【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及生物，尤其是涉及一種抗新布尼亞病毒np抗原的單克隆抗體及其應用和產品。
技術介紹
1、新布尼亞病毒，全稱嚴重發熱伴血小板減少綜合征病毒(severe?fever?withthrombocytopenia?syndrome?bunyavirus,sftsv)，首次在中國河南省報告并分離獲得的一種病毒。sftsv是一種帶有一條rna鏈的包膜負義病毒。三個單鏈片段組成了sftsv基因組：大片段(l)、中片段(m)和小片段(s)。l片段包含6368個核苷酸，編碼用于病毒復制的rna依賴性rna聚合酶(rdrp)，介導病毒rna復制和mrna合成；m片段包含3378個核苷酸，病毒包膜糖蛋白(糖蛋白n?gn和c?gc)在病毒組裝和病毒顆粒形成中起關鍵作用；s片段由1744個核苷酸構成，使用兩個反向閱讀框架編碼核衣殼蛋白(n)和非結構蛋白(nss)。
2、新布尼亞病毒感染患者主要會出現發熱、畏寒、乏力、全身酸痛等全身中毒癥狀；嘔吐、嘔血以及腹瀉等消化道癥狀。病情惡化迅速的患者很快會出現意識障礙、呼吸道消化道出血，更嚴重者會因呼吸衰竭，彌漫性血管內凝血等多臟器功能衰竭死亡。而對于sftsv的致病機制目前還在進一步探索中，有初步研究表明，sftsv的感染可能激活了部分受體絡氨酸激酶，比如神經生長因子受體、血管內皮生長因子受體等，并通過rtks-pi3k/akt-mtor通路完成病毒的復制和釋放。
3、單克隆抗體憑借其特異性和靈活性成為傳染病診斷的重要工具。基于抗體與抗原結合的高親和力和高特異性，新布尼亞病毒n
4、有鑒于此，特提出本專利技術。
技術實現思路
1、本專利技術的第一目的在于提供一種抗新布尼亞病毒np抗原的單克隆抗體，以解決上述問題中的至少一種。
2、本專利技術的第二目的在于提供生物材料。
3、本專利技術的第三目的在于提供上述抗新布尼亞病毒np抗原的單克隆抗體在制備新布尼亞病毒檢測產品中的應用。
4、本專利技術的第四目的在于提供一種新布尼亞病毒標記物。
5、本專利技術的第五目的在于提供一種用于新布尼亞病毒檢測的試劑盒。
6、為了實現以上目的，提出以下方案：
7、第一方面，本專利技術提供了一種抗新布尼亞病毒np抗原的單克隆抗體，所述抗新布尼亞病毒np抗原的單克隆抗體的可變區包括：具有如seq?id?no.1所示氨基酸序列的互補決定區cdr1-vh、具有如seq?id?no.2所示氨基酸序列的互補決定區cdr2-vh、具有如seq?idno.3所示氨基酸序列的互補決定區cdr3-vh、具有如seq?id?no.4所示氨基酸序列的互補決定區cdr1-vl、具有如seq?id?no.14所示氨基酸序列的互補決定區cdr2-vl和具有如seq?idno.5所示氨基酸序列的互補決定區cdr3-vl。
8、作為進一步技術方案，所述可變區包括具有如seq?id?no.6所示氨基酸序列的重鏈可變區vh。
9、作為進一步技術方案，所述可變區包括具有如seq?id?no.7所示氨基酸序列的輕鏈可變區vl。
10、作為進一步技術方案，所述抗新布尼亞病毒np抗原的單克隆抗體為igg抗體。
11、第二方面，本專利技術提供了生物材料，所述生物材料選自a-c中的任一項：
12、a.核苷酸，所述核苷酸包括編碼所述抗新布尼亞病毒np抗原的單克隆抗體的核苷酸序列；
13、b.載體，所述載體攜帶所述a中的核苷酸；
14、c.細胞，所述細胞攜帶所述a中核苷酸，或者含有所述b中載體，或者表達所述抗新布尼亞病毒np抗原的單克隆抗體。
15、第三方面，本專利技術提供了上述抗新布尼亞病毒np抗原的單克隆抗體在制備新布尼亞病毒檢測產品中的應用。
16、第四方面，本專利技術提供了一種新布尼亞病毒標記物，包括所述的抗新布尼亞病毒np抗原的單克隆抗體和標記物；
17、所述抗新布尼亞病毒np抗原的單克隆抗體和標記物偶聯。
18、作為進一步技術方案，所述標記物包括酶、熒光分子標記、熒光微球、彩色微球、膠體金、生物素或鏈霉親或素。
19、第五方面，本專利技術提供了一種用于新布尼亞病毒檢測的試劑盒，所述試劑盒包括所述的抗新布尼亞病毒np抗原的單克隆抗體或者所述的新布尼亞病毒標記物。
20、作為進一步技術方案，所述試劑盒包括免疫層析檢測試劑盒、elisa檢測試劑盒、免疫磁微粒檢測試劑盒、免疫熒光檢測試劑盒或免疫印記檢測試劑盒。
