【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及桃組織培養，尤其涉及一種h2o2處理抑制插條褐化并促進不定根發生的方法。
技術介紹
1、桃原產我國，是當下產業中最重要的果樹作物之一。在實際生產中，桃樹的扦插繁殖面臨一些困難和挑戰。其中，扦插生根率低會導致繁殖效率低下，生產成本和時間成本增加。同時，桃樹不定根發育是一個受激素調控且多基因互作的復雜過程，容易被插條自身條件、環境條件以及植物生長調節劑等影響，因此需要綜合考慮。盡管在果樹扦插領域已經有一系列提高扦插成活率的措施，但在桃樹實際生產中，這些技術手段和生產管理方法的運用實踐較少，且理論背景和作用機制并不清晰。
2、不定根發生是扦插成活的前提和關鍵步驟之一。在扦插過程中，一定的處理和環境條件會刺激插條的細胞分裂和分化，從而促進了不定根的發生。不定根的形成為插條提供了吸收水分和養分的能力，使其能夠繼續生長并最終成活為獨立的植株。同時，桃樹組織極易褐化，扦插時由于組織損傷、細菌或真菌感染、水分失衡等因素引起的插條褐化現象，較其他果樹更容易發生，這也會阻礙不定根的發生和扦插成活。
3、h2o2(過氧化氫)在植物生長和發育過程中扮演著重要的角色。h2o2在植物根系生長中作為信號分子，參與調節細胞分裂、伸長和形態建成。在植物的根尖細胞中，h2o2被發現參與調控細胞壁松弛和伸長過程，從而影響了根系的生長。其次，當植物受到逆境脅迫時，比如鹽脅迫、干旱、病原菌感染等，h2o2還能夠作為一種活性氧物質，參與清除自由基和調節抗氧化反應，起到保護細胞膜、蛋白質和dna免受損傷的作用。這些保護作用有助于植物根系
4、h2o2既可以作為信號分子參與植物根系的正常生長發育過程，又在面對逆境時發揮了保護作用。因此，我們在實驗室條件下探索了一種h2o2處理促進不定根的發生、同時抑制外植體褐化的方法，為實際生產中扦插生根和插條抗褐化打下研究基礎。
技術實現思路
1、本專利技術的目的就在于克服現有技術存在的缺點和不足，提供一種h2o2處理抑制插條褐化并促進不定根發生的方法。
2、本專利技術的目的是這樣實現的：
3、使用廉價且易獲取的h2o2替代不定根再生培養基中的一些昂貴植物激素和維生素添加劑，對桃組培苗的不定根生長技術進行了優化，包括以下步驟：
4、①取桃的實生種子進行播種培養，獲得無菌組培苗；
5、②將步驟①得到的無菌苗切分處理作為插條；
6、③將步驟②處理所得插條轉接到不定根再生常規培養基或不定根再生改良培養基中；
7、④弱光照下無菌培養，進行不定根再生誘導；
8、所述步驟①中的桃選用油桃；
9、所述步驟①中的獲得無菌組培苗是：
10、a、取桃核消毒后干燥冷藏；
11、b、敲核取出種子，消毒后，接種到播種培養基中培養25～40天獲得無菌組培苗。
12、所述步驟③中的不定根培養基是：
13、不定根再生常規培養基，以1/2ms培養基為基礎培養基，1/2ms培養基中包括以下濃度的組分：25g/l蔗糖、8g/l瓊脂及2.0mg/l?iba；
14、不定根再生優化培養基，以1/2ms培養基為基礎培養基，1/2ms培養基中包括以下濃度的組分：以下濃度的組分：25g/l蔗糖、8g/l瓊脂、2.0mg/liba及0.3～1.5mmol/l?h2o2；
15、所述1mg/ml?h2o2，于4℃保存；
16、所述所有培養基都需在高壓滅菌前將ph調整至5.65～5.95；
17、以1/2ms培養基為基礎培養基，1/2ms培養基中包括以下濃度的組分：25g/l蔗糖、8g/l瓊脂；
18、播種啟動培養基以1/2ms為基礎培養基，還包括以下濃度的組分：0.2～1.0mg/l6-ba、0.2～1.0mg/l?iba、28～32g/l蔗糖、8～10g/l瓊脂；
19、所述播種培養獲得無菌組培苗的條件為：培養溫度為25℃，照度1500lux、每日大約16h光照、8h黑暗；
20、所述不定根再生條件具體為：培養溫度為25℃，照度1500lux、每日大約16h光照、8h黑暗，培養3-4周；
21、所述不定根再生優化培養基中所添加h2o2濃度在0.3～1.5mmol/l。
22、工作機理：
23、在本專利技術中，所述不定根再生優化培養基以1/2ms培養基為基礎，ms培養基含有植物生長和發育所需的營養物質，支持植物的生長、再生和增殖；此外，還可根據具體實驗需要進行改良和調整，以適用于不同的植物種類的培養要求；1/2ms培養基相對于ms培養基來說，含有更低的鹽類和植物生長調節劑濃度，廣泛用于再生培養領域；iba(吲哚丁酸)是一種常用的生根促進劑，可以促進莖段、葉片或其他植物組織形成新根，使用2.0mg/l的iba可以增加桃組培生根的成功率；組織培養中合適范圍內的ph值有利于培養基中各種營養物質的吸收和利用，也有利于細胞分裂和再生，對于桃的組織培養，一般來說，最適合的ph值范圍也是在5.8到6.2左右。
24、與現有桃不定根再生技術相比，本專利技術具有下列優點和積極效果：
25、①針對實驗室中桃不定根生根難、外植體容易褐化，以及實際生產中桃扦插生根困難、插條易褐化死亡的難題，使用廉價且易獲取的h2o2替代不定根再生培養基中的一些昂貴植物激素和維生素添加劑，對桃組培苗的不定根生長技術進行了優化。
26、②為減緩外植體褐化提供了新的解決途徑。
27、③可在桃優系工廠化試管育苗的生根階段得到應用，并具有良好的實際開發和應用前景。
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1.一種H2O2處理抑制插條褐化并促進不定根發生的方法，其特征在于：
【技術特征摘要】
1.一種h2o2處理抑制插條褐化并...
【專利技術屬性】
技術研發人員：韓月彭，高安琪，鄭蓓蓓，趙云，張若西，廖燎，
申請(專利權)人：中國科學院武漢植物園，
類型：發明
國別省市：
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