【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
【國外來華專利技術(shù)】
本專利技術(shù)涉及具有雙重激動劑活性的單體肽，特別是包含經(jīng)修飾的胰高血糖素樣1激動劑和脂聯(lián)素受體激動劑的肽，以及它們在治療糖尿病中的用途。
技術(shù)介紹
1、2型糖尿病對全球公共衛(wèi)生構(gòu)成嚴(yán)重威脅。目前，大多數(shù)可用的代謝性疾病(如糖尿病)的治療方案都針對單一方面，如增強(qiáng)胰島素的產(chǎn)生。然而，對能量穩(wěn)態(tài)擾動的抗性，結(jié)合人類代謝障礙的異質(zhì)性病理生理學(xué)，限制了當(dāng)前藥理學(xué)選擇的可持續(xù)性和有效性。對能量消耗失調(diào)和胰島素抵抗的細(xì)胞特征的新見解表明，多種信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的協(xié)同靶向可能是逆轉(zhuǎn)這些疾病進(jìn)展的極大改善所必需的，而不僅僅是靶向葡萄糖動力學(xué)。
2、胰高血糖素樣肽-1，在本文中也稱為glp1或glpl(7-36)酰胺，具有氨基酸序列【游離氨基末端-haegtftsdvssylegqaakefiawlvkgr-酰胺(seq?id?no:1)】，是一種30個氨基酸殘基的激素，其通過控制食物攝入后胰島素從胰腺β細(xì)胞的釋放來調(diào)節(jié)葡萄糖穩(wěn)態(tài)。該激素在營養(yǎng)/食物攝入后從胃腸道釋放，并刺激餐后胰島素的急性釋放以調(diào)節(jié)血糖。此外，glp1通過作為飽腹感因子并通過延遲胃腸道中消化食物的排空時間來減少食物攝入量，從而減緩胃腸道中的消化作用并且可以減輕體重。具有g(shù)lp1激動劑活性的肽類藥物已經(jīng)進(jìn)行了修飾，以減少蛋白水解降解，特別是通過二肽基肽酶4(dpp-4)降解，并延長半衰期。然而，glp1類似物本身不具有抗炎或抗纖維化作用，并且不影響靶組織中的胰島素抵抗。
3、已描述了glp1與激素類似物的組合，包括glp1與膽囊收縮素、肽yy、胰高血糖素、glp2
4、作為脂肪細(xì)胞分泌的最豐富的肽，脂聯(lián)素是肥胖、胰島素抵抗和炎癥之間相互關(guān)系的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子。伴有胰島素抵抗的中心性肥胖是發(fā)展為2型糖尿病及其并發(fā)癥的關(guān)鍵因素。
5、脂聯(lián)素以單體、三聚體、六聚體或高達(dá)18-mers的高分子量復(fù)合物的蛋白質(zhì)聚集體的形式存在于循環(huán)中。adiporl和adipor2是其介導(dǎo)體內(nèi)和細(xì)胞作用的主要受體。脂聯(lián)素受體發(fā)出amp(一磷酸腺苷)激酶(ampk)激活的信號，發(fā)揮直接作用以調(diào)節(jié)多個器官(包括脂肪組織、肌肉、肝臟和胰腺)內(nèi)的能量穩(wěn)態(tài)，從而改善胰島素敏感性。這些受體幾乎在所有組織和細(xì)胞類型中普遍表達(dá)。此外，脂聯(lián)素受體信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的激活影響多種細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，從而導(dǎo)致廣泛的有益作用，包括：抑制肝臟和肌肉中的脂肪從頭合成和增加脂質(zhì)氧化；減少炎癥介質(zhì)，包括抑制炎性細(xì)胞因子，如il-6、tnf-α和il-lb，以及抑制單核細(xì)胞活化；損傷后抗凋亡和細(xì)胞再生作用；以及抑制促纖維化通路。
6、包括glp1和脂聯(lián)素作用的分子或藥物可以提供單獨(dú)給藥時任一者所沒有的益處。特別地，glp1類似物可有效增加餐后胰島素的產(chǎn)生，而脂聯(lián)素可有效增加胰島素敏感性。這兩種作用的結(jié)合產(chǎn)生對葡萄糖處理更大的影響。已經(jīng)嘗試的一種結(jié)合glp1和脂聯(lián)素的作用的方法是產(chǎn)生含有g(shù)lp1和球狀脂聯(lián)素的融合蛋白。gao等人基于glp1和球狀脂聯(lián)素的分子特性設(shè)計了融合蛋白(mingming?gao,yue?tong,wen?li,xiangdong?gao和wenbing?yao(2013),人工細(xì)胞納米醫(yī)學(xué)和生物技術(shù),41:3,159-164.)。質(zhì)粒構(gòu)建體在細(xì)菌中表達(dá)，所得大蛋白進(jìn)行提取并純化，并且顯示保留了降血糖活性。然而，這種方法的局限性是使用昂貴且低效的表達(dá)系統(tǒng)來生產(chǎn)大蛋白，該大蛋白必須仔細(xì)處理以保持結(jié)構(gòu)完整性。
7、因此，由于其大尺寸、廣泛的翻譯后修飾、自聚集傾向以及與哺乳動物蛋白質(zhì)生產(chǎn)系統(tǒng)相關(guān)的費(fèi)用，對適合人類施用的重組形式的脂聯(lián)素的開發(fā)已被證明具有挑戰(zhàn)性。另一種方法是鑒定能夠與脂聯(lián)素受體結(jié)合并示出激動劑活性的較小肽類似物。一種這樣的激動劑肽，由10個氨基酸化學(xué)合成的肽，稱為aly688(也稱為adp355)
8、【(h-dasn-ile-pro-nva-leu-tyr-dser-phe-ala-dser-nh2)(其中h代表游離氨基末端，斜體d示出給定氨基酸為d構(gòu)型，末端的nh2示出羧基末端是酰胺化的，nva是指l-正纈氨酸(seq?id?no:2))，似乎以特定方式結(jié)合并激活脂聯(lián)素受體。
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、在一個方面，本公開提供了一種融合肽，其包含glp1變體和至少一種脂聯(lián)素激動劑肽，其中至少一種脂聯(lián)素激動劑肽通過間隔子化學(xué)附著于glp1變體。