21、與現有技術相比，本專利技術具有如下有益效果：
22、本專利技術運用新布尼亞病毒np抗原免疫balb/c小鼠，取小鼠脾細胞與骨髓瘤細胞融合，通過特異性的高通量篩選得到具有高度特異性的雜交瘤細胞，通過培養和再免疫獲得大量小鼠腹水，再經多步分離及純化獲得高純度、高靈敏度和高特異性的抗新布尼亞病毒np抗原的單克隆抗體anti-sftsv-np-mab1，為開發檢測新布尼亞病毒np抗原的免疫試紙條提供了所需的原料。本專利技術的抗新布尼亞病毒np抗原的單克隆抗體anti-sftsv-np-mab1可用于免疫印跡、免疫熒光等免疫學檢測，所獲抗體經驗證具有良好的特異性結合能力。
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1.一種抗新布尼亞病毒NP抗原的單克隆抗體，其特征在于，所述抗新布尼亞病毒NP抗原的單克隆抗體的可變區包括：具有如SEQ?ID?NO.1所示氨基酸序列的互補決定區CDR1-VH、具有如SEQ?ID?NO.2所示氨基酸序列的互補決定區CDR2-VH、具有如SEQ?ID?NO.3所示氨基酸序列的互補決定區CDR3-VH、具有如SEQ?ID?NO.4所示氨基酸序列的互補決定區CDR1-VL、具有如SEQ?ID?NO.14所示氨基酸序列的互補決定區CDR2-VL和具有如SEQ?ID?NO.5所示氨基酸序列的互補決定區CDR3-VL。
2.根據權利要求1所述的抗新布尼亞病毒NP抗原的單克隆抗體，其特征在于，所述可變區包括具有如SEQ?ID?NO.6所示氨基酸序列的重鏈可變區VH。
3.根據權利要求1所述的抗新布尼亞病毒NP抗原的單克隆抗體，其特征在于，所述可變區包括具有如SEQ?ID?NO.7所示氨基酸序列的輕鏈可變區VL。
4.根據權利要求1所述的抗新布尼亞病毒NP抗原的單克隆抗體，其特征在于，所述抗新布尼亞病毒NP抗原的單克隆抗體為IgG抗體。>
5.生物材料，其特征在于，所述生物材料選自a-c中的任一項：
6.權利要求1-4任一項所述的抗新布尼亞病毒NP抗原的單克隆抗體在制備新布尼亞病毒檢測產品中的應用。
7.一種新布尼亞病毒標記物，其特征在于，包括權利要求1-4任一項所述的抗新布尼亞病毒NP抗原的單克隆抗體和標記物；
8.根據權利要求7所述的新布尼亞病毒標記物，其特征在于，所述標記物包括酶、熒光分子標記、熒光微球、彩色微球、膠體金、生物素或鏈霉親或素。
9.一種用于新布尼亞病毒檢測的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括權利要求1-4任一項所述的抗新布尼亞病毒NP抗原的單克隆抗體或者權利要求7或8所述的新布尼亞病毒標記物。
10.根據權利要求9所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括免疫層析檢測試劑盒、ELISA檢測試劑盒、免疫磁微粒檢測試劑盒、免疫熒光檢測試劑盒或免疫印記檢測試劑盒。
...【技術特征摘要】
1.一種抗新布尼亞病毒np抗原的單克隆抗體，其特征在于，所述抗新布尼亞病毒np抗原的單克隆抗體的可變區包括：具有如seq?id?no.1所示氨基酸序列的互補決定區cdr1-vh、具有如seq?id?no.2所示氨基酸序列的互補決定區cdr2-vh、具有如seq?id?no.3所示氨基酸序列的互補決定區cdr3-vh、具有如seq?id?no.4所示氨基酸序列的互補決定區cdr1-vl、具有如seq?id?no.14所示氨基酸序列的互補決定區cdr2-vl和具有如seq?id?no.5所示氨基酸序列的互補決定區cdr3-vl。
2.根據權利要求1所述的抗新布尼亞病毒np抗原的單克隆抗體，其特征在于，所述可變區包括具有如seq?id?no.6所示氨基酸序列的重鏈可變區vh。
3.根據權利要求1所述的抗新布尼亞病毒np抗原的單克隆抗體，其特征在于，所述可變區包括具有如seq?id?no.7所示氨基酸序列的輕鏈可變區vl。
4.根據權利要求1所述的抗新布尼亞病毒np抗...
【專利技術屬性】
技術研發人員：張嚴峻，陳科達，魏文濤，李建華，顏浩，黃志偉，
申請(專利權)人：杭州旭科生物技術有限公司，
類型：發明
國別省市：
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