一種超聲提取多穗金粟蘭總黃酮的方法技術

本發明專利技術公開了一種超聲提取多穗金粟蘭總黃酮的方法，將所述多穗金粟蘭粉碎后過４０目篩，加入石油醚混合均勻，充分脫色后經兩層濾紙抽濾，取濾渣揮干備用；準確稱取預處理好的濾渣，按料液比（ｇ／ｍＬ）１∶５－１０加入濃度為６５％－７５％的甲醇溶液，充分搖勻后浸泡１ｈ，在２５－３０℃、４０ＫＨｚ下超聲提取２５－３０ｍｉｎ。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及植物有效成分的提取方法，尤其涉及的是一種超聲提取多穗金粟蘭總 黃酮的方法。
技術介紹
響應曲面法(response surface methodology, RSM)是一種數學方法和統計方法 相結合的實驗優化方法，它通過近似構造一個具有明確表達形式的多項式來表達隱式功能 函數，對受多個自變量影響的響應進行建模和分析，最終目的是優化響應值。由于采用了更 為合理的實驗設計，能以最經濟方式，有效快速地確定多因子系統的最佳條件。簡單而言， 響應曲面法就是將所有試驗點均安排到球形的表面上的試驗方法，在有限的實驗次數下通 過建立連續變量曲面模型，并對影響結果的各因素及其交互作用進行優化與評價的多元優 化方法。目前，響應曲面法廣泛應用于天然產物成分提取等方面，對天然產物成分的開發利 用具有重要作用，已成為降低開發成本、優化加工條件、提高產品質量的有力手段。黃酮類化合物是一類廣泛存在于植物中的天然產物，具有抗氧化、降低脂質過氧 化反應、預防心血管疾病、抗衰老、抗腫瘤及清除自由基等作用，近年來，它的研究、開發和 利用已在國內外受到廣泛關注。多穗金粟蘭主要含有倍半萜、黃酮類、香豆素類等類型化合 物。目前關于多穗金粟蘭有效成分提取方面的研究尚未見相關報道。參考文獻1、Jia Ζ. , Tang Μ. , Wu J. The determination of flavonoid contents in mulberry and their scavenging effects on superoxide radicals. Food Chem,1999, 64 :555-559.2、Amini Μ. , Younesi H. Application of response surface methodology for optimization of lead biosorption in an aqueous solution by Aspergillusniger. Journal of Hazardous Materials,2008，154(1/3) :694_702.3、Wu Τ. , Annie B. S. W. ,Gu L. , et al. Simultaneous determination of six isoflavonoids in commercial Radix Astragali by HPLC-UV. Fitoterapia, 2005, 76(2) : 157-165.4>ffania A. ,Kaur D. ,Ahmed I.,et al. Extraction optimization of watermelon seed protein using response surface methodology. LffT Food Science and Technology,2008,41(8) : 1514-1520.
技術實現思路
為了充分利用資源以及減少能源、溶劑等生產成本的消耗，本專利技術利用響應曲面 法優化超聲提取多穗金粟蘭總黃酮的工藝條件，借助實驗設計軟件Design-Expert 7. 1.3， 采用中心組合設計(central composite design，CCD)對各主要影響因子如甲醇濃度、料液 比、提取時間、提取溫度之間的單一和交互作用等進行了較深入的研究，得出最佳的超聲提3取工藝參數。本專利技術的技術方案如下，其特征在于，將所述多穗金粟蘭粉碎后 過40目篩，加入石油醚混合均勻，充分脫色后經兩層濾紙抽濾，取濾渣揮干備用；準確稱取 預處理好的濾渣，按料液比(g/mL)l 5-10加入濃度為65%-75%的甲醇溶液，充分搖勻 后浸泡lh，在25-30C、40KHz下超聲提取25_30min。