2、在一些實施方案中，glp1變體包含8位的gly取代。
3、在一些實施方案中，glp1變體包含18位的lys取代。
4、在一些實施方案中，glp1變體包含22位的lys取代。
5、在這些實施方案中，該位置對應(yīng)于seq?id?no:1的位置。在一些實施方案中，glp1變體具有選自seq?id?no:4、seq?id?no:5和seq?id?no:6組的序列。
6、在一些實施方案中，至少一種脂聯(lián)素激動劑肽通過間隔子附著于glp1變體的26位。
7、在一些實施方案中，至少一種脂聯(lián)素激動劑肽通過間隔子附著于glp1變體的34位。
8、在一些實施方案中，至少一種脂聯(lián)素激動劑肽包含第一脂聯(lián)素激動劑肽和第二脂聯(lián)素激動劑肽，第一脂聯(lián)素激動劑肽和第二脂聯(lián)素激動劑肽相同或不同并且各自通過間隔子附著于glp1變體的兩個不同位置。不同的兩個附著位點可以包含glp1變體的位置26和位置34，其中這些位置對應(yīng)于seq?id?no:1的位置。
9、在一些實施方案中，至少一種脂聯(lián)素激動劑肽包含aly688。
10、在一些實施方案中，間隔子包含ggg。
11、在另一方面，本公開提供了一種治療患有2型糖尿病的患者的方法，該方法包括向患者施用本文公開的有效量的融合肽。
本文檔來自技高網(wǎng)...【技術(shù)保護(hù)點】
1.一種融合肽，所述融合肽包含GLP1變體和至少一種脂聯(lián)素激動劑肽，其中所述至少一種脂聯(lián)素激動劑肽通過間隔子化學(xué)附著于GLP1變體。
2.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的融合肽，其中所述GLP1變體包含8位的Gly取代，其中所述位置對應(yīng)于SEQ?ID?NO:1的位置。
3.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的融合肽，其中所述GLP1變體包含18位的Lys取代，其中所述位置對應(yīng)于SEQ?ID?NO:1的位置。
4.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的融合肽，其中所述GLP1變體包含22位的Lys取代，其中所述位置對應(yīng)于SEQ?ID?NO:1的位置。
5.根據(jù)任何前述權(quán)利要求所述的融合肽，其中所述至少一種脂聯(lián)素激動劑肽通過間隔子附接于GLP1變體的26位。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一項所述的融合肽，其中所述至少一種脂聯(lián)素激動劑肽通過間隔子附接于GLP1變體的34位。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一項所述的融合肽，其中所述至少一種脂聯(lián)素激動劑肽包含第一脂聯(lián)素激動劑肽和第二脂聯(lián)素激動劑肽，所述第一脂聯(lián)素激動劑肽和所述第二脂聯(lián)素激動劑肽相同或不同并且各自通
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的融合肽，其中所述不同的兩個連接位點包括所述GLP1變體的位置26和位置34，其中所述位置對應(yīng)于SEQ?ID?NO:1的位置。
9.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的融合肽，其中所述至少一種脂聯(lián)素激動劑肽包含ALY688。
10.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的融合肽，其中所述間隔子包含GGG。
11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的融合肽，其中所述GLP1變體具有選自SEQ?ID?NO:4、SEQ?IDNO:5和SEQ?ID?NO:6組的序列。
12.一種治療患有2型糖尿病的患者的方法，所述方法包括向所述患者施用有效量的前述任何權(quán)利要求中的任一項的融合肽。
...【技術(shù)特征摘要】
【國外來華專利技術(shù)】
1.一種融合肽，所述融合肽包含glp1變體和至少一種脂聯(lián)素激動劑肽，其中所述至少一種脂聯(lián)素激動劑肽通過間隔子化學(xué)附著于glp1變體。
2.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的融合肽，其中所述glp1變體包含8位的gly取代，其中所述位置對應(yīng)于seq?id?no:1的位置。
3.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的融合肽，其中所述glp1變體包含18位的lys取代，其中所述位置對應(yīng)于seq?id?no:1的位置。
4.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的融合肽，其中所述glp1變體包含22位的lys取代，其中所述位置對應(yīng)于seq?id?no:1的位置。
5.根據(jù)任何前述權(quán)利要求所述的融合肽，其中所述至少一種脂聯(lián)素激動劑肽通過間隔子附接于glp1變體的26位。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一項所述的融合肽，其中所述至少一種脂聯(lián)素激動劑肽通過間隔子附接于glp1變體的34位。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：徐恒，拉斯洛·奧特沃斯，
申請(專利權(quán))人：雅利斯塔制藥公司，
類型：發(fā)明
國別省市：
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