【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)屬于生物醫(yī)藥，具體涉及一種用于eber檢測(cè)的試劑盒及其應(yīng)用。
技術(shù)介紹
1、eb病毒在組織上的檢測(cè)金標(biāo)準(zhǔn)為eber原位雜交，eber為eb病毒編碼的小rna，包含eber1和eber2。目前臨床應(yīng)用的檢測(cè)探針均針對(duì)eber1設(shè)計(jì)，且為序列較長(zhǎng)的單條探針，缺點(diǎn)是敏感性較低，對(duì)發(fā)生部分降解的小rna不能完整結(jié)合，較易被洗脫掉，最終導(dǎo)致顯色較淺或者假陰性的結(jié)果。
2、針對(duì)上述技術(shù)問(wèn)題，申請(qǐng)人的在先專利技術(shù)專利申請(qǐng)cn115948608a公開(kāi)了一種用于eber檢測(cè)的探針組及試劑盒，其使用了分別與eber1和eber2特異性結(jié)合的探針，可同時(shí)檢測(cè)兩個(gè)eb病毒編碼的小rna，探針設(shè)計(jì)的長(zhǎng)度較短，增加探針檢測(cè)的敏感性且同時(shí)保證了特異性。該在先專利技術(shù)申請(qǐng)雖然在體外實(shí)驗(yàn)中能夠?qū)崿F(xiàn)敏感性和特異性均達(dá)到100％，但是，其在臨床實(shí)驗(yàn)中的有效性驗(yàn)證結(jié)果為98.18％，仍然存在一定的改善空間。
3、鑒于上述情況，本申請(qǐng)的專利技術(shù)人針對(duì)試劑盒中的引物組進(jìn)行了進(jìn)一步的優(yōu)化，并據(jù)此完成了本專利技術(shù)。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、基于上述原因，本專利技術(shù)提出一種用于eber檢測(cè)的試劑盒及其應(yīng)用。具體而言，為了實(shí)現(xiàn)本專利技術(shù)的目的，本專利技術(shù)擬采用如下的技術(shù)方案：
2、本專利技術(shù)一方面涉及一種用于eber檢測(cè)的試劑盒，所述試劑盒包括核苷酸序列如seq?id?no:2、seq?id?no:6和seq?id?no:8所示的eber1探針以及核苷酸序列如seq?id?no:12、seq?
3、在本專利技術(shù)的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，所述eber1探針及eber2探針的3’端用地高辛標(biāo)記。
4、在本專利技術(shù)的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，所述試劑盒還包括核苷酸序列如seq?id?no:14所示的引物。
5、在本專利技術(shù)的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，其特征在于：選自核苷酸序列如seq?id?no:2、seq?id?no:6、seq?id?no:8所示的eber1探針及選自核苷酸序列如seq?id?no:12、seqidno:13、seq?id?no:15所示的eber2探針的摩爾比為8:12:5：15:15:5。
6、在本專利技術(shù)的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，其特征在于：所述試劑盒還包括te緩沖液、探針雜交緩沖液、胃酶工作液、pbs緩沖液、抗地高辛抗體、dab工作液、去離子水。
7、在本專利技術(shù)的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，其特征在于：te緩沖液的ph為8。
8、在本專利技術(shù)的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，其特征在于：抗地高辛抗體為hrp標(biāo)記的。
9、在本專利技術(shù)的另一方面，還涉及所述試劑盒的應(yīng)用，所述試劑盒在制備診斷eb病毒感染的診斷試劑中的應(yīng)用。
10、在本專利技術(shù)的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，所述eb病毒感染是指胃癌eber陽(yáng)性、淋巴瘤eber陽(yáng)性和/或鼻咽癌eber陽(yáng)性。
11、有益效果
12、本專利技術(shù)所述的用于eber檢測(cè)的探針組及試劑盒使用了分別與eber1和eber2特異性結(jié)合的探針，可同時(shí)檢測(cè)兩個(gè)eb病毒編碼的小rna，探針設(shè)計(jì)的長(zhǎng)度較短，增加探針檢測(cè)的敏感性且同時(shí)保證了特異性，在臨床實(shí)驗(yàn)中可以實(shí)現(xiàn)99％以上的檢測(cè)有效率。
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1.一種用于EBER檢測(cè)的試劑盒，所述試劑盒包括核苷酸序列如SEQ?ID?NO:2、SEQ?IDNO:6和SEQ?ID?NO:8所示的EBER1探針以及核苷酸序列如SEQ?ID?NO:12、SEQ?ID?NO:13和SEQ?ID?NO:15所示的EBER2探針。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，所述EBER1探針及EBER2探針的3’端用地高辛標(biāo)記。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，所述試劑盒還包括核苷酸序列如SEQ?ID?NO:14所示的引物。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于：選自核苷酸序列如SEQ?ID?NO:2、SEQ?IDNO:6、SEQ?ID?NO:8所示的EBER1探針及選自核苷酸序列如SEQ?ID?NO:12、SEQ?ID?NO:13、SEQ?ID?NO:15所示的EBER2探針的摩爾比為8:12:5：15:15:5。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于：所述試劑盒還包括TE緩沖液、探針雜交緩沖液、胃酶工作液、PBS緩沖液、抗地高辛抗體、DAB工作液、去離子水。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于：抗地高辛抗體為HRP標(biāo)記的。
8.權(quán)利要求1-7任意一項(xiàng)所述試劑盒在制備診斷EB病毒感染的診斷試劑中的應(yīng)用。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，所述EB病毒感染是指胃癌EBER陽(yáng)性、淋巴瘤EBER陽(yáng)性和/或鼻咽癌EBER陽(yáng)性。
...【技術(shù)特征摘要】
1.一種用于eber檢測(cè)的試劑盒，所述試劑盒包括核苷酸序列如seq?id?no:2、seq?idno:6和seq?id?no:8所示的eber1探針以及核苷酸序列如seq?id?no:12、seq?id?no:13和seq?id?no:15所示的eber2探針。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，所述eber1探針及eber2探針的3’端用地高辛標(biāo)記。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，所述試劑盒還包括核苷酸序列如seq?id?no:14所示的引物。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于：選自核苷酸序列如seq?id?no:2、seq?idno:6、seq?id?no:8所示的eber1探針及選自核苷酸序列如seq?id?n...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：馬慧寧，呂佳，竇凱佳，劉麗華，樊旭利，陳曦，劉勝南，朱玉潔，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：
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