結(jié)，潤燥滑腸。也用于肺熱咳嗽，痰濁黃稠，胸痹心痛，結(jié)胸痞滿，乳癰，肺癰，腸癰腫痛，大便秘結(jié)。近年來，瓜蔞籽獨特風(fēng)味，具有保健作用，其食用價值得到充分認(rèn)可，市場需求旺盛。近十年來，瓜蔞在江蘇蘇北、安徽、浙江等地種植面積猛增，瓜蔞種苗需求供不應(yīng)求。
2、目前關(guān)于瓜蔞組織培養(yǎng)已有相關(guān)報道，對于人工栽培瓶苗，出苗率的高低以及移栽存活率的高低是組織培養(yǎng)技術(shù)能否應(yīng)用于工廠化大規(guī)模生產(chǎn)的關(guān)鍵。有研究表明，香蕉、絲瓜絡(luò)提取物等應(yīng)用于植物組培快繁，可在較短時間內(nèi)培育出大量優(yōu)質(zhì)種苗，加快推廣速度。瓜蔞組培技術(shù)在產(chǎn)業(yè)化推廣中存在玻璃化、黃化、污染等問題。為了提升瓜蔞組培技術(shù)的產(chǎn)業(yè)化效能，急需優(yōu)化培養(yǎng)基配方，以有效增加瓜蔞組培出苗數(shù)量，提高瓜蔞組培苗煉苗移栽的成活率。長期以來，瓜蔞瓤在瓜蔞皮及瓜蔞子藥材生產(chǎn)加工過程中常以非藥用部位而丟棄，造成了巨大浪費。瓜蔞根須在瓜蔞種植中也常作為廢棄物而丟棄，也造成了巨大浪費。植物提取物是常見的生物技術(shù)，可將瓜蔞瓤提取物
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、本專利技術(shù)的旨在于提供一種瓜蔞叢生芽的誘導(dǎo)和生根的培養(yǎng)方法，該培養(yǎng)方法中包括一種利用瓜蔞瓤提取物促進叢生芽誘導(dǎo)及繼代的培養(yǎng)基，一種利用瓜蔞瓤及瓜蔞根須提取物促進瓜蔞組培苗生根的培養(yǎng)基。針對現(xiàn)有技術(shù)中玻璃化、黃化、污染等現(xiàn)象，出苗率不高、移栽存活率低等問題，本專利技術(shù)提供了一種切實可行的解決方法。本專利技術(shù)具有簡單易行，出苗數(shù)量多，成苗移栽成活率高，為工廠化育苗提供技術(shù)支持。
2、選取瓜蔞莖切段和莖卷須為外植體材料，接種到叢生芽的誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，5~8天后開始膨大萌發(fā)，15~20天左右分化出叢生芽，誘導(dǎo)率超過98%。叢生芽或莖段接種到繼代培養(yǎng)基中，12~15天即可形成壯苗。無根苗轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基中，25~30天獲得根系發(fā)達且莖粗壯的成苗即可進行移栽，移栽成活率超過96%，從而實現(xiàn)了本專利技術(shù)的目的。
3、本專利技術(shù)為達到其目的，采用的技術(shù)方案如下。
4、（1）一種利用瓜蔞瓤提取物促進叢生芽誘導(dǎo)的培養(yǎng)基：
5、所述叢生芽的誘導(dǎo)培養(yǎng)基為向1/2ms培養(yǎng)基中加入瓜蔞瓤提取物2.5?~?3.5?mg/l、白砂糖15?~?30?g/l、蛋白胨8?~?10?g、瓊脂8?~?9?g/l配置而成。
6、優(yōu)化的，如下組分在叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中的濃度分別為：瓜蔞瓤提取物2.5?~?3.0mg/l、白砂糖15?~?20?g/l、蛋白胨8?~?10?g、瓊脂8.5?~?9g/l配置而成。
7、進一步優(yōu)化的，如下組分在叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中的濃度分別為：瓜蔞瓤提取物3.0mg/l、白砂糖15?g/l、蛋白胨8?g、瓊脂8.8?g/l配置而成。
8、（2）一種利用瓜蔞瓤提取物有助叢生芽或莖段繼代的培養(yǎng)基：
9、所述叢生芽或莖段繼代的培養(yǎng)基為向1/2ms培養(yǎng)基中加入瓜蔞瓤提取物1.5?~2.5?mg/l、白砂糖15?~?30?g/l、蛋白胨8?~?10?g、瓊脂8?~?9?g/l配置而成。
10、優(yōu)化的，如下組分在叢生芽或莖段繼代的培養(yǎng)基中的濃度分別為：瓜蔞瓤提取物1.5?~?2.0?mg/l、白砂糖15?~?20?g/l、蛋白胨8?~?10?g、瓊脂8.5?~?9g/l配置而成。
11、進一步優(yōu)化的，如下組分在叢生芽或莖段繼代的培養(yǎng)基中的濃度分別為：瓜蔞瓤提取物2.0?mg/l、白砂糖15?g/l、蛋白胨8?g、瓊脂8.8?g/l配置而成。
12、（3）一種利用瓜蔞瓤及瓜蔞根須提取物促進瓜蔞組培苗生根的培養(yǎng)基。
13、所述瓜蔞組培苗生根培養(yǎng)基為向1/2ms培養(yǎng)基中加入瓜蔞瓤提取物1.5?~?2.5mg/l、瓜蔞根須提取物1.0?~?2.0?mg/l、白砂糖15?~?30?g/l、蛋白胨8?~?10?g、活性炭1?~3?g/l、瓊脂8?~?9?g/l配置而成。
14、優(yōu)化的，如下組分在瓜蔞組培苗生根培養(yǎng)基中的濃度分別為：瓜蔞瓤提取物1.0?~2.0?mg/l、瓜蔞根須提取物1.0?~?1.5?mg/l、白砂糖15?~?20?g/l、蛋白胨8?~?10?g、活性炭1?~?2?g/l、瓊脂8.5?~?9g/l配置而成。
