【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)屬于同時檢測電化學(xué)生物傳感領(lǐng)域，具體涉及一種用于唾液褪黑素、血清素和多巴胺同時檢測的電化學(xué)傳感器的制備與應(yīng)用。
技術(shù)介紹
1、太陽東升西落的周期性，使長久以來暴露在這種明暗周期中的哺乳動物形成與之相適應(yīng)的行為和生活方式——晝夜節(jié)律性。然而隨著現(xiàn)代照明技術(shù)的不斷發(fā)展，各種人工的非全光譜性和夜間的照明正在慢慢打破這種節(jié)律，使哺乳動物在睡眠、情緒、認知等方面產(chǎn)生了紊亂，出現(xiàn)抑郁、雙相情感障礙、認知下降等問題。
2、褪黑素、血清素和多巴胺分別與睡眠、情緒和認知相關(guān)，也是目前所發(fā)現(xiàn)的節(jié)律性較為顯著的生理指標。因此三種物質(zhì)的關(guān)聯(lián)分析對于更加深入的認識光照對哺乳動物的影響，以及改善哺乳動物因生理節(jié)律紊亂產(chǎn)生的失眠、抑郁、認知下降等問題有重要意義。
3、目前常見的檢測三種物質(zhì)的方法有色譜法、質(zhì)譜法、酶聯(lián)免疫吸附法等方法。色譜法、質(zhì)譜法能夠同時檢測三種物質(zhì)，然而存在設(shè)備貴重、便攜性差、樣本前處理復(fù)雜和檢測成本高等問題；酶聯(lián)免疫吸附法雖然便攜性好、可高通量檢測，但是不能同時檢測三種物質(zhì)并進行快速關(guān)聯(lián)分析。電化學(xué)生物傳感是一種靈敏度高、響應(yīng)速度快、檢測范圍寬、可即時檢測的方法，其中基于多標記法的同時檢測電化學(xué)生物傳感器能利用一根電極在一次樣品分析中同時檢測出多種待測物的含量。目前采用多標記法同時檢測褪黑素、血清素和多巴胺的電化學(xué)傳感器并基于唾液樣品分析晝夜節(jié)律的研究國內(nèi)外未見報道。因此，建立一種簡便快捷的同時檢測褪黑素、血清素和多巴胺的方法是十分必要的。
4、本專利技術(shù)以具有高比表面積、高導(dǎo)電性的多壁碳納
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、本專利技術(shù)的目的在于提供一種用于唾液褪黑素、血清素和多巴胺同時檢測的電化學(xué)傳感器的制備與應(yīng)用方法，以克服現(xiàn)有檢測技術(shù)的不足。
2、為實現(xiàn)前述專利技術(shù)目的，本專利技術(shù)是通過一下措施來實現(xiàn)的：
3、本專利技術(shù)的電化學(xué)傳感器包括：工作電極、參比電極和對電極，所述工作電極的基底電極為玻碳電極，其表面修飾多壁碳納米管和殼聚糖的復(fù)合物。所述參比電極為銀/氯化銀電極，對電極為鉑絲電極。由三種所述電極組成電化學(xué)傳感器通過伏安法來同時檢測唾液褪黑素、血清素和多巴胺。具體的電化學(xué)傳感器制備方法包括以下步驟：
4、提供預(yù)處理玻碳電極，具體的處理步驟為：對玻碳電極進行拋光、清洗處理，之后于pbs溶液中進行差分脈沖法掃描，直至得到?jīng)]有明顯氧化峰的曲線。
5、在處理好的電極上修飾多壁碳納米管和殼聚糖的復(fù)合材料，制備唾液褪黑素、血清素和多巴胺同時檢測的電化學(xué)傳感器，優(yōu)選的復(fù)合方式為先在電極表面滴涂多壁碳納米管水溶液后，后通過優(yōu)化過的循環(huán)伏安法將殼聚糖乙酸水溶液修飾到電極上，制得工作電極。
6、本專利技術(shù)實施例還提供了由前述方法制備的用于褪黑素、血清素和多巴胺同時檢測的電化學(xué)傳感器在同時檢測唾液褪黑素、血清素和多巴胺實樣品中的應(yīng)用。具體的檢測方法包括以下步驟：
7、以修飾后的玻碳電極為工作電極，與鉑絲電極、銀/氯化銀電極組成三電極體系，置于唾液樣品中，進行差分脈沖法測試，可分別根據(jù)0.15～0.25v、0.35～0.45v、0.7～0.8v三處的電化學(xué)峰實現(xiàn)多巴胺、血清素和褪黑素的含量的確定，實現(xiàn)樣品中三種所述待測物的同時檢測；
8、以ph＝7.4的pbs作為溶劑配制同時含不同濃度褪黑素、血清素和多巴胺的標準樣品，在差分脈沖法檢測曲線上根據(jù)峰電位確定物質(zhì)，根據(jù)峰電流隨濃度的變化建立線性關(guān)系；
9、其中使用salivette咀嚼式唾液采集管采集唾液，并通過離心獲得用于檢測的唾液樣品，其中以ph＝7.4的pbs作為溶劑配制標準溶液進行標準加入法定量研究。
10、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本專利技術(shù)的有益效果在于：
11、1)本專利技術(shù)建立的同時檢測唾液褪黑素、血清素和多巴胺的電化學(xué)傳感方法較現(xiàn)有色譜、質(zhì)譜和elisa法等更加便攜、快速、簡便、靈敏和經(jīng)濟；
12、2)本專利技術(shù)使用循環(huán)伏安法將多壁碳納米管和殼聚糖進行復(fù)合，并解決了使用電化學(xué)方法同時檢測褪黑素、血清素和多巴胺中出現(xiàn)的電化學(xué)峰重疊問題；
13、3)本專利技術(shù)作為一種新興的同時檢測褪黑素、血清素和多巴胺的技術(shù)，可實現(xiàn)快速準確分析哺乳動物晝夜節(jié)律的目的，所使用的檢測樣品為無損采集得到的唾液樣品，該方法操作簡單、安全、檢測效率高、物美價廉，具有實用性且易于推廣。
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1.一種用于唾液褪黑素、血清素和多巴胺同時檢測的電化學(xué)傳感器的制備與應(yīng)用，其特征在于：
2.根據(jù)專利要求1所述電化學(xué)傳感技術(shù)，其特征在于：
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述工作電極，其特征在于：
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述溶液滴涂，其特征在于：
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述電沉積，其特征在于：
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述工作電極，其特征在于：
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述工作電極，其特征在于：
8.由權(quán)利要求1-7中任一項所述方法制備的同時檢測褪黑素、血清素和多巴胺的電化學(xué)傳感器在檢測唾液褪黑素、血清素和多巴胺中的應(yīng)用。
9.一種同時檢測褪黑素、血清素和多巴胺的方法，其特征在于：
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述檢測技術(shù)，其特征在于：
【技術(shù)特征摘要】
1.一種用于唾液褪黑素、血清素和多巴胺同時檢測的電化學(xué)傳感器的制備與應(yīng)用，其特征在于：
2.根據(jù)專利要求1所述電化學(xué)傳感技術(shù)，其特征在于：
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述工作電極，其特征在于：
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述溶液滴涂，其特征在于：
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述電沉積，其特征在于：
6.根據(jù)權(quán)利要求3所...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：羅愛芹，唐珊珊，梁阿新，劉淼，王微，張復(fù)來，
申請(專利權(quán))人：北京理工大學(xué)，
類型：發(fā)明
國別省市：
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