所述的方法，甲醇濃度70%，料液比1 8，提取時間28min，提取溫度27°C。所述的方法，將所述多穗金粟蘭粉碎后過40目篩，按料液比(g/mL)l 10加入石 油醚混合均勻。附圖說明圖IA-D多穗金粟蘭總黃酮提取液OD51tl值與各種因素的關系，其中1-A.甲醇濃度 對多穗金粟蘭黃酮得率的影響；1-B.料液比對多穗金粟蘭黃酮得率的影響；1-C.提取時間 對多穗金粟蘭黃酮得率的影響；1-D.提取溫度對多穗金粟蘭黃酮得率的影響；圖2A-F不同因素的交互作用對多穗金粟蘭總黃酮的影響，其中2-A.料液比與甲 醇濃度的交互作用對多穗金粟蘭總黃酮影響的響應面和等高線圖；2-B.提取時間與甲醇 濃度的交互作用對多穗金粟蘭總黃酮影響的響應面和等高線；2-C.提取溫度與甲醇濃度 的交互作用對多穗金粟蘭總黃酮影響的響應面和等高線；2-D.提取時間與料液比的交互 作用對多穗金粟蘭總黃酮影響的響應面和等高線；2-E.提取溫度與料液比的交互作用對 多穗金粟蘭總黃酮影響的響應面和等高線；2-F.提取溫度與提取時間的交互作用對多穗 金粟蘭總黃酮影響的響應面和等高線。具體實施例方式以下結合附圖和具體實施例，對本專利技術進行詳細說明。1材料與儀器(1)實驗材料多穗金粟蘭于2007年7月分別采自陜西太白山和陜西省寧陜縣旬陽壩，經陜西師 范大學生命科學學院田先華教授鑒定為金粟蘭屬多穗金粟蘭Chloranthus multistachys Pei0樣品標本保存于陜西師范大學生命科學學院。(2)儀器與試劑KQ-600DB數控超聲波清洗儀(600w，40kHz，昆山市超聲儀器有限公司)，電子天 平，UV-2450型紫外分光光度計(日本島津)，FZ102微型植物粉碎機(黃驊市中興有限責 任公司)；蘆丁購自購自中國藥品生物制品檢定所，甲醇、石油醚、硝酸鈉等所用試劑均為 分析純。2 方法(1)標準曲線繪制參照鋁鹽顯色法(參考文獻1)。精確量取ImL不同濃度的蘆丁標準溶液 (0.01-0. 10mg/mL)置于IOmL容量瓶中，加入60%甲醇lmL，5 %亞硝酸鈉溶液300 μ L，混 勻，放置5min后，加10%硝酸鋁溶液300 μ L，搖勻放置6min。加lmol/L的氫氧化鈉溶液44mL，用60%甲醇定容至10mL，搖勻，放置15min，靜置。在510nm波長測定各濃度下的吸光 度值，以60%甲醇溶液作參比。標準曲線計得y = 12. 045x+0. 0612 (r2 = 0. 9902)(2)供試品溶液的制備將干燥至恒重多穗金粟蘭粉碎后過40目篩，各稱取50. OOg于IL三角瓶中，加入 500mL石油醚混合均勻，充分脫色后經兩層濾紙抽濾，取濾渣揮干備用。(3)單因素試驗設計①甲醇濃度對提取工藝的影響準確稱取預處理好的材料1. OOg置于50mL三角瓶中，按料液比(g/mL) 1 25分 別加入濃度為50 %、60 %、70 %、80 %、90 %、100 %的甲醇溶液各25mL，充分搖勻后浸泡Ih， 在60°C、40KHz下超聲處理30min，抽濾提取液，將濾液轉至25mL容量瓶，用60%甲醇定容。 混勻后取出ImL置于IOmL容量瓶中，以下按照測定蘆丁標準溶液OD51tl的步驟測定各條件 下的溶液吸光值。多穗金粟蘭提取液OD51tl值與甲醇濃度的關系見圖1-A。②料液比對提取工藝的影響按料液比(本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種超聲提取多穗金粟蘭總黃酮的方法，其特征在于，將所述多穗金粟蘭粉碎后過４０目篩，加入石油醚混合均勻，充分脫色后經兩層濾紙抽濾，取濾渣揮干備用；準確稱取預處理好的濾渣，按料液比（ｇ／ｍＬ）１∶５－１０加入濃度為６５％－７５％的甲醇溶液，充分搖勻后浸泡１ｈ，在２５－３０℃、４０ＫＨｚ下超聲提?。玻担常埃恚椋睢?

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發人員：康杰芳，王喆之，王慧，李黎星，袁琴琴，
申請(專利權)人：陜西師范大學，
類型：發明
國別省市：87[中國|西安]