15、進一步優(yōu)化的，如下組分在瓜蔞組培苗生根培養(yǎng)基中的濃度分別為：瓜蔞瓤提取物2.0?mg/l、瓜蔞根須提取物1.5?mg/l、白砂糖15?g/l、蛋白胨8?g、活性炭1.5?g/l、瓊脂8.8?g/l配置而成。
16、上述技術(shù)方案（1?~?3）中，瓜蔞瓤提取物提取方法為：瓜蔞瓤按料液比1?:?15加入蒸餾水，在40?khz條件下60?~?65℃超聲提取46?~?56?min，超聲后離心收集上清液和濾渣，濾渣進行二次重復(fù)提取，合并2次上清液在60?~?65℃條件下減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，得到浸膏后冷凍干燥，研磨裝瓶保存?zhèn)溆谩?/p>
17、上述技術(shù)方案3中，瓜蔞根須提取物提取方法為：瓜蔞根須洗凈陰干，干燥后粉碎過60?~?80目篩備用，按料液比1?:?20加入蒸餾水，在40?khz條件下60?~?65℃超聲提取66~?76?min，超聲后離心收集上清液和濾渣，濾渣進行二次重復(fù)提取，合并2次上清液在60?~65℃條件下減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，得到浸膏后冷凍干燥，研磨裝瓶保存?zhèn)溆谩?/p>
18、上述技術(shù)方案1中，培養(yǎng)的條件為：溫度24?~?26℃，光照強度2200?~?3000lx，光暗交替14h/10h。
19、上述技術(shù)方案（2?~?3）中，培養(yǎng)的條件為：溫度24?~?26℃，光照強度2200?～2800lx，光暗交替12h/12h。
20、本專利技術(shù)的有益效果在于：
21、本專利技術(shù)向常規(guī)培養(yǎng)基中添加瓜蔞瓤及瓜蔞根須提取物，有效增加瓜蔞叢生芽的誘導(dǎo)率，組培苗出苗數(shù)量，提高出苗率及移栽成活率，從而降低組培苗成本。另一方面，培養(yǎng)基為無激素培養(yǎng)基，無玻璃化、黃化、污染等問題。誘導(dǎo)、繼代、生恨培養(yǎng)中轉(zhuǎn)接，瓜蔞組培苗也能在較短時間內(nèi)適應(yīng)新的培養(yǎng)基。
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1.一種瓜蔞瓤及瓜蔞根須提取物在瓜蔞組培快繁中的應(yīng)用；
2.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的促進叢生芽的誘導(dǎo)培養(yǎng)基為向1/2MS培養(yǎng)基中加入瓜蔞瓤提取物3.0?mg/L、白砂糖15?g/L、蛋白胨8?g、瓊脂8.8?g/L配置而成。
3.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述有助叢生芽或莖段繼代的培養(yǎng)基為向1/2MS培養(yǎng)基中加入瓜蔞瓤提取物2.0?mg/L、白砂糖15?g/L、蛋白胨8?g、瓊脂8.8?g/L配置而成。
4.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述促進瓜蔞組培苗生根的培養(yǎng)基為向1/2MS培養(yǎng)基中加入瓜蔞瓤提取物2.0?mg/L、瓜蔞根須提取物1.5?mg/L、白砂糖15?g/L、蛋白胨8?g、活性炭1.5?g/L、瓊脂8.8?g/L配置而成。
5.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，瓜蔞瓤提取物提取方法為瓜蔞瓤按料液比1?:?15加入蒸餾水，在40?kHz條件下60?~?65℃超聲提取46?~?56?min，超聲后離心收集上清液和濾渣，濾渣進行二次重復(fù)提取，合并2次上清液在60?~?65℃...
【技術(shù)特征摘要】
1.一種瓜蔞瓤及瓜蔞根須提取物在瓜蔞組培快繁中的應(yīng)用；
2.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的促進叢生芽的誘導(dǎo)培養(yǎng)基為向1/2ms培養(yǎng)基中加入瓜蔞瓤提取物3.0?mg/l、白砂糖15?g/l、蛋白胨8?g、瓊脂8.8?g/l配置而成。
3.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述有助叢生芽或莖段繼代的培養(yǎng)基為向1/2ms培養(yǎng)基中加入瓜蔞瓤提取物2.0?mg/l、白砂糖15?g/l、蛋白胨8?g、瓊脂8.8?g/l配置而成。
4.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述促進瓜蔞組培苗生根的培養(yǎng)基為向1/2ms培養(yǎng)基中加入瓜蔞瓤提取物2.0?mg/l、瓜蔞根須提取物1.5?mg/l、白砂糖15?g/l、蛋白胨8?g、活性炭1.5?g/l、瓊脂8.8?g/l配...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：侯北偉，王勝，王虎，孫力軍，劉暢，姚正穎，傅雷，
申請(專利權(quán))人：中華全國供銷合作總社南京野生植物綜合利用研究所，
類型：發(fā)明
國別省市